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후안와 정맥 주입의 신생아 설치류 모델
후안와 정맥 주입의 신생아 설치류 모델
JoVE Journal
Neuroscience
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This content is Free Access.
JoVE Journal Neuroscience
A Neonatal Rodent Model of Retroorbital Vein Injection

후안와 정맥 주입의 신생아 설치류 모델

Full Text
9,848 Views
04:39 min
February 23, 2024

DOI: 10.3791/65386-v

Eridan Rocha-Ferreira1, Syam Nair1, Owen Herrock1, Erik Axel Andersson2, Carl Joakim Ek2, Carina Mallard2, Henrik Hagberg1

1Centre of Perinatal Medicine and Health, Institute of Clinical Sciences, Department of Obstetrics and Gynecology, Sahlgrenska Academy,University of Gothenburg, 2Centre of Perinatal Medicine and Health, Institute of Neuroscience and Physiology, Sahlgrenska Academy,University of Gothenburg

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol highlights a reproducible retro-orbital injection method for intravenous drug administration in neonatal rats and mice. The technique facilitates compound delivery into the venous circulation, which is particularly crucial for preclinical studies mimicking neonatal care unit conditions.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Pharmacology
  • Animal models

Background

  • Intravenous administration is commonly used in neonatal intensive care units.
  • Injections via the tail vein are difficult in neonates, making alternative routes necessary.
  • The retro-orbital route is simpler and can be used effectively for compound administration.
  • This method allows for real-time monitoring of injection success through visible dye tracking.

Purpose of Study

  • To optimize intravenous drug administration techniques in neonatal rodents.
  • To provide a reliable method for compound delivery that can be used in various preclinical settings.
  • To enhance reproducibility and outcomes in rodent studies related to neonatal care.

Methods Used

  • The retro-orbital injection method is demonstrated using trypan blue dye.
  • Subjects include neonatal rats and mice under anesthesia during the procedure.
  • New sterile syringes are utilized for each animal to prevent contamination.
  • Injection occurs at the medial canthus of the eye at a 40-degree angle.
  • Recovery protocols ensure the well-being of the animals post-injection.

Main Results

  • The protocol enables successful visualization of compounds in the venous system.
  • Effective tracer administration allows for assessment of vascular responses after injury.
  • These results highlight the potential for quantifying vascular leakage and injury assessment.
  • The method does not cause adverse effects when performed properly.

Conclusions

  • This study establishes the retro-orbital injection as a reliable method for drug administration in neonatal rodents.
  • The technique presents significant clinical relevance in translational research.
  • Enhanced understanding of venous drug delivery mechanisms supports future studies in neonatal pharmacology.

Frequently Asked Questions

What are the advantages of using the retro-orbital injection method?
The retro-orbital injection method simplifies intravenous administration in neonatal rodents, providing a more accessible alternative to tail vein injections, which can be challenging.
How is the retro-orbital injection performed?
The injection is performed with the animal under anesthesia, using a 29 to 31 gauge needle positioned at the medial canthus of the eye, angled appropriately to access the venous plexus.
What types of data can this method help obtain?
The method allows for real-time monitoring of compounds in the blood circulation, enabling assessments of tracer distributions and vascular responses.
Can this method be adapted for other substances?
Yes, this injection technique can be used for various compounds, including antibodies, cells, and other therapeutic agents directly into the venous circulation.
Are there any limitations to this injection method?
Care must be taken to ensure proper needle placement to avoid complications, and the procedure should only be performed by trained individuals for optimal animal welfare.
How does this study contribute to neonatal pharmacology?
The study presents a reliable method for intravenous drug administration that can improve translational research on drug effects in neonatal care settings.

이 프로토콜은 신생아 기간 동안 쥐와 생쥐에서 사용할 수 있는 재현 가능한 정맥 투여 경로를 입증하는 것을 목표로 합니다. 이 절차는 주로 정맥 투여를 사용하는 신생아 치료실에서 약물 투여를 미러링하고자 하는 전임상 설치류 연구에 중요합니다.

역궤도 주사는 정맥 순환에 화합물을 투여하는 데 사용되는 특수 주사 방법입니다. 동물 연구는 임상 작업을 위한 중요한 단계입니다. 동물 연구의 일환으로 다양한 경로를 통해 다양한 유형의 화합물을 투여해야 합니다.

이러한 경로 중 일부에는 피하, 복강 내 및 정맥 주사가 포함됩니다. 정맥 주사는 신생아 중환자실에 있는 신생아에게 가장 일반적으로 사용되는 경로입니다. 그러나 설치류 연구, 특히 성인 설치류에서는 꼬리 정맥에 IV 주사가 일상적으로 수행됩니다.

신생아의 경우, 꼬리 정맥 주사를 성공적이고 재현 가능하게 수행하는 것은 매우 어렵습니다. 따라서 역궤도 경로를 더 쉬운 대안으로 사용할 수 있습니다. 먼저 염료인 트리판 블루를 사용하여 시청자가 염료가 정맥 순환에 들어가는 것을 명확하게 볼 수 있도록 시연합니다.

신생아 쥐는 머리를 옆으로 눕히고 광원 위에 올려 놓고 완전히 마취하여 눈과 측면 혈관이 노출되고 볼 수 있습니다. 바늘은 내측 안각에 해당하는 안와(地間)의 앞쪽에 삽입됩니다. 부드럽고 매끄럽고 유동적인 동작으로 용액을 주입합니다.

이 절차를 더 잘 재현하려면 안와 정맥 해부학을 이해하는 것이 중요합니다. 쥐의 경우 눈 바로 아래에 여러 정맥 네트워크가 있어 정맥신경총에 쉽고 직접적으로 접근할 수 있습니다. 신생아 알비노 쥐의 경우 표재성 측두정맥과 안면 정맥 모두에서도 볼 수 있습니다.

이 절차는 정확히 동일한 방식으로 수행할 수 있습니다. 신생아 마우스에서. 약 0.30mm의 29-31 게이지가 있는 바늘을 사용하십시오.

정확한 부피를 위해 피펫 부피에서 주입할 용액을 작성하십시오. 동물을 옆으로 누운 평평한 표면에 놓습니다. 전신 Isoflurane 마취를 유도합니다.

5%induction, 3%maintenance. 당김 철수 반사 방법을 사용하여 마취 깊이를 확인합니다. 머리가 오른쪽을 향하도록 하여 오른쪽 후안와 부비동에 주사를 놓습니다.

바늘 경사를 눈구멍 앞쪽(중간 안각에 해당)에 약 40도 각도로 삽입합니다. 이 각도를 통해 바늘이 안와 뒤쪽으로 향할 수 있습니다. 부드럽고 매끄럽고 유려한 동작으로 주입합니다.

역류를 피하기 위해 바늘을 천천히 빼기 전에 잠시 기다리십시오. 오염을 방지하기 위해 각 동물에 대해 새로운 멸균 주사기를 사용하십시오. 강아지를 회수 상자에 넣고 섭씨 35도에서 37도 정도의 보호된 보온 장치 위에 올려 놓습니다.

회복될 때까지 기다렸다가 강아지를 댐으로 돌려보내기 전에 고통의 징후가 있는지 확인하십시오. 이 기술은 생식 기질 출혈을 겪은 동물의 뇌 혈관에 추적자 비오틴-덱스트란을 투여하는 데 사용되었습니다. 대조군으로 식염수 주사를 맞은 동물은 뇌 내 혈관 조직의 눈에 띄는 염색을 보이지 않습니다.

비오틴-덱스트란 추적자의 성공적인 역궤도 주입을 통해 역궤도 투여 후 10분 이내에 뇌 혈관 조직에서의 존재를 평가할 수 있었습니다. 이 기술은 GMH 부상 동물의 개별 혈관 수준에서 추적자의 혈관 누출을 감지하는 데 사용되었습니다. 이 결과는 예를 들어 GMH 뇌 손상 후 누출되는 혈관의 양을 정량화하여 손상을 정량화할 수 있습니다.

또한, 이 절차는 광원 없이 수행할 수도 있어 신생아 쥐 및 마우스의 정맥 순환에 직접 화합물 투여를 허용하는 간단하고 간단하며 재현 가능한 기술입니다. 이 절차를 올바르게 수행하면 부작용이 발생하지 않아야 합니다. 이 투여 뿌리는 항체, 세포 및 기타 화합물을 신생아 동물의 정맥 순환에 직접 주입할 수 있습니다.

이 경로는 복강 내 또는 피하 주사와 같은 다른 경로와 비교할 때 임상적 관련성이 더 큽니다.

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Neuroscience Issue 204 쥐 생쥐 신생아 후안와 정맥 주사 복합 투여 정맥 주사

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