JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 3:05 min. • July 8th, 2025
Cząsteczki podobne do wirusa Chikungunya, VLP, są niezakaźnymi strukturami złożonymi z białek otoczki wirusa osadzonych w dwuwarstwie lipidowej i pozbawionych materiału genetycznego.
Aby wytworzyć VLP Chikungunya, należy zainfekować komórki owadów Spodoptera frugiperda Sf9 rekombinowanymi bakulowirusami wykazującymi ekspresję strukturalnej kasety genowej Chikungunya. Kaseta składa się z promotora bakulowirusa połączonego z genami strukturalnymi chikungunya kodującymi kapsyd i białka otoczkowe.
Podczas inkubacji glikoproteiny otoczkowe bakulowirusa wiążą się z receptorami powierzchniowymi na komórkach owadów. Ułatwia to wnikanie i uwalnianie wirusowego DNA do cytoplazmy, generując poliproteiny zawierające kapsyd chikungunya i białka otoczkowe.
Po syntezie, autokatalityczne rozszczepienie białka kapsydu wytwarza prekursorową poliproteinę posiadającą białka otoczki w retikulum endoplazmatycznym, ER. W świetle ER enzymy rozszczepiają prekursorową poliproteinę, generując pojedyncze białka, które dostają się do przedziału Golgiego w celu dalszego przetwarzania, tworząc heterotrimery białkowe.
Proteazy rezydentne Golgiego rozszczepiają heterotrimery białek, wytwarzając dojrzałe białka oto
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych