Name: 활용 칙 신경 튜브에서 뉴런의 유전 정의된 그룹 Axonal 경로를 벗기기 비켜에서 Electroporation (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-05-02T20:17:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: 학습하세요 병아리 척수에서 유전적으로 정의된 뉴런의 축삭 경로를 시각화하는 방법을. in ovo 전기천공 기술을 활용하여 신경 발달 및 신경 회로 연구에 활용할 수 있습니다.

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이 작품은 이스라엘 과학 재단, 건강의 이스라엘 사역 및 DFG (독일 학술 진흥 재단)에서 AK로 보조금에 의해 지원되었다.

I. Electroporation 에그 처리 <ol><li> 37-38 락을 쟁반과 함께 ° C, 바람직 인큐베이터에 humidified 보육 세트에 계란을 넣으십시오. </li><li> 그들이 햄버거 &amp; 해밀턴 (HH) 단계에 18-20에 도달하면 배아는 부화의 66 시간 정도 후에 electroporated 있습니다. 이 단계에서는 머리 트렁크 (경추 굴곡라는 조건)와 같은 앞쪽에, 사후, 오른쪽과 왼쪽 vitelline의 정맥을 볼 수 정상적으로 엑스트라 배아 혈관의 광대한 설정 직각 놓여 있습니다. 이것은 확장기에 의존 특정 표현 1,3,4에 대한 최적의 무대입니다. 가능한 및 동기 배아를 얻기 위해서는, 온도와 보육의 습도를 모니터하는 것이 중요합니다. </li><li> 부화의 66 시간 후에, 인큐베이터에서 계란을 제거합니다. 수평 계란을 넣으십시오. 50~10분 기다립니다. 배아 이제 계란의 위쪽 기둥에 있습니다. </li></ol> 준비 <ol><li> 페니실린 / 스트렙토 마이신 (P / S) (1:100 희석)와 행크의 솔루션을 준비합니다. </li><li> microcapillary에 유리 모세관 (0.5 mm 직경) 당기세요. </li><li> micromanipulator에 전극 (텅스텐)을 장소와 펄스 발생기 (ECM 830)에 전극을 연결합니다. </li><li> - 3, 펄스 50 MS의 길이 전압 30V, 펄스의 수를 다음과 같은 매개 변수를 사용하여 펄스 발생기를 조정합니다. </li><li> 입 피펫, 주사기 바늘과 테이프를 준비합니다. </li><li> DNA (2-5μg/μl)의 원하는 혼합을 준비하고 빠른 그린 염료를 추가합니다. </li></ol> 윈도우와 electroporation <ol><li> 주사기를 사용하여 각각의 난자에서 알부민의 5-6 ML를 제거합니다. </li><li> 작은 가위는 계란의 상단에 타원형 창을 열고. </li><li> 0.5 - 1ml 행크 + P / S 솔루션으로 젖은 배아. </li><li> 유리가 DNA 혼합물로 microcapillary 로드할 수, 입 피펫을 사용합니다. </li><li> 당신 향해 꼬리로 배아를 놓습니다. 이 단계에서 배아의 척수는 분명하게 볼 수 있습니다. 따라서, 어떤 대조 기술이 필요하지 않습니다. 척수는 양쪽의 머리와 꼬리를 봉인이지만, microcapillary 충분히 얇은 경우, 찔린 작은 구멍을하실 수 있으며 얕은 각도에 신경 튜브를 관통합니다. 오른쪽 직경 microcapillary는 DNA와 그것을 손상하지 않고 튜브를 침투하고 정기적으로 폭발로 DNA를 풀어 쉽게 로드할 수 있습니다. </li><li> 입 피펫을 사용하여 DNA를 주사. 녹색 염료 개발 두뇌의 vesicles까지 꼬리의 끝부분에서 전파해야합니다. </li><li> 튜브 자체 및 펄스을 건드리지 않고,로 할 수있는 근처의 신경 튜브에 병렬 전극을 삽입합니다. 펄스의 당시 전극은 전기 전도성을 허용에 대한 액체로 덮여 있어야합니다. 보통 행크의 구걸에 추가의 양은 충분합니다. 그렇지 않다면 펄스로 행크의 직전 한 방울을 추가합니다. </li><li> 조심스럽게 전극을 제거하고 테이프로 창문을 밀봉. 다음 잠복기 동안 배아의 건조 방지하기 위해 완전히 계란을 밀봉하는 것이 중요합니다. </li><li> 인큐베이터에있는 계란을 돌려 놓습니다. </li></ol> II. 척수 오픈 책을 준비 배아에서 척수의 분리 <ol><li> 계란에서 E6에서 eletroporated 배아를 제거하고 PBS를 포함하는 실리콘과 코팅 페트리 접시에 놓으십시오. </li><li> 세포막을 버려야하고 개최 핀을 사용하여 자신의 복부 측면에있는 배아를 스트레치. </li><li> 날카로운 텅스텐을 사용하면 아래 꼬리로 hindbrain에서 지붕 판을 따라 세로 절개를 microcapillary. </li><li> 멀리 척수의 지느러미 루트 신경 (DRGs)를 분리, 척수의 양쪽에서 추가이 세로 incisions하십시오. </li><li> 척수는 그대로두고, 꼬리에서 hindbrain 시작 조직에서 바닥 플레이트를 분리합니다. </li><li> 좋은 가위를 사용하여 hindbrain에서 가로 섹션에서 척수를 잘라 본체에서 분리. </li></ol> 정치 <ol><li> 실리콘은 hindbrain에서 평면 장착 준비를 생산 꼬리에 그것을 잡아 핀을 사용하여 PBS를 포함하는 코팅 새로운 배양 접시에있는 분리된 척수를 벌리고. </li><li> 접시에서 PBS를 붓고 및 인산염 버퍼 호수의 4 % paraformaldehyde로 바꾸십시오. </li><li> 1 시간 동안 실온에서 알을 품다. </li></ol> Immunohistochemistry <ol><li> PBS의 기본 항체가 들어있는 유리병에 고정 척수를 전송합니다. </li><li> 4 박 이상의 부드러운 agitations로 품어 ° C. </li><li> PBS로 항체 X5 회, 부드러운 agitations 1 시간 동안 각 씻어 씻으십시오. </li><li> 이차 항체를 추가하고 4 박 이상의 부드러운 agitations로 품어 ° C. </li><li> 각 PBS와 항체 X5 번 씻으십시오부드러운 agitations 1 시간 동안 씻어. </li></ol> 이미징 장착 공개돼 <ol><li> 스미어 그리스이나 실리콘 슬라이드에 사각형 모양과 내에 PBS 드립. </li><li> 핀셋과 파스퇴르 피펫으로 주위의 액체를 밖으로 무승부를 사용하여 사각형의 중앙에 뻗어 척수를 놓습니다. </li><li> 척수에 장착 매체에서 한두 방울을 넣고 커버 전표로 커버. 스쿼시는 기포를 방지합니다. </li><li> 4 ° C.에 어두운 슬라이드를 유지 </li><li> 공촛점 현미경을 사용하여 척수를 검사합니다. </li></ol>

<ol><li>Zisman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteolysis+and+membrane+capture+of+F-spondin+generates+combinatorial+guidance+cues+from+a+single+molecule%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Proteolysis and membrane capture of F-spondin generates combinatorial guidance cues from a single molecule.</a> J Cell Biol. 178 (7), 1237-1249 (2007).</li>
<li>Arakawa, T., Iwashita, M., Matsuzaki, F., Suzuki, T., Yamamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paths%2C+elongation%2C+and+projections+of+ascending+chick+embryonic+spinal+commissural+neurons+after+crossing+the+floor+plate%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Paths, elongation, and projections of ascending chick embryonic spinal commissural neurons after crossing the floor plate.</a> Brain Res. 1223, 25-33 (2008).</li>
<li>Avraham, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+control+of+axonal+guidance+and+sorting+in+dorsal+interneurons+by+the+Lim-HD+proteins+Lhx9+and+Lhx1%5BTitle%5D)+AND+%22+Neural+Dev%22%5BJournal%5D)">Transcriptional control of axonal guidance and sorting in dorsal interneurons by the Lim-HD proteins Lhx9 and Lhx1.</a> Neural Dev. 4 (1), 21(2009).</li>
<li>Timmer, J., Johnson, J., Niswander, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+in+ovo+electroporation+for+the+rapid+analysis+of+neural-specific+murine+enhancers%5BTitle%5D)+AND+%22Genesis%22%5BJournal%5D)">The use of in ovo electroporation for the rapid analysis of neural-specific murine enhancers.</a> Genesis. 29 (3), 123-132 (2001).</li>
<li>Reeber, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Manipulating+Robo+expression+in+vivo+perturbs+commissural+axon+pathfinding+in+the+chick+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Manipulating Robo expression in vivo perturbs commissural axon pathfinding in the chick spinal cord.</a> J Neurosci. 28 (35), 8698-8708 (2008).</li>
</ol>

여자의 배아에 플라스미드 DNA의 Electroporation은 생체내 이소성 표현을위한 강력한 기술로 발전. 특정 강화하고, 여자의 electroporation의 결합 뉴런 1,3,5의 유전자 정의된 그룹의 axonal 경로를 파악을 위해 신속하고 효율적인 도구를 제공합니다. Cre 호텔 / LoxP 및 Gal4/UAS의 증폭 시스템을 활용하는 것은 표현의 수준 및 기간을 확대하실 수 있습니다. 새로운 그림들은 axonal 계획의 방향에 의해 정의된 interneuron의 subpopulations에서 발생 axonal 신호의 복잡한 발산입니다. 또한 두의 연결 인구의 동시 분자와 공간적 제한 라벨을 획득하실 수 있습니다. 따라서,의 연결 회로 3 아키텍처에 대한 정보를 제공합니다.

활용 칙 신경 튜브에서 뉴런의 유전 정의된 그룹 axonal 경로를 벗기기 비켜에서 electroporation

Deciphering Axonal Pathways of Genetically Defined Groups of Neurons in the Chick Neural Tube Utilizing in ovo Electroporation

뉴런에서 기자 유전자의 표현 드라이브 향상제 요소의 고​​용은 axonal 투영를 추적하기위한 널리 사용되는 패러다임이다. 척추 동물에서 척추 interneurons의 axonal 투영을 추적하는 경우, 세균 라인 타겟 기자의 유전자가 좌우 대칭으로 대칭 상표를 얻을 수 있습니다. 따라서, 그것은 ipsi 및 콘트라 옆으로 돌출 axons을 구별하기 어렵습니다. 여자가 신경 튜브로 일방적 electroporation은 중추 신경계의 한쪽으로 리포터 유전자의 표현을 제한하고, 양쪽에 axonal 영사에 따라 유용한 수단을 제공<sup&gt; 1 ,2 - 5</sup&gt;. 이 동영상은 주사하기 전에 달걀을 처리하는 방법 첫째 보여줍니다. HH 단계 18-20에서 DNA는 신경 튜브의 성례의 수준으로 주입 후, 텅스텐 전극은 배아에 병렬 배치하고 짧은 전기 펄스는 펄스 발생기와 함께 관리됩니다. 계란은 테이프로 봉인과 발전을위한 인큐베이터에 다시 배치됩니다. 사흘 후 (E6) 척수는 배아에서 열린 도서 준비로 제거 고정하고, 전체 마운트 항체 염색법에 대한 처리됩니다. 스테인드 척수가 슬라이드 장착과 공촛점 현미경을 사용하여 시각입니다.

이 동영상은 이용 배아 여자 척수에서 뉴런의 유전자 정의된 그룹의 axonal 경로를 시각화하는 방법을 보여줍니다<em&gt; 비켜에서</em특정 향상제 요소의 통제하에 기자 유전자&gt; electroporation.

활용 칙 신경 튜브에서 뉴런의 유전 정의된 그룹 Axonal 경로를 벗기기 비켜에서 Electroporation

신경세포에서 리포터 유전자의 발현을 유도하기 위해 인핸서 요소를 사용하는 것은 축삭 투사(axonal projection)를 추적하는 데 널리 사용되는 패러다임입니다. ...를 추적하기 위해...

안녕하세요, 저는 예루살렘 히브리 대학교 의학 신경생물학과의 Dr.Review Klar 연구실 소속 Ham입니다. 안녕하세요, 저는 Sophie Esman이며 저 또한 Lars 연구실 소속입니다. 오늘은 In vivo 전기천공법 및 척수 오픈북(open book) 표본 제작 절차를 보여드리겠습니다.저희 실험실에서는 배아 척수 내 유전적으로 정의된 신경세포군(neuronal population)의 축삭 궤적을 연구하기 위해 이 절차를 사용합니다. 그럼 시작하겠습니다. 이 절차를 시작하려면, 수정한 화이트 레그혼(white leghorn) 계란을 상온에서 37~38 °C의 가습 인큐베이터(가급적 흔들림 쟁반이 있는 것)로 옮기십시오.생존 가능하고 동기화된 배아를 얻기 위해서는 인큐베이터의 온도와 습도를 모니터링하는 것이 중요합니다. 병아리 배아가 hamburger and Hamilton 또는 HH stage 18에서 20 단계에 도달했을 때 전기천공법을 시행하며, 이 단계는 인핸서 의존적 특이적 발현을 위한 최적의 단계입니다. 이 단계에서 머리는 몸통과 직각을 이룹니다.또한 HH 단계 18에서 20 사이에는 전방 및 후방의 좌우 vital line vessel과 같은 방대한 세트의 배외 혈관들이 관찰되어야 합니다. 병아리 배아는 66시간의 배양 후 HH 단계 19에서 20에 도달하며, 이때 인큐베이터에서 알을 꺼냅니다. 알을 꺼낸 후, 수평으로 놓은 상태에서 5분에서 10분 동안 기다립니다. 이제 배아는 알의 상극(upper pole)에 위치하게 됩니다.전기천공법을 실시하기 전, mL당 100 unit의 페니실린과 mL당 0.1 mg의 스트렙토마이신이 포함된 Hank's 용액을 준비합니다. µL당 2~5 µg 농도로 원하는 DNA 혼합물을 준비하고, 주입된 DNA를 쉽게 시각화할 수 있도록 fast green 염료를 소량 첨가합니다. 또한 마우스 피펫, 멸균 주사바늘, 작은 가위 및 테이프를 함께 준비합니다.피펫 풀러를 사용하여 직경 0.5 millimeter 유리 모세관을 당겨 마이크로 모세관을 준비합니다. 텅스텐 전극을 마이크로 매니퓰레이터에 장착하고 전극을 펄스 발생기에 연결합니다. 펄스 발생기의 전압을 minus 30 volts로, 각 펄스의 길이를 50 milliseconds로, 펄스 횟수를 3회로 설정합니다.배아를 노출시키고 다루기 전에 전기천공법을 진행하십시오. 주사기를 알의 좁은 극단에 삽입하여 각 알에서 5~6 mL의 알부민을 제거합니다. 알부민은 쏟아지는 것을 방지하기 위해 제거합니다.다음 단계에서 절단할 때, 작은 가위를 사용하여 절단하십시오. 병아리 배아를 노출시킨 후 달걀 상단에 타원형 창을 내고, 0.5~1 mL의 hanks 및 penicillin streptomycin 용액으로 적셔줍니다. 그다음, 마우스 피펫을 사용하여 유리 마이크로 모세관을 충전합니다.DNA 염색약 혼합물을 사용하여 적절한 직경의 마이크로 모세관에 DNA를 쉽게 로딩해야 합니다. 실체 현미경 하에서 신경관에 DNA를 주입할 배아의 위치를 잡습니다. 배아의 꼬리 부분이 사용자 쪽을 향하도록 배치하십시오.이 발달 단계에서는 척수가 명확하게 보이기 때문에 별도의 대조 염색 기술이 필요하지 않습니다. 척수는 머리 쪽과 꼬리 쪽 끝이 밀폐되어 있습니다. 하지만 미세 모세관으로 천자하여 신경관에 구멍을 내고 얕은 각도로 관통시킬 때, 충분히 가늘고 적절한 직경을 가진 미세 모세관을 사용해야 신경관을 손상시키지 않고 관통할 수 있습니다.마우스 피펫(mouth pipette)을 사용하여 DNA를 주입합니다. 적절한 직경의 마이크로 모세관을 사용하여 일정한 호흡으로 DNA를 방출시켜야 합니다. 녹색 염료가 꼬리 끝에서부터 발달 중인 뇌의 뇌포(vesicles)까지 퍼져 나가야 합니다.신경관이 가득 찰 때까지 주입하십시오. 주입된 DNA가 세포 내부로 진입하기 위해서는 DNA 전기천공법이 필요합니다. 먼저, 전극을 신경관과 평행하게 배치하고, 신경관 자체에 닿지 않도록 최대한 가까이 둡니다. 펄스 동안 전기 전도성이 확보될 수 있도록 전극이 액체에 잠겨 있는지 확인하십시오.일반적으로 배아를 노출시킨 직후에 Hank 용액을 첨가하는 것으로 충분합니다. 하지만 그렇지 않은 경우에는 전극을 배치하고 액체에 담근 상태에서 펄스를 가하기 직전에 Hank 용액 한 방울을 첨가하여 전기 조작을 수행한 다음, 전극을 조심스럽게 제거하고 테이프로 윈도우와 난자를 밀봉합니다. 이후 배양 기간 동안 배아가 건조되는 것을 방지하기 위해 난자를 완전히 밀봉하는 것이 중요합니다.알을 다시 인큐베이터에 넣고 병아리 배아가 발달 단계인 배아 6일 차(E6)에 도달할 때까지 배양합니다. 전기천공법이 시행된 배아가 발달 단계인 배아 6일 차(E6)가 되어 이미징을 할 때가 되면, 전기천공 3일 후인 E6에 미세 가위를 사용하여 배아를 알에서 꺼내 PBS가 담긴 실리콘 코팅 페트리 접시에 옮깁니다.막을 제거하고, 핀을 실리콘에 박아 고정하여 배아의 복측이 위로 오도록 팽팽하게 폅니다. 날카로운 텅스텐 마이크로 모세관을 사용하여, 후뇌부터 꼬리까지 지붕판(roof plate)을 따라 세로로 절개합니다.척수의 양측에 두 개의 세로 절개를 추가로 가하여, 등쪽뿌리신경절(DRG)을 척수에서 분리합니다. 꼬리 부분부터 후뇌까지 바닥판(floor plate)을 조직에서 분리하되, 척수는 손상되지 않도록 유지합니다. 마지막으로 미세 가위를 사용하여 후뇌 부위에서 척수를 횡단면으로 절단하고 척수를 몸체에서 분리합니다.척수를 분리했으므로, PBS가 담긴 새로운 실리콘 코팅 페트리 접시에 척수를 펼치고, 핀을 사용하여 후뇌부터 꼬리까지 고정함으로써 평면 마운트 표본을 제작합니다. 척수를 PBS 내 4% 파라포름알데히드에 넣고 상온에서 1시간 동안 고정합니다. 척수를 펼친 상태로 마운트하기 위해, 상세히 안내된 면역조직화학법 서면 프로토콜에 따라 면역 염색을 수행합니다. 이후 이미징을 위한 표본 준비를 마칩니다.슬라이드 위에 그리스 또는 실리콘을 직사각형 모양으로 도포하고, 그 직사각형 내부에 PBS를 떨어뜨립니다. 핀셋을 사용하여 척수를 직사각형 중앙에 펼쳐서 배치하고, 주변의 액체를 제거합니다. 파스퇴르 피펫을 사용하여 마운팅 용액 1~2방울을 척수 위에 떨어뜨린 후 커버슬립으로 덮습니다.커버 슬립에 압력을 가합니다. 공기 방울이 생기지 않도록 주의하십시오. 슬라이드는 4 °C의 암소에 보관하십시오.공초점 현미경을 사용하여 척수를 관찰합니다. 다음은 대조군 실험에서 나타난 병아리 척수 중간뉴런의 축삭 투사 결과의 대표적인 예시입니다. CMV의 보편적 인핸서 요소를 이용하여 모든 뉴런에서 RFP가 발현되었으며, 대부분의 뉴런과 그 축삭들이 표지되었습니다. 이러한 경우 뉴런 하위 집단의 축삭 경로를 판별하는 것은 불가능합니다.하지만 특정 강화 요소를 적용하면, 본 예시의 특정 하위 집단인 DI two 뉴런의 정의된 축삭 경로가 드러납니다. 지금까지 E 3 단계에서 특정 뉴런 강화제를 사용하여 닭의 신경관을 전기적으로 조작하는 방법과 E 6 단계에서 개방형 척수를 준비하는 방법을 보여드렸습니다. 이 절차를 수행할 때는 주의 깊고 인내심 있게 작업해야 함을 기억하십시오.이상입니다. 시청해 주셔서 감사드리며, 실험에 좋은 결과가 있기를 바랍니다. 행운을 빕니다.

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연구

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Biology

생물학

utero의 electroporation에서 생체내에의 연결 전구 세포를 transfecting위한 가치있는 방법입니다. 전극과 electroporation의 발달 timepoint의 위치에 따라, 피질 세포의 특정 하위 집합을 타겟팅할 수 있습니다. 타겟 세포는 다음 생체내 또는 유전 변경의 효과에 대한 체외에서 분석할 수 있습니다.

utero에서 Electroporation은 두피 뉴런의 하위 집합의 유전자 기능을 학습에 대한 기본의 연결을 문화 뒤에

utero의 electroporation에서 개발 중추 신경계 (CNS)에서 공간과 temporally 제어 방식으로 신속한 유전자 전달 수 있습니다. 여기서 우리는 telencephalon, diencephalon 및 망막을 포함한 여러 배아 CNS의 도메인으로 표현 구조를 제공하는 데 사용할 수있는 utero의 electroporation 프로토콜에 매우 적응을 설명합니다.

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Dopaminergic 신경 세포 개발에서 유전자 기능을 유학 칙의 Midbrain에서 비켜 Electroporation에

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발달 신경 생물학의 근본적인 문제는 어떻게 신경 네트워크가 배아 뇌에 설립되어있다. 여기에서 우리는 크레 / 훈제 연어 - 플라스미드와 지느러미의 interneurons 레이블을 다양한 발달 단계에서 자신의 축삭 돌기 시냅스 목표를 추적하는 조류 후뇌의 PiggyBac 매개 DNA 전위 시스템과 같은 새로운 유전 도구와의 electroporation 기술을 결합했다.

병아리 배아에서 축삭 궤적과 시냅스 대상을 추적하는 후뇌의 일렉트로

이 비디오는 in ovo electroporation으로 transfection 후 절개된 병아리 배아 척수 샘플에 대해 전체 전사체 분석을 수행하기 위한 기본 단계를 보여줍니다.

electroporation하여 병아리 배아 척수에서 차동 유전자 발현의 RNA-SEQ 분석

이 논문은 단일 세포 수준과 형광 표지 된 뉴런의 흥분성 뉴런의 연결 구조를 설명하는 자궁 전기 (IUE)에서 사용하는 프로토콜을 제공한다. 조직학은 수지상 및 축삭 돌기를 특성화하는 데 사용됩니다. 급성 슬라이스 전체 셀 기록 흥분성을 조사하기 위해 사용된다.

자궁 내 일렉트로는 신경 세포의 부분 집단의 흥분 및 단일 세포의 연결을 연구에 접근

조류와 포유류의 청각 뇌간 신경은 빠른 청력 엔코딩에 특화되어있어 정상적인 청력 기능을위한 기본적인 과정입니다. 이러한 뉴런은 배아 뒷다리의 뚜렷한 전구체에서 발생합니다. 우리는 청각 발달 과정에서 유전자 기능을 연구하기 위해 닭 배아의 뒷배부에 유전자를 발현시키기 위해 일렉트로 포 레이션을 이용하는 기술을 제시한다.

닭 오라클 Brainstem의 Ovo Electroporation에서

형광 라벨 tangentially 마이그레이션에 대 한 방법을 설명 셀 electroporation, 그리고 마이그레이션 시각화 하기 위해 플랫-마운트 문화에서 레이블이 지정 된 셀 이동의 시간 경과 영상 셀 개발 병아리 광섬유 tectum에 동작 .

개발 병아리 광섬유 Tectum에 접선 셀 이동의 시각화

병아리는 다양한 연구를 위해 비용 효율적이고 접근 가능하며 널리 이용 가능한 모델 유기체입니다. 여기에서는 조류 내이 발달 및 재생의 기초가되는 분자 메커니즘을 이해하기 위해 일련의 프로토콜이 자세히 설명되어 있습니다.

조류 내이 발달을 연구하는 Ovo 및 Ex Ovo 방법에서

학습하세요 병아리 척수에서 유전적으로 정의된 뉴런의 축삭 경로를 시각화하는 방법을. in ovo 전기천공 기술을 활용하여 신경 발달 및 신경 회로 연구에 활용할 수 있습니다.

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