JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Neuroscienze
0 visualizzazioni • 2:42 min. • June 17th, 2025
Prendi un topo transgenico anestetizzato che esprime proteine fluorescenti nella microglia. Fissarlo su un telaio stereotassico con un tavolino motorizzato sotto un microscopio a due fotoni.
Il cranio è dotato di un tubo metallico con fondo di vetro che appiattisce delicatamente l'alveo sopra la regione dell'ammonide 1 o CA1 del corno ippocampale, garantendo un'interfaccia ottica chiara senza
un'eccessiva pressione sul tessuto sottostante.
Riempire il tubo metallico con acqua per ottimizzare la trasmissione ottica.
Attivare il laser pulsato alla lunghezza d'onda di eccitazione.
Utilizzando la fluorescenza dal parenchima cerebrale e la luce riflessa dal tubo metallico, regolare la messa a fuoco sulla regione CA1.
Riposizionare la testa del mouse per allineare il fondo del vetro parallelamente al piano di imaging, garantendo una messa a fuoco uniforme su tutto il campo visivo.
Regolare l'obiettivo per una risoluzione ottimale e osservare le dinamiche microgliali in vivo nella regione CA1.
Successivamente, visualizza il giro dentato, dove le microglia fluorescenti confermano l'integrità di CA1.
Posizionare il mouse nel dispositivo di supporto della testa sotto la lente dell'obiettivo del micr
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