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Raccolta e l'estrazione di campioni d'aria professionale per l'analisi del DNA fungoso
Raccolta e l'estrazione di campioni d'aria professionale per l'analisi del DNA fungoso
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JoVE Journal Environment
Collection and Extraction of Occupational Air Samples for Analysis of Fungal DNA

Raccolta e l'estrazione di campioni d'aria professionale per l'analisi del DNA fungoso

Full Text
13,117 Views
12:02 min
May 2, 2018

DOI: 10.3791/56730-v

Angela R. Lemons1, William G. Lindsley1, Brett J. Green1

1Allergy and Clinical Immunology Branch, Health Effects Laboratory Division, National Institute for Occupational Safety and Health,Centers for Disease Control and Prevention

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Determinare la diversità fungina all'interno di un ambiente è un metodo utilizzato in studi di salute sul lavoro per identificare i pericoli per la salute. Questo protocollo descrive estrazione del DNA dai campioni d'aria professionali per l'amplificazione e sequenziamento delle regioni ITS fungine. Questo approccio rileva molte specie fungine che possono essere trascurati dai metodi tradizionali di valutazione.

L'obiettivo generale di questa metodologia di campionamento dell'aria e di estrazione del DNA è quello di ottenere DNA genomico fungino che possa essere amplificato, sequenziato e posizionato tassonomicamente per identificare potenziali rischi fungini all'interno di contesti professionali. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della valutazione dell'esposizione professionale, ad esempio a quali pericoli fungini sono esposti i lavoratori che possono avere effetti negativi sulla salute. Il vantaggio principale di questa tecnica è che le specie fungine che rimangono non rilevate utilizzando metodi basati sulla coltura o sulla microscopia possono essere chiarite utilizzando approcci basati sul sequenziamento.

Per assemblare la cassetta del filtro di campionamento dell'aria, posizionare un tampone di supporto del filtro in cellulosa sulla superficie grigliata del pezzo di base, quindi, con l'aiuto di una pinza del filtro, posizionare un filtro sopra il cuscinetto di supporto del filtro con il lato di raccolta rivolto verso l'alto. Dopo il montaggio, sigillare la cassetta del filtro inserendo la calandra di prolunga e premendola saldamente e uniformemente con una pressa manuale o pneumatica. Quindi, montare la cassetta assemblata sopra il campionatore di aerosol NIOSH e spingere verso il basso il più possibile.

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Scienze ambientali problema 135 occupazionale campionamento dell'aria aria di estrazione del DNA genomico microbiologia contaminanti dell'aria sul lavoro identificazione del pericolo fungine regioni fungine distanziatore interno trascritto fungina sequenziamento del DNA

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