JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 5:29 min. • July 8th, 2025
Weź szkiełko przepływowe zawierające podpartą dwuwarstwę lipidową lub SLB.
SLB jest sprzężony ze specyficznymi ligandami - cząsteczką adhezji międzykomórkowej 1 lub ICAM-1 i przeciwciałami anty-CD3 - znakowanymi fluoroforami.
Dodaj limfocyty T i znakowany fluoroforem anty-CD107a Fab - fragment przeciwciała wiążącego antygen przeciwko markerowi degranulacji.
Kompleks receptora limfocytów T-CD3 lub TCR-CD3 wiąże się z przeciwciałem anty-CD3, wyzwalając TCR.
Indukowana wyzwalaniem sygnalizacja inside-out aktywuje integryny na powierzchni, które wiążą się z unieruchomionym ICAM-1.
Koniugacja indukuje reorganizację cytoszkieletu - przegrupowanie mikrotubul i polimeryzację aktyny, która prowadzi do bocznego rozprzestrzeniania się komórki na powierzchni SLB.
Rozprzestrzenianie się pozwala na więcej interakcji ligand-receptor w celu utworzenia supramolekularnego klastra aktywacji lub SMAC, tworząc synapsę immunologiczną.
Granulki lityczne limfocytów T poruszają się wzdłuż mikrotubul i łączą się z błoną plazmatyczną, odsłaniając markery degranulacji na powierzchni komórki, które wiążą się z anty-CD107a Fab.
Za pomocą mikroskopu fluorescencyjnego uwidocznij synapsę immunologiczną wzbogaconą
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych