Test immunologiczny oparty na nanocząstkach magnetycznych przy użyciu urządzenia mikroprzepływowego
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunologia
0 wyświetleń • 4:16 min. • July 8th, 2025
Weźmy urządzenie mikroprzepływowe przymocowane do stolika mikroskopowego, składające się z wlotu do dozowania odczynników, połączonych ze sobą kanałów do przepływu płynów i wylotów do przedmuchiwania płynów.
Główny kanał zawiera centralne, naprzemienne ograniczenie z uwięzionymi zagregowanymi mikrocząstkami żelaza.
Kanały są inkubowane z roztworem blokującym, aby zapobiec niespecyficznemu wiązaniu przeciwciał.
Przelej bufor do mycia, usuwając nadmiar roztworu blokującego.
Wprowadzić zawiesinę immunokompleksu o określonej szybkości przepływu. Immunokompleks składa się z nanocząstek magnetycznych, pokrytych antygenami związanymi z przeciwciałami pierwotnymi, które są dalej wiązane z przeciwciałami drugorzędowymi sprzężonymi z peroksydazą.
Zastosuj zewnętrzne pole magnetyczne, namagnesowując zagregowane mikrocząstki i przekształcając je w pułapkę magnetyczną do wychwytywania immunokompleksów.
Wprowadzić substrat fluorogenny, który jest przekształcany przez peroksydazę w produkt fluorescencyjny i przepływa przez pułapkę.
Za pomocą mikroskopu porównaj fluorescencję przed i po pułapce, potwierdzając wychwytywanie immunokompleksów.
Napełnij kanały wodą destylowaną za pomocą strzykawki. Za
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych