Name: Microtiter 디시 Biofilm 형성 분석 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-01-30T18:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 57 s
Description: 학습하세요 미세플레이트를 이용한 세균 및 진균의 초기 바이오필름 형성 분석 방법입니다. 크리스탈 바이올렛 염색으로 정량적·정성적 평가가 가능하며, 고속 스크리닝에도 활용할 수 있습니다.

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셰리 Kuchma, 피터 뉴웰과 그림 1의 이미지를 제공 로버트 샨크츠 내 주셔서 감사합니다. 이 작품은 GAO에 NIH 부여 R01AI083256 지원했습니다

1. Biofilm 성장을 <ol><li> 야생 형 녹농균이나 풍부한 매체 박 이상의 돌연변이 스트레인 (즉, LB)의 문화를 성장 </li><li> biofilm의 assays를위한 새로운 매체로 통해 밤 문화를 희석 1:100. P.위한 표준 biofilm 분석 매체 녹농균이라는 박테리아는 황산 마그네슘, 포도당 및 casamino의 지방산 (표 참조) 보충 M63 최소한의 매체입니다. 대안 biofilm - 증진 적은 planktonic의 성장과보다 강력한 biofilm, 포도당 및 casamino의 지방산을 자극 매체는 유일한 탄소 및 에너지원으로 아르기닌으로 대체 될 수 있듯이. </li><li> 96 잘 접시에 잘 희석 당 100 μL를 추가합니다. 정량 assays을 위해, 우리는 일반적으로 각각의 치료를 위해 4-8 복제 우물을 사용합니다. </li><li> 37 4-24 시간에 대한 microtiter 접시를 품어 ° C. </li></ol> 2. Biofilm 스테 이닝 <ol><li> 부화 후 판을 뒤집어하고 액체를 흔들어하여 세포를 덤프. </li><li> 물이 작은 욕조에 부드럽게 잠수함 접시 (즉, 욕조 등 P1000 pipetmen에 대한 피펫 팁 상자의 바닥을 사용하여). 물을 흔들어 봐. 이 과정을 다시 한 번 반복합니다. 이 단계는 다음 단계에서 스테인드 수있는 무소속의 세포와 미디어 구성 요소를 제거하는 데 도움이, 그리고 크게 배경 얼룩을 절감. </li><li> microtiter 접시 각 잘하기 위해 물에 크리스탈 바이올렛의 0.1 % 용액 125 μL를 추가합니다. 솔루션을 제작하는 동안 장갑과 실험 복을 착용하십시오. 가루가 hydroscopic하고 쉽게 얼룩의 의류, 피부 등을 그대로 CV를 무게 경우주의하시기 바랍니다 </li><li> 10-15 분 상온에서 microtiter 접시를 품어. </li><li> 위에서 설명한대로 물을 욕조에 잠수함이 잠수하여 물 접시 3-4 회 씻어 밖으로 흔들 모든 초과 세포와 염료의 번호판을 제거하기 위해 종이 타월의 스택에 적극적으로 얼룩. </li><li> 거꾸로 microtiter 접시를 켜고 몇 시간 또는 하루에 대한 건조. </li><li> 때 건조 질적 assays 들어, 우물이 사진 수 있습니다. </li></ol> 3. Biofilm을 Quantifying <ol><li> 이력서 solubilize하는 microtiter 접시 각 잘 물을 30 % 초산 125 μL를 추가합니다. </li><li> 10-15 분 상온에서 microtiter 접시를 품어. </li><li> 새로운 평면 바닥 microtiter 접시에 solubilized CV 125 μL을 전송합니다. </li><li> 빈으로 물 30 % 아세트산을 사용하여 550 nm의에서 플레이트 판독기에서 흡광도를 계량. </li></ol> 4. 대표 결과 : <img src="/files/ftp_upload/2437/2437fig1.jpg" alt="그림 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. 녹농균, 모나스 fluorescens 및 포도상 구균에 대한 수행 biofilm 형성 assays에 대한 대표적인 결과를 보여줍니다. P.의 녹농균이라는 박테리아 (8 시간, 37 ° C)의 biofilm와 우물 (A) 측면 볼 수 있습니다. P.의 biofilm와 우물 (B) 측면보기 fluorescens (6 시간, 30 ° C). (C) biofilm의 하향식보기 S.에 의해 형성 평면 바닥 microtiter 플레이트의 구균 (투 웰스, 24 시간, 37 ° C). P. 녹농균이라는 박테리아와 P. fluorescens 모두 운동성이있는 유기체이며, 공기 - 액체 인터페이스에서 biofilm을 형성. S. 구균이 아닌 운동성이있는이고 잘 하단에 biofilm을 형성.

<ol><li>O'Toole, G. A., Kolter, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Initiation+of+biofilm+formation+in+Pseudomonas+fluorescens+WCS365+proceeds+via+multiple%2C+convergent+signalling+pathways%3A+a+genetic+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Initiation of biofilm formation in Pseudomonas fluorescens WCS365 proceeds via multiple, convergent signalling pathways: a genetic analysis.</a> Mol. Microbiol. 28, 449-461 (1998).</li>
<li>O'Toole, G. A. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aO%27Toole%2C+GA+%22Methods+in+Enzymology%22">Methods in Enzymology</a>. Doyle, R. J. , Academic Press. San Diego, CA. 91-109 (1999).</li>
<li>Mah, T. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+genetic+basis+for+Pseudomonas+aeruginosa+biofilm+antibiotic+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A genetic basis for Pseudomonas aeruginosa biofilm antibiotic resistance.</a> Nature. 426, 306-310 (2003).</li>
<li>Kuchma, S. L., Connolly, J. P., O'Toole, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+three-component+regulatory+system+regulates+biofilm+maturation+and+type+III+secretion+in+Pseudomonas+aeruginosa%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">A three-component regulatory system regulates biofilm maturation and type III secretion in Pseudomonas aeruginosa.</a> J Bacteriol. 187, 1441-1454 (2005).</li>
<li>Caiazza, N. C., O'Toole, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SadB+is+required+for+the+transition+from+reversible+to+irreversible+attachment+during+biofilm+formation+by+Pseudomonas+aeruginosa+PA14%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">SadB is required for the transition from reversible to irreversible attachment during biofilm formation by Pseudomonas aeruginosa PA14.</a> J Bacteriol. 186, 4476-4485 (2004).</li>
<li>Shanks, R. M., Sargent, J. L., Martinez, R. M., Graber, M. L., O'Toole, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catheter+lock+solutions+influence+staphylococcal+biofilm+formation+on+abiotic+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrol+Dial+Transplant%22%5BJournal%5D)">Catheter lock solutions influence staphylococcal biofilm formation on abiotic surfaces.</a> Nephrol Dial Transplant. 21, 2247-2255 (2006).</li>
<li>Caiazza, N. C., Merritt, J. H., Brothers, K. M., O'Toole, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inverse+regulation+of+biofilm+formation+and+swarming+motility+by+Pseudomonas+aeruginosa+PA14%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Inverse regulation of biofilm formation and swarming motility by Pseudomonas aeruginosa PA14.</a> J. Bacteriol. 189, 3603-3612 (2007).</li>
<li>Hinsa, S. M., Espinosa-Urgel, M., Ramos, J. L., O'Toole, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transition+from+reversible+to+irreversible+attachment+during+biofilm+formation+by+Pseudomonas+fluorescens+WCS365+requires+an+ABC+transporter+and+a+large+secreted+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Transition from reversible to irreversible attachment during biofilm formation by Pseudomonas fluorescens WCS365 requires an ABC transporter and a large secreted protein.</a> Mol Microbiol. 49, 905-918 (2003).</li>
<li>Mack, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+transposon+mutants+of+biofilm-producing+Staphylococcus+epidermidis+impaired+in+the+accumulative+phase+of+biofilm+production%3A+genetic+identification+of+a+hexosamine-containing+polysaccharide+intracellular+adhesin%5BTitle%5D)+AND+%22Infect.+Immun%22%5BJournal%5D)">Characterization of transposon mutants of biofilm-producing Staphylococcus epidermidis impaired in the accumulative phase of biofilm production: genetic identification of a hexosamine-containing polysaccharide intracellular adhesin.</a> Infect. Immun. 62, 3244-3253 (1994).</li>
<li>Vidal, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+an+Escherichia+coli+K-12+mutant+strain+able+to+form+biofilms+on+inert+surfaces%3A+involvement+of+a+new+ompR+allele+that+increases+curli+expression%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Bacteriol%22%5BJournal%5D)">Isolation of an Escherichia coli K-12 mutant strain able to form biofilms on inert surfaces: involvement of a new ompR allele that increases curli expression.</a> J. Bacteriol. 180, 2442-2449 (1998).</li>
<li>Junker, L. M., Clardy, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+screens+for+small-molecule+inhibitors+of+Pseudomonas+aeruginosa+biofilm+development%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrob+Agents+Chemother%22%5BJournal%5D)">High-throughput screens for small-molecule inhibitors of Pseudomonas aeruginosa biofilm development.</a> Antimicrob Agents Chemother. 51, 3582-3590 (2007).</li>
</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

이 방법은 미생물 종의 다양한 사용하기 위해 수정할 수 있습니다. 비 운동성이있는 미생물은 일반적으로 우물의 바닥을 준수하면서 운동성이있는 미생물은 일반적으로, 벽 및 / 또는 우물의 바닥을 준수. biofilm 형성 (즉, 성장 매체, 온도, 부화의 시간)에 대한 최적 조건은 각각의 미생물에 대해 경험적으로 결정되어야합니다. 나는 각각의 접시에 부정적인 컨트롤을 여러 개 수행하는 각각의 변형이나 조건 (4-8)의 복제, 그리고 긍정적인 컨트롤을 포함시키는 것이 좋습니다, 그리고 가능하다면.

<table><tbody><tr><td>1 X M63</td><td></td><td></td><td>15g의 KH2PO4를 녹여 5X M63 스톡 용액으로 준비하십시오.&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;PO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;, 35g K&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;하이퍼파라미터 최적화(HPO)&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt; 및 10g (NH&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;)&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;SO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt; 물 1L에 녹입니다. 이 스톡 용액은&amp;#8211;고압증기멸균할 필요가 없으며 실온에서 보관할 수 있습니다. 5X 스톡 용액을 1:5로 희석하여 고압증기멸균하고 냉각한 후, 필요한 성분들을 첨가하십시오.</td></tr><tr><td>KH&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;PO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;</td><td>Fisher Scientific</td><td>P285-500</td><td></td></tr><tr><td>K&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;하이퍼파라미터 최적화&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;</td><td>Fisher Scientific</td><td>P288-500</td><td></td></tr><tr><td>(NH&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;)&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;SO&lt;sub&gt;4&lt;/sub&gt;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A5132</td><td></td></tr><tr><td>황산마그네슘</td><td>Fisher Scientific</td><td>M63-500</td><td>최종 농도가 1 mM이 되도록 첨가하십시오. 증류수에 1 M 스톡 용액으로 조제하여 오토클레이브 멸균하십시오.</td></tr><tr><td>포도당</td><td>Fisher Scientific</td><td>D16-3</td><td>최종 농도가 0.2%가 되도록 첨가하십시오. 증류수에 20% 농도의 스톡 용액으로 조제하여 오토클레이브 멸균하십시오.</td></tr><tr><td>카자미노산</td><td>BD Biosciences</td><td>223050</td><td>최종 농도가 0.5%가 되도록 첨가하십시오. 증류수에 20% 스톡 용액으로 조제하여 오토클레이브 멸균하십시오.</td></tr><tr><td>아르기닌</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A5131</td><td>최종 농도가 0.4%가 되도록 첨가하십시오. 증류수에 20% 스톡 용액으로 조제한 후 여과 멸균하십시오. 이 대체 탄소/에너지원은 포도당과 카사미노산을 대체하여 사용할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>마이크로타이터 플레이트</td><td>BD Biosciences</td><td>353911</td><td>Falcon 3911, Microtest III, 유연한 분석 플레이트, 96 웰, U자형 바닥, 비멸균, 비조직배양 처리.</td></tr><tr><td>마이크로타이터 플레이트 덮개</td><td>BD Biosciences</td><td>353913</td><td>뚜껑은 95% 에탄올 수용액으로 세척하여 재사용할 수 있습니다.</td></tr><tr><td>크리스탈 바이올렛</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>229641000</td><td>증류수에 0.1% 용액으로 준비하십시오.</td></tr></tbody></table>

microtiter 디시 biofilm 형성 분석

Microtiter Dish Biofilm Formation Assay

Biofilms, 의료 산업 및 자연 환경 설정에서 찾을 수 표면에 부착된 미생물의 커뮤니티입니다. 사실, biofilm의 생활은 대부분의 환경에서 미생물의 성장의 predominate 모드를 나타냅니다. 성숙 biofilms 몇 가지 뚜렷한 특징이있다. Biofilm의 미생물은 일반적으로 구조와 지역 사회에 보호 기능을 제공합니다 세포외 기질에 둘러싸여 있습니다. biofilm의 성장 미생물은 일반적으로 유체 - 채워진 채널 둘러싸인 macrocolonies (수천개의 세포를 포함)로 구성된 특성 아키텍처를했습니다. Biofilm - 재배 미생물은 또한 임상 관련 항생제를 포함하여 항균 대리인의 범위에 그들의 저항에 대한 악명 있습니다. microtiter 접시 분석은 biofilm 형성의 초기 단계의 연구를위한 중요한 도구이며,이 분석은 또한 곰팡이 biofilm 형성을 연구하는 데 사용되었지만, 세균성 biofilms 연구 주로 적용되었습니다. 이 분석은 정적, 배치 성장 조건을 사용하기 때문에, 그것은 일반적으로 흐름 전지 시스템과 관련된 성숙한 biofilms의 형성에 대한 허용하지 않습니다. 그러나, 분석이 잘 세포외 다당류의 생산에 관련된 유전자와 같은 biofilm 형성의 개시 (즉, flagella, 필리, adhesins, 주기적 - DI - GMP 바인딩과 대사에 관여하는 효소)에 필요한 여러 가지 요인을 식별에 효과가있다. 또한 게시된 작품은 microtiter 요리 재배 biofilms은 면역 시스템 effectors 이러한 항생제 내성 및 저항을 성숙 biofilms의 일부 속성을 개발 할 것을 나타냅니다. 이 간단한 microtiter 접시 분석은 벽 및 / 또는 microtiter 접시의 바닥에 biofilm의 형성 수 있습니다. 분석의 높은 처리량 자연은 유전자 화면에 유용합니다뿐만 아니라, 다양한 성장 조건 하에서 여러 변종에 의해 시험 biofilm 형성합니다. 이 분석의 변종은 미생물을 포함한 다양한위한 초기 biofilm 형성을 평가하는 데 사용되지만 pseudomonads, 비브리오 cholerae, 대장균, staphylocci, enterococci, mycobacteria 및 곰팡이, 이에 국한되지 않음되었습니다. 프로토콜 여기에서 설명한에서, 우리는 모델 유기체 녹농균의 biofilm 형성을 연구하기 위해이 분석의 사용에 초점을 맞출 것이다. 이 분석에서, biofilm 형성의 범위는 염료 크리스탈 바이올렛 (CV)를 사용하여 측정됩니다. 그러나, 다른 colorimetric 및 신진 대사 얼룩의 번호는 microtiter 접시 분석을 사용하여 biofilm 형성의 부량에 대한보고되었습니다. microtiter 접시 분석의 용이성, 저렴한 가격과 유연성은 biofilms 연구를위한 중요한 도구가되었다.

분석은 박테리아와 곰팡이의 초기 biofilm 형성을 측정하는 빠른 방법을 설명합니다. 이 방법은 미생물의 biofilm 형성에 대한 하층으로 microtiter 접시를 사용하고, biofilm은 크리스탈 바이올렛 스트레인을 사용하여 시각입니다. 분석도 초기 biofilm 형성에 대한 질적 양적 분석 또는를 제공합니다.

Microtiter 디시 Biofilm 형성 분석

바이오필름은 표면에 부착된 미생물 군집으로, 의료, 산업 및 자연 환경에서 발견될 수 있습니다. 실제로, 바이오필름 내의 삶은...

본 절차의 전반적인 목표는 마이크로타이터 플레이트 내에서 바이오필름을 형성하고 연구하는 것입니다. 이는 먼저 96웰 플레이트에 세균 배양액을 첨가함으로써 수행됩니다. 다음으로, 바이오필름을 염색하기 위해 미생물에 따라 적절한 온도와 시간 동안 배양액을 배양합니다.각 박테리아 웰에 크리스탈 바이올렛을 첨가한 후, 박테리아를 세척합니다. 마지막으로, 웰을 촬영하고 박테리아의 양을 정량화합니다. 최종적으로 크리스탈 바이올렛 측정을 통해 시간에 따른 바이오필름의 축적과 형성을 보여주는 결과를 얻을 수 있습니다.이 방법의 주요 장점은 연구자가 세균 및 진균 생물체에서 바이오필름 형성을 빠르게 평가할 수 있다는 점입니다. 또한 고처리량 유전자 스크리닝이나 바이오필름 형성을 억제하는 새로운 치료 화합물을 식별하도록 구성할 수도 있습니다. 야생형 pseudomonas, aerogen 또는 돌연변이 균주의 5 mL 하룻밤 배양액을 준비하십시오.LB 배지에서, 10 µL의 배양액을 마그네슘, 황산염, 포도당 및 카시노 산(cassino acids)이 첨가된 신선한 M 63 최소 배지 1 mL에 희석합니다. 다음으로, 피펫을 사용하여 희석된 배양액 100 µL를 96-웰 라운드 바텀 플레이트의 각각의 웰에 옮깁니다. 플레이트를 37 °C에서 4~24시간 동안 배양하여 바이오필름이 성장하도록 합니다.바이오필름이 형성되면 플레이트를 인큐베이터에서 꺼내고, 플레이트를 뒤집어 액체를 털어냄으로써 배양 상층액을 제거합니다. 그런 다음, 배경 염색을 유발할 수 있는 잔류 미결합 세포나 배지 성분을 씻어내기 위해 플레이트를 작은 수조에 조심스럽게 담급니다. 물기를 털어내고 플레이트를 닦아낸 후, 세척 과정을 반복합니다.플레이트가 깨끗해지면, 웰당 125 µL의 0.1% crystal violet 용액을 첨가합니다. 세포를 염색하기 위해 플레이트를 상온에서 10분에서 15분 동안 배양합니다.그 다음, 앞서 시연한 대로 플레이트를 3~4회 세척합니다. 마지막 세척 후, 페이퍼 타월 뭉치 위에서 플레이트를 강하게 눌러 여분의 액체를 제거한 다음, 플레이트를 뒤집어 놓은 상태로 몇 시간 동안 건조시킵니다. 플레이트가 건조되면, 디지털 카메라로 웰을 촬영하여 바이오필름의 품질을 평가할 수 있습니다.여기서 보는 바와 같이, 왼쪽의 pseudomonas aerogen 및 오른쪽의 pseudomonas fluorescence와 같은 운동성 박테리아는 바이오필름 성장 과정 중 공기-액체 계면에 바이오필름을 형성하는 경향이 있습니다. 이와 대조적으로, 비운동성 박테리아인 staphylococcus ora는 웰 바닥에 바이오필름을 형성합니다. 바이오필름을 정량화하려면, 먼저 아세트산만 포함된 공시료(blank) 웰을 포함하여 각 웰에 30% acetic acid 125 µL를 첨가하고, 바이오필름에 유지된 crystal violet이 용해될 수 있도록 플레이트를 실온에서 10~15분 동안 배양하십시오.다음으로, 각 웰에서 125 µL의 가용화된 염색액을 새로운 평평한 바닥의 96-웰 마이크로타이터 플레이트로 옮깁니다. 플레이트 리더를 사용하여 550 nm의 파장에서 각 웰의 흡광도를 측정합니다. 각 웰의 크리스탈 바이올렛 농도는 바이오필름 내의 세포 수에 비례합니다.이 그래프는 37°C에서 배양하는 동안 시간이 경과함에 따라 pseudomonas fluorescence에 의해 형성 및 축적된 바이오필름의 정량적 수치를 보여줍니다. 이 영상을 시청하고 나면, 현미경 관찰과 같은 다른 방법과 병행하여 사용되는 96-well 플레이트 바이오필름 분석법을 수행하는 방법에 대해 충분히 이해하게 될 것입니다. 이는 바이오필름 형성에 대한 우리의 이해를 높이는 데 크게 기여할 수 있습니다.

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연구

JoVE Journal

Immunology and Infection

면역학 및 감염학

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모니터링 형성과 Antifungal 자화율 테스트를위한 96 자 Microtiter 플레이트 기반 방법 캔디다 albicans Biofilms

이 비디오는 페그 플레이트를 사용하여 생물막을 효율적으로 제거하는 항균 화합물을 스크리닝하는 분석을 보여줍니다. 이 방법론은 항균 화합물로 처리한 후 생물막의 대사 상태를 모니터링하여 최소 생물막 박멸 농도를 쉽게 측정할 수 있습니다.

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이 비디오는 생물막 형성을 평가하기 위한 고체상 부착 분석을 보여줍니다. 멀티웰 플레이트에서 담즙염이 보충된 매체의 박테리아는 고체 표면에 부착되어 생물막을 형성하며, 이는 결정 바이올렛 염색 및 에탄올 처리를 통한 비색법으로 확인됩니다.

생물막 형성을 평가하기 위한 고체상 부착 분석

이 비디오는 다중 웰 플레이트를 사용한 생물막 분산 분석을 보여줍니다. 완충액과 포도당 처리는 생물막을 분해하여 박테리아를 방출하는 반면, 담즙염은 스트레스를 유발하여 박테리아를 보호하는 세포외 고분자 물질에 유지합니다. 완충액과 포도당을 사용한 더 높은 분산은 성공적인 생물막 분해를 확인하며, 이는 집락 형성 단위 측정으로 추정됩니다.

Dispersion Assay를 통한 Biofilm 분해 검출

대부분의 박테리아 감염은 생물막을 생성합니다. 환경 덕분에, 생물막 관련 박테리아는 종종 표현형 약물 내성을 가지고 있습니다. 따라서 생물막에서 박테리아를 죽이는 새로운 항균 분자는 최우선 순위입니다. 당사는 생물막을 박멸하는 데 효과적인 항균 화합물을 신속하게 스크리닝하기 위한 분석을 수립합니다.

바이오 필름 관련 타겟팅<em&gt; 황색 포도상 구균</em&gt; 사용 레사 주린 기반 약물 감수성 분석

본 연구는 생물막 억제제와 Bacillus subtilis 다세포성에 미치는 영향을 연구하기 위한 재현 가능한 방법론의 개발을 제시합니다.

유학을위한 방법론<em&gt; B. 서브 틸리</em작은 분자 바이오 필름 억제제를 특성화 모델로&gt; 바이오 필름

생물막 감염은 화학요법에 대한 내성이 높습니다. 단일 분석법으로 생물막의 복잡성을 파악할 수 없습니다. 대신, 보완적인 분석이 필요합니다. 우리는 생존력, 바이오매스 및 생물막 매트릭스에 대한 분석을 결합한 스크리닝 플랫폼(S. aureus를 위해 개발됨)을 제시합니다. 이를 통해 장기적인 화학 요법 효과 평가를 포함한 항생물막 약물 발견을 할 수 있습니다.

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담 즙 소금 유도 Biofilm 형성 장 병원 체에서: 식별 및 정량화 기술

이 프로토콜은 고처리량 96웰 고정 뚜껑 정적 생물막 스크리닝을 위해 자체 조립된 딥 웰 PCR 플레이트 장치를 사용하여 생물막 성장 및 바이오매스 측정을 수행하는 방법론을 제시합니다.

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C. tropicalis에 의해 형성된 생물막에 대한 항체의 효과를 연구하기 위해 2,3-비스(2-메톡시-4-니트로-5-설포페닐)-5-카르복사닐리드-2H-테트라졸륨(XTT) 환원 분석을 사용하는 96웰 마이크로타이터 플레이트 기반 프로토콜이 본원에 설명되어 있습니다. 이 시험관 내 프로토콜은 생물막에서 칸디다 종 세포의 대사 활성에 대한 잠재적 인 새로운 항진균 화합물의 효과를 확인하는 데 사용할 수 있습니다.

칸디다 트로피칼리스 생물막에 대한 항체의 효과를 평가하기 위한 가용성 테트라졸륨 기반 환원 분석

학습하세요 미세플레이트를 이용한 세균 및 진균의 초기 바이오필름 형성 분석 방법입니다. 크리스탈 바이올렛 염색으로 정량적·정성적 평가가 가능하며, 고속 스크리닝에도 활용할 수 있습니다.

Microtiter 디시 Biofilm 형성 분석

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