Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- סוכרת מסוג 1 היא מחלה אנושית שבה מערכת החיסון הורסת תאי בטא לייצור אינסולין בלבלב. ראשית, להרדים דג בתמיסה של 2-פנוקסיאתנול במי דגים.
לנהל את סטרפטוזוצין על ידי הזרקה תוך-פריטונית מתחת למחוך האגן בצד הגחוני של דג הזברה. סטרפטוזוצין דומה מבחינה מבנית N-אצטילגלוקוסאמין, ליגנד שקושר את קולטן GLUT2 על תאי בטא הלבלב, המוביל הפרשת אינסולין.
עם הכניסה לתאי הבטא, סטרפטוזוצין מפעיל תגובה חיסונית המובילה לשחרור אוטואנטיגנס. האוטונטיגנים גורמים למערכת החיסונית לזהות תאי בטא כזרים ולהרוס אותם המובילים לרמות מופחתות של אינסולין.
בדוגמה הבאה, ניצור מודל זברה של סוכרת מסוג 1. כדי ליצור זברה עם סוכרת, להכין מיכל התאוששות עם מי דגים רגילים מיכל הרדמה של מי דגים עם 1 עד 1,000 דילול של 2-phenoxyethanol. תחת מכסה המנוע אדים, להכין פתרון 0.3% של סטרפטוזוצין או STZ על ידי הוספת 6 מיליגרם של STZ ל 2 מיליליטר של 0.09% נתרן כלורי ומיד למקם את הפתרון על הקרח.
בצינור נפרד, יש למלא חצי מזרק CC המצויד במחט מד 27 ו-1/2 עם ה-STZ, או בפתרונות בקרה, ולהבטיח שלא יילכדו בועות אוויר.
לאחר הרדמה, בקצרה למקם את הדג על מגבת נייר כדי לספוג כל מים עודפים. לאחר מכן, מניחים את הדג בסירת שקילה ולשקול אותו. הבא, מניחים את הדג על משטח מוצק. ואז להכניס את המחט בעבר את השיפוע לתוך ההיבט האחורי של הצפק הגחוני ולהזריק גם 0.35 מיליגרם לגרם של STZ או נפח שווה ערך של פתרון שליטה לתוך חלל הצפק הצפק של הדג.
לאחר הזרקה, מניחים את הדגים במיכל המים להתאוששות ומנטרים אותו לפעילות שחייה רגילה. לאחר הזרקת מספיק דגים לניסוי, מעבירים אותם למיכלים חיים רגילים ושומרים בטמפרטורה של 22 עד 24 מעלות צלזיוס.
