Mikroskopia z kontrastem fazowym do oceny mutantów rozwojowych u Streptomyces

Zacznij od płytek agarowych zawierających kolonie dzikich i zmutowanych szczepów Streptomyces coelicolor, nitkowatej bakterii glebowej.

Umieść sterylne szkiełko nakrywkowe na obszarze gęstego wzrostu kolonii, gdzie włókna powietrzne, które są włóknami wystającymi ponad powierzchnię kolonii, są wyraźnie widoczne.

Delikatnie dociśnij szkiełko nakrywkowe, aby przenieść włókna powietrzne i związane z nimi zarodniki na powierzchnię szkiełka nakrywkowego.

Następnie weź szkiełko mikroskopowe z podłożem montażowym i zamontuj szkiełko nakrywkowe komórką do dołu, aby zachować struktury bakteryjne.

Umieść szkiełko na stoliku mikroskopowym, dodaj kroplę olejku immersyjnego na szkiełko nakrywkowe i wyrównaj obiektyw.

Korzystając z mikroskopii z kontrastem fazowym, uzyskaj obrazy włókien powietrznych zarówno ze szczepów dzikich, jak i zmutowanych.

Włókna typu dzikiego wykazują jednolitej wielkości, regularnie rozmieszczone zarodniki.

W przeciwieństwie do tego, zmutowane szczepy wykazują wady, takie jak wybrzuszone włókna, nieregularne zarodniki lub zlizowane zarodniki, ujawniając rozwojowe różnice fenotypowe między typem dzikim a mutantami.

Aby przygotować szkiełko nakrywkowe do liftingu bakterii, użyj