Barwienie kwasem okresowym Schiffa lub PAS: metoda oceny deformacji strukturalnych kłębuszków nerkowych

Kłębuszek nerkowy to złożona sieć naczyń włosowatych w nerkach, która filtruje odpady i usuwa nadmiar płynu z krwi. Szybkość filtracji nerkowej zależy od tej wyspecjalizowanej struktury, którą można zbadać za pomocą barwnika Periodic Acid Schiff lub PAS.

Na początek weź parafinowany wycinek kory nerki na szklanym szkiełku. Potraktuj szkiełko ksylenem. Cząsteczki ksylenu rozpuszczają wosk parafinowy z części tkankowej. Następnie wystaw próbkę na działanie zmniejszających się stężeń alkoholu. Alkohol usuwa ślady ksylenu, jednocześnie nawilżając część tkanki w celu późniejszego związania plamy.

Teraz dodaj kwas periodyczny do próbki. Kwas periodyczny przekształca diole obecne w polisacharydach tkankowych, takich jak glikogen lub mucyna, w aldehydy. Aldehydy te reagują z odczynnikiem Schiffa, kombinacją kwasu fuksynowego i siarkowego, tworząc barwnik w kolorze magenty, który barwi wycinek tkanki. Opłucz szkiełko, aby usunąć nadmiar plamy.

Po spłukaniu dodaj żelazo-hematoksylinę, jądrowy barwnik przeciwzapalny, który wiąże się z DNA i barwi go na fioletowo. Umyj, aby usunąć nadmiar plam. Na koniec odwodnić próbkę za pomocą zwiększającej mocy alkoholu, a następnie ksylenu, który służy ja