Name: Prosty złożony system oceny fenotypu do oceny mysich modeli ataksji móżdżkowej (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-05-21T17:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 33 s
Description: Poznaj złożony system oceny fenotypu do badania ciężkości ataksji móżdżkowej u myszy. Metoda obejmuje testy koordynacji, chwytania kończyn, chodu i kifozy, umożliwiając śledzenie progresji choroby.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Praca ta była finansowana z grantów NIH NS052535 dla G.A.G oraz EY014061 i EY014997 dla A.R.L., a także z funduszy konsorcjum UL1DE019583-02.

Aby zapobiec błędom poznawczym, osoba przeprowadzająca oceny nie powinna znać genotypu zwierzęcia. Pojedyncze pomiary ocenia się w skali od 0 do 3, gdzie 0 oznacza brak odpowiedniego fenotypu, a 3 najsilniejszy przejaw. Każdy test wykonuje się wielokrotnie, aby upewnić się, że wynik jest powtarzalny. Otyłość utrudni interpretację wszystkich opisanych pomiarów. Badacz może chcieć zważyć myszy po ocenie fenotypu, aby ocenić możliwy wpływ tkanki tłuszczowej na wyniki.
Test krawędziowy
Test krawędziowy jest bezpośrednią miarą koordynacji, która jest upośledzona w ataksjach móżdżkowych i wielu innych schorzeniach neurodegeneracyjnych. Pomiar ten jest najbardziej bezpośrednio porównywalny z ludzkimi objawami ataksji móżdżkowej.
<ol>
	<li>Podnieś mysz z klatki i umieść ją na jej krawędzi. Myszy zazwyczaj idą wzdłuż krawędzi i próbują zejść z powrotem do klatki.</li>
	<li>Obserwuj mysz podczas chodzenia wzdłuż krawędzi klatki i schodzenia do jej wnętrza. Mysz typu dzikiego zazwyczaj idzie wzdłuż krawędzi bez utraty równowagi i zgrabnie schodzi do klatki, używając łap. Takie zachowanie ocenia się na 0 punktów. Jeśli mysz traci przyczepność podczas chodzenia po krawędzi, ale poza tym wydaje się skoordynowana, otrzymuje 1 punkt. Jeśli nie korzysta efektywnie z tylnych kończyn lub podczas schodzenia do klatki ląduje na głowie zamiast na łapach, otrzymuje 2 punkty. Jeśli mysz spada z krawędzi lub prawie spada podczas chodzenia bądź próby zejścia, lub trzęsie się i całkowicie odmawia ruchu mimo zachęty, otrzymuje 3 punkty. Niektóre myszy mogą wymagać delikatnego popchnięcia, aby zachęcić je do przejścia wzdłuż krawędzi lub zejścia do klatki.</li>
	<li>Zapisz wynik testu krawędziowego.</li>
</ol>
Kurcz tylnych kończyn
Przykurcz kończyn tylnych jest markerem progresji choroby w wielu modelach mysich neurodegeneracji, w tym w przypadku niektórych ataksji móżdżkowych [1].
<ol>
	<li>Chwyć mysz za ogon u nasady i unieś ją nad wszystkie otaczające przedmioty.</li>
	<li>Obserwuj ułożenie kończyn tylnych przez 10 sekund. Jeśli kończyny tylne są stale rozstawione na zewnątrz, z dala od brzucha, przypisuje się wynik 0. Jeśli jedna kończyna tylna jest przyciągnięta do brzucha przez ponad 50% czasu zawieszenia, przypisuje się wynik 1. Jeśli obie kończyny tylne są częściowo przyciągnięte do brzucha przez ponad 50% czasu zawieszenia, przypisuje się wynik 2. Jeśli kończyny tylne są całkowicie przyciągnięte i dotykają brzucha przez ponad 50% czasu zawieszenia, przypisuje się wynik 3.</li>
	<li>Umieść mysz z powrotem w klatce i zapisz uzyskany wynik przyciągania kończyn tylnych.</li>
</ol>
Chód
Chód jest miarą koordynacji i funkcji mięśniowej.
<ol>
	<li>Wyjmij mysz z klatki i umieść ją na płaskiej powierzchni tak, aby głowa była skierowana w stronę przeciwną do badacza.</li>
	<li> Obserwuj mysz od tyłu podczas chodzenia. Jeśli mysz porusza się normalnie, ciężar ciała jest rozłożony na wszystkie kończyny, brzuch nie dotyka podłoża, a obie kończyny tylne pracują równomiernie, otrzymuje wynik 0. Jeśli występuje drżenie lub mysz utyka podczas chodzenia, otrzymuje wynik 1. Jeśli występuje silne drżenie, silne utykanie, obniżenie miednicy lub stopy są skierowane na zewnątrz podczas poruszania się („stopy kacze”), otrzymuje wynik 2. Jeśli mysz ma trudności z poruszaniem się do przodu i przeciąga brzuch po ziemi, otrzymuje wynik 3.</li>
	<li>Umieść mysz z powrotem w klatce i zapisz ocenę chodu.</li>
</ol>
Kifoza
Kifoza to charakterystyczne wygięcie grzbietowe kręgosłupa, które jest częstą manifestacją chorób neurodegeneracyjnych w modelach mysich [2]. Jest ona spowodowana utratą napięcia mięśni grzbietu wtórnie do neurodegeneracji.
<ol>
	<li>Wyjmij mysz z klatki i umieść ją na płaskiej powierzchni. </li>
	<li> Obserwuj mysz podczas chodzenia. Jeśli mysz jest w stanie łatwo wyprostować kręgosłup podczas chodzenia i nie wykazuje utrwalonej kifozy, otrzymuje ocenę 0. Jeśli mysz wykazuje łagodną kifozę, ale jest w stanie wyprostować kręgosłup, otrzymuje ocenę 1. Jeśli nie jest w stanie całkowicie wyprostować kręgosłupa i utrzymuje utrwaloną, lecz łagodną kifozę, otrzymuje ocenę 2. Jeśli mysz utrzymuje wyraźną kifozę podczas chodzenia lub siedzenia, przypisuje się jej ocenę 3.</li>
	<li> Umieść mysz z powrotem w klatce i zapisz ocenę kifozy.</li>
</ol>
Reprezentatywne wyniki
Przy zastosowaniu odpowiedniej liczby zwierząt procedura ta pozwala na wykrycie różnic fenotypowych pomiędzy szczepami oraz w obrębie tego samego szczepu w czasie. W celu analizy danych należy obliczyć wynik dla każdego pomiaru, wyciągając średnią z trzech pomiarów u każdego osobnika. Pomiary mogą być analizowane oddzielnie lub połączone w złożony wynik fenotypowy dla każdego osobnika.
Przedstaw dane na wykresach i zastosuj odpowiednie metody statystyczne w celu określenia istotności. Rysunek 1 przedstawia wyniki złożonej oceny fenotypowej mysiego modelu transgenicznego SCA7. W tym modelu transgenicznym floxed-SCA7-92Q ludzki gen ataksyny-7 z 92 powtórzeniami CAG jest flankowany sekwencjami loxP i eksprymowany z bakteryjnego chromosomu sztucznego. Złożony wynik fenotypowy obejmuje oceny przywierania kończyn (clasping), chodzenia po krawędzi, chodu oraz kifozy, przy maksymalnej możliwej liczbie punktów wynoszącej 12. Postępujący fenotyp SCA7 u transgenicznych myszy floxed-SCA7-92Q objawia się wzrostem złożonego wyniku fenotypowego, co jest zgodne z postępującym charakterem tej choroby u ludzi.
<img src="/files/ftp_upload/1787/1787fig1.jpg" alt="Wykres liniowy wyników funkcji motorycznych w stosunku do wieku dla myszy NonTransgenic i Floxed-SCA7-92Q." data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="Rycina 1"> Rycina 1. Myszy Floxed-SCA7-92Q wykazują progresywny fenotyp SCA7, który różni się znacząco od rodzeństwa Non-Transgenic począwszy od 20. tygodnia (ANOVA 2-drogowa: test post-hoc Bonferroniego; ***P&lt;0.001). Myszy oceniano w skali 0-3 dla każdego z testów: testu krawędzi, przywierania (clasping), chodu oraz kifozy. Obliczono średni wynik złożony dla każdego genotypu w każdym wieku. Słupki reprezentują SEM.

<ol><li>Chou, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polyglutamine-expanded+ataxin-3+causes+cerebellar+dysfunction+of+SCA3+transgenic+mice+by+inducing+transcriptional+dysregulation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">Polyglutamine-expanded ataxin-3 causes cerebellar dysfunction of SCA3 transgenic mice by inducing transcriptional dysregulation.</a> Neurobiol Dis. 31 (1), 89-101 (2008).</li>
<li>Thomas, P. S. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+endogenous+androgen+receptor+protein+accelerates+motor+neuron+degeneration+and+accentuates+androgen+insensitivity+in+a+mouse+model+of+X-linked+spinal+and+bulbar+muscular+atrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">Loss of endogenous androgen receptor protein accelerates motor neuron degeneration and accentuates androgen insensitivity in a mouse model of X-linked spinal and bulbar muscular atrophy.</a> Hum Mol Genet. 15 (14), 2225-2238 (2006).</li>
<li>Ditzler, S., Stoeck, J., LeBlanc, M., Kooperberg, C., Hansen, S., Coppin, L., Olson, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Rapid+Neurobehavioral+Assessment+Reveals+that+FK506+Delays+Symptom+Onset+in+R6%2F2+Huntington%27s+Disease+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Preclinica+Research+Articles%22%5BJournal%5D)">A Rapid Neurobehavioral Assessment Reveals that FK506 Delays Symptom Onset in R6/2 Huntington's Disease Mice.</a> Preclinica Research Articles. 1 (3), 115-126 (2003).</li>
</ol>

Badania te zostały zatwierdzone przez Komisję ds. Opieki i Wykorzystania Zwierząt (Institutional Animal Care and Use Committee) Uniwersytetu Waszyngtońskiego.

Niniejszy protokół został opracowany jako czuła i łatwa do przeprowadzenia metoda oceny stopnia nasilenia choroby w mysich modelach ataksji móżdżkowej. Poszczególne elementy systemu punktacji będą w różnym stopniu skuteczne w zależności od zastosowanego mysiego modelu neurodegeneracji.
Elementy tego systemu oceniania zostały skutecznie wykorzystane do oceny różnych modeli mysich ludzkich chorób neurodegeneracyjnych, w tym ataksji móżdżkowych, choroby Huntingtona oraz rdzeniowo-opłtkowej atrof...

prosty system punktacji złożonego fenotypu do oceny modeli mysich ataksji móżdżkowej

A Simple Composite Phenotype Scoring System for Evaluating Mouse Models of Cerebellar Ataxia

Opisujemy protokół do szybkiej i czułej kwantyfikacji stopnia zaawansowania choroby w mysich modelach ataksji móżdżkowej. Został on opracowany na podstawie wcześniej opublikowanych ocen fenotypowych w kilku modelach chorobowych, w tym w ataksjach spinocerebelarnych, chorobie Huntingtona oraz spinobulbarnej atrofii mięśniowej. Pomiary obejmują przykurcz tylnych kończyn (clasping), test krawędzi, chód oraz kifozę. Każdy parametr jest oceniany w skali 0-3, dając łączną sumę od 0 do 12 dla wszystkich czterech pomiarów. Wyniki skutecznie różnicują osobniki dotknięte chorobą od tych zdrowych, kwantyfikując jednocześnie czasowy postęp fenotypów chorób neurodegeneracyjnych. Pomiary można analizować oddzielnie lub łączyć w złożony wynik fenotypowy w celu uzyskania większej mocy statystycznej. Optymalna kombinacja czterech opisanych pomiarów zależy od analizowanego schorzenia. Przedstawiamy przykład zastosowania protokołu do oceny stopnia zaawansowania choroby w transgenicznym modelu mysim ataksji spinocerebelarnej typu 7 (SCA7).
Albert R. La Spada i Gwenn A. Garden wnieśli równy wkład w przygotowanie tego manuskryptu.

Opisujemy protokół szybkiej i czułej kwantyfikacji stopnia nasilenia choroby w mysich modelach ataksji móżdżkowej. Pomiary obejmują kleszczenie kończyn tylnych, test krawędzi, chód oraz kifozę. Protokół ten skutecznie rozróżnia osobniki dotknięte chorobą od osobników zdrowych i pozwala wykryć postęp choroby u osobników dotkniętych w czasie.

Prosty system punktacji złożonego fenotypu do oceny modeli mysich ataksji móżdżkowej

Opisujemy protokół szybkiej i czułej kwantyfikacji stopnia nasilenia choroby w modelach mysich ataksji móżdżkowej. Został on opracowany na podstawie wcześniejszych...

Opracowaliśmy złożony system oceny fenotypowej do ewaluacji stopnia ciężkości oraz progresji choroby. W modelach mysich ataksji móżdżkowej wykonujemy cztery różne testy: test krawędzi (ledge test), ocenę kończyn tylnych, oceniającą clasping, chód oraz kifozę, stosując skalę od zera do trzech dla każdego z testów, co daje łączną punktację od 0 do 12. Wśród wszystkich czterech pomiarów test krawędzi służy do bezpośredniego pomiaru koordynacji.Przykurcz kończyn tylnych jest markerem postępu choroby w wielu modelach mysich neurodegeneracji. Chód jest miarą koordynacji i funkcji mięśniowej. Kifoza to zakrzywienie kręgosłupa w odcinku szyjno-piersiowym, powszechne w modelach mysich neurodegeneracji układu ruchowego oraz rdzeniowo-móżdżkowej; dla każdego zwierzęcia należy przeprowadzić poszczególne testy i zapisać uzyskany wynik.Dla każdej grupy myszy oblicza się średnią sumę czterech wyników lub średni wynik kompozytowy fenotypu, a następnie nanosi go na wykres. Przy stosowaniu tego protokołu w różnych modelach mysich ważne jest, aby najpierw przeanalizować wyniki poszczególnych testów w celu ustalenia optymalnej kombinacji czterech opisanych miar. Ten konkretny protokół został opracowany w celu odróżnienia osobników dotkniętych chorobą od zdrowych, a także ilościowego określenia postępu fenotypu choroby w modelach mysich rdzeniowej ataksji móżdżkowej.Typ siódmy. Cześć, jestem Stephanie Fur z laboratorium dr Gwen Garden w Departamencie Neurologii na Uniwersytecie Waszyngtońskim. Dzisiaj zaprezentujemy prostą i czułą metodę oceny ciężkości choroby w mysich modelach ataksji móżdżkowej.Stosujemy tę procedurę w naszym laboratorium w celu ilościowej oceny różnic fenotypowych w modelach mysich rdzeniowej ataksji móżdżkowej typu siedem lub SCA7 oraz w celu monitorowania progresji fenotypu SCA7 w czasie. Zacznijmy zatem. Test krawędziowy (ledge test) jest bezpośrednią miarą koordynacji, która jest zaburzona w ataksjach móżdżkowych i wielu innych schorzeniach neurodegeneracyjnych.Służy to pomiarowi parametrów najbardziej bezpośrednio porównywalnych z ludzkimi objawami ataksji móżdżkowej, aby zapobiec błędowi systematycznemu. Osoba przeprowadzająca oceny nie powinna mieć wiedzy na temat genotypu zwierzęcia. Podczas ocen poszczególne wskaźniki są punktowane w skali od zera do trzech, gdzie zero oznacza brak fenotypu, a trzy jego najcięższą postać.Zacznij od podniesienia myszy z klatki i umieszczenia jej na krawędzi klatki. Obserwuj mysz, gdy idzie wzdłuż krawędzi klatki i schodzi z powrotem do jej wnętrza. Myszy typu dzikiego będą iść wzdłuż krawędzi bez utraty równowagi i sprawnie zeskoczą z powrotem do klatki, wykorzystując swoje łapy.Takie zachowanie otrzymuje ocenę zero. Jeśli mysz straci równowagę podczas chodzenia wzdłuż krawędzi, ale w pozostałych aspektach wydaje się skoordynowana, otrzymuje ocenę jeden. Jeśli nie potrafi efektywnie posługiwać się tylnymi kończynami lub nie jest w stanie płynnie zejść do klatki.Próbkę ocenia się na dwa punkty, jeśli podczas chodzenia lub próby zejścia spadnie z krawędzi lub niemal z niej spadnie, albo jeśli drży i całkowicie odmawia ruchu. Pomimo zachęty, jeśli zwierzę nie reaguje, otrzymuje ocenę trzy. Test krawędzi należy przeprowadzić trzykrotnie, aby zapewnić dokładny pomiar, a następnie zapisać wynik testu krawędzi.Przejdźmy teraz do oceny odruchu chwytnego kończyn tylnych. Chwytanie kończyn tylnych jest wskaźnikiem progresji choroby w wielu modelach mysich neurodegeneracji, w tym w przypadku niektórych ataksji móżdżkowych. Aby rozpocząć ocenę, chwyć ogon u nasady i unieś mysz, usuwając z otoczenia wszystkie zbędne przedmioty.Obserwuj pozycję kończyn tylnych przez około 10 sekund. Jeśli kończyny tylne są stale rozstawione na zewnątrz, z dala od brzucha, przypisuje się ocenę zero. Jeśli jedna kończyna tylna jest przyciągnięta do brzucha przez ponad 50% czasu zawieszenia, otrzymuje ona ocenę jeden.Jeśli obie kończyny tylne są częściowo przyciągnięte do brzucha przez ponad 50% czasu zawieszenia, przypisuje się wynik dwa. Jeśli kończyny tylne są całkowicie przyciągnięte i dotykają brzucha przez ponad 50% czasu zawieszenia, przypisuje się wynik trzy. Test należy przeprowadzić trzykrotnie i zapisać wynik przyciągania kończyn tylnych.Przejdźmy teraz do oceny chodu. Test chodu jest miarą koordynacji i funkcji mięśni. Aby rozpocząć test, należy wyjąć mysz z klatki i umieścić ją na płaskiej powierzchni głową skierowaną w stronę przeciwną do badacza.Obserwuj mysz od tyłu podczas chodu. Jeśli mysz porusza się normalnie, ciężar ciała jest wsparty na wszystkich kończynach, brzuch nie dotyka podłoża, a obie kończyny tylne pracują równomiernie, przypisuje się ocenę zero. Jeśli występuje drżenie, mysz kuleje podczas chodzenia lub jej stopy są lekko skierowane na zewnątrz, przypisuje się ocenę jeden.Jeśli występuje silny drżenie, silne utykanie, obniżenie miednicy lub stopy są bardziej odwrotne od osi ciała podczas lokomocji, przypisuje się ocenę dwa. Jeśli mysz ma trudności z poruszaniem się do przodu i ciągnie brzuchem po ziemi, otrzymuje ocenę trzy. Obserwuj GA myszy trzy razy i zapisz wynik oceny.Przejdźmy teraz do testu kifozy. Kifoza to charakterystyczne wygięcie kręgosłupa w odcinku grzbietowym. Jest to powszechny objaw chorób neurodegeneracyjnych obejmujących układy ruchowe, w tym rdzeniowe i móżdżkowe ataksje w modelach mysich.Jest ona spowodowana utratą napięcia mięśniowego w mięśniach grzbietu wtórnie do neurodegeneracji. Na początek wyjmij mysz z klatki i umieść ją na płaskiej powierzchni. Obserwuj zwierzę podczas chodzenia.Jeśli mysz jest w stanie łatwo wyprostować kręgosłup podczas chodzenia i nie wykazuje utrwalonej kifozy, otrzymuje ocenę zero. Jeśli mysz wykazuje łagodną kifozę, ale jest w stanie wyprostować kręgosłup, otrzymuje ocenę jeden. Jeśli nie jest w stanie go wyprostować, robi to całkowicie i utrzymuje utrwaloną, lecz łagodną kifozę, otrzymuje ocenę dwa.Jeśli mysz utrzymuje wyraźną kifozę podczas chodzenia lub siedzenia, przypisuje się jej ocenę trzy. Należy trzykrotnie ocenić stopień kifozy u myszy. Następnie umieść mysz z powrotem w klatce i zapisz uzyskaną ocenę kifozy.Oto reprezentatywny wykres złożonej oceny fenotypu mysiego modelu transgenicznego ataksji móżdżkowej typu siedem, znanego jako Flocked SCA 7 92 Q. Wyniki czterech pomiarów zostały zsumowane dla każdej myszy, a następnie obliczono średni wynik złożony dla obu genotypów w każdym wieku. Myszy Flocked SCA 7 92 Q wykazują progresywny fenotyp SCA siedem, który różni się znacząco od nietransgenicznych braci z miotu. Co istotne, ten wzrost wyniku fenotypowego w czasie jest zgodny z progresywnym charakterem ludzkiej choroby.Właśnie zaprezentowaliśmy, jak wykorzystać złożony system oceny fenotypu do ewaluacji ciężkości i progresji choroby w modelach mysich ataksji móżdżkowej. Podczas wykonywania tej procedury należy pamiętać, że otyłość jest czynnikiem zakłócającym we wszystkich czterech opisanych testach. Wyniki poszczególnych testów można analizować osobno, aby najpierw ustalić ich optymalną kombinację w złożonym systemie oceny fenotypu, najlepiej dopasowaną do stosowanego modelu mysiego.To wszystko. Dziękujemy za oglądanie i powodzenia w przeprowadzaniu eksperymentów.

a-simple-composite-phenotype-scoring-system-for-evaluating-mouse

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

Prosty Złożony System Oceny Fenotypowej do Oceny Modeli Mysich Ataksii Móżdżkowej

Model mysi stwardnienia zanikowego bocznego (ALS) poddano badaniu klinicznemu i behawioralnemu. Jako warunek wstępny dla towarzyszącej analizy immunohistologicznej szczegółowo przedstawiono przygotowanie rdzenia kręgowego.

Badania kliniczne i usuwanie rdzenia kręgowego w modelu mysim stwardnienia zanikowego bocznego (ALS)

Ten film pokazuje proces oceny dysfunkcji motorycznej w modelu mysim poprzez podanie toksyny krztuścowej i inokulum zawierającego peptydy naśladujące mielinę i adiuwanty, a następnie testy na bieżni w celu oceny funkcji motorycznych i oceny wynikłego uszkodzenia nerwów w wyniku aktywacji immunologicznej i demielinizacji.

Ocena funkcji motorycznych w eksperymentalnym mysim modelu autoimmunologicznego zapalenia nerwu

Ten protokół wideo opisuje czułą, niezawodną i szybką metodę oceny deficytów nerwowo-mięśniowych w transgenicznym mysim modelu stwardnienia zanikowego bocznego.

Szybki fenotypowy system punktacji neurologicznej do oceny postępu choroby w mysim modelu SOD1-G93A ALS

Przedstawiamy protokół biochemiczny i behawioralny do oceny skuteczności związków rozpuszczalnych w wodzie ukierunkowanych na mitochondria w leczeniu ataksji rdzeniowo-móżdżkowej typu 1 (SCA1) i innych chorób neurodegeneracyjnych móżdżku.

Leczenie myszy SCA1 związkami rozpuszczalnymi w wodzie w celu niespecyficznego wzmocnienia funkcji mitochondriów

Opisane tutaj jest etapowe, behawioralne podejście przesiewowe, które może być użyte do badania przesiewowego pod kątem związków wykazujących skuteczność in vivo na poznawcze i funkcjonalne zachowania motoryczne w transgenicznych mysich modelach β-amyloidozy i tauopatii. Metody te są zoptymalizowane pod kątem badań przesiewowych związków pod kątem aktywności w zadaniach pamięci krótkotrwałej i roboczej.

Ocena spontanicznej przemiany, rozpoznawania nowych obiektów i zaciskania kończyn w transgenicznych mysich modelach β amyloidu i neuropatologii tau

Udostępniamy protokół do generowania farmakologicznego modelu myszy dystonii DYT/PARK-ATP1A3 poprzez wszczepienie kaniul do zwojów podstawy i móżdżku podłączonych do pomp osmotycznych. Opisujemy indukcję ruchów podobnych do dystonii poprzez zastosowanie wyzwania motorycznego i charakterystykę fenotypu za pomocą behawioralnych systemów punktacji.

Implantacja pomp osmotycznych i indukcja stresu w celu ustalenia objawowego, farmakologicznego modelu myszy dla dystonii DYT/PARK-ATP1A3

Różne modele niedrożności tętnicy środkowej mózgu (MCAo) są używane w eksperymentalnych badaniach nad udarem. W tym miejscu opisano eksperymentalny model udaru przejściowego MCAo przez tętnicę szyjną zewnętrzną (ECA), który ma na celu naśladowanie udaru u człowieka, w którym skrzeplina naczyniowo-mózgowa jest usuwana w wyniku spontanicznej lizy skrzepu lub terapii.

Modelowanie udaru u myszy: przejściowe zamknięcie tętnicy środkowej mózgu przez tętnicę szyjną zewnętrzną

W tym artykule pokazujemy, jak używać siedmiopunktowego systemu punktacji do konsekwentnego ilościowego określania zmian w morfologii dendrytów neuronów dopaminergicznych u C. elegans. System ten jest przeznaczony do analiz testów neurodegeneracji dopaminergicznej z wykorzystaniem genetycznych, chemicznych i opartych na wieku modeli zaburzeń neurodegeneracyjnych.

Kwantyfikacja poziomów zmian morfologicznych i zwyrodnień neuronów dopaminergicznych u Caenorhabditis elegans

Eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia jest jednym z najczęściej stosowanych mysich modeli stwardnienia rozsianego. W obecnym protokole myszy C57BL/6J obu płci są immunizowane peptydem glikoproteinowym oligodendrocytów mielinowych, co skutkuje głównie wznoszącym się niedowładem ogona i kończyn. W tym miejscu omówiono protokół indukcji i oceny EAE.

Modelowanie stwardnienia rozsianego u obu płci: eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia wywołane MOG35-55

Ten artykuł przedstawia protokół realizacji wysoce translacyjnej i niezależnie sprawdzonej koncepcji mysiej jednostki uderzenia (mSU) u myszy o dużym skoku. Zapewnia również ustandaryzowany protokół wykonywania ogniskowej eksperymentalnej skali udaru u myszy, która ocenia deficyty ogniskowe udaru wykryte nawet długotrwale.

Protokół jednostki udaru myszy ze standaryzowaną punktacją neurologiczną do translacyjnych badań udarów myszy

Poznaj złożony system oceny fenotypu do badania ciężkości ataksji móżdżkowej u myszy. Metoda obejmuje testy koordynacji, chwytania kończyn, chodu i kifozy, umożliwiając śledzenie progresji choroby.

Prosty system punktacji złożonego fenotypu do oceny modeli mysich ataksji móżdżkowej

Przeglądaj więcej filmów