JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:08 min. • April 30th, 2023
Cząsteczki adhezyjne komórek nabłonkowych lub EpCAM to powierzchniowe glikoproteiny transbłonowe, których nadmierna ekspresja występuje w szybko proliferujących komórkach nabłonkowych w rakach prostaty. Aby wyizolować komórki wykazujące ekspresję EpCAM, zacznij od drutu klasy medycznej z funkcjonalizowaną końcówką pokrytą złotem. Funkcjonalizacja polega na warstwach polimerowego żelu zawierającego kowalencyjnie związane przeciwciała specyficzne dla EpCAM.
Zanurz drut w obwodowej zawiesinie krwi zawierającej fluorescencyjnie znakowane komórki rakowe. Upewnij się, że funkcjonalizowana część pozostaje zanurzona w zawiesinie krwi. EpCAMy na komórkach nowotworowych rozpoznają i wiążą się z ich specyficznymi przeciwciałami funkcjonalizowanymi na przewodzie.
Umyj buforem, aby usunąć wszelkie niezwiązane komórki z powierzchni drutu. Zegnij drut i zamontuj go na szklanym szkiełku zawierającym bufor, z funkcjonalizowaną częścią zanurzoną w buforze. Użyj mikroskopu fluorescencyjnego, aby sprawdzić jasną fluorescencję z cytoplazmy i jąder komórkowych oraz potwierdzić obecność przechwyconych komórek na przewodzie.
Potraktuj drut buforem zwalniającym. Enzymy proteolityczne w buforze rozszczepiaj
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych