Uzyskiwanie poziomych wycinków mózgu hipokampa myszy

Weźmy półkule mózgowe myszy w roztworze o wysokiej zawartości sacharozy. Zabezpiecz półkule brzuszną stroną skierowaną do góry na płytce próbki wibratomu za pomocą kleju.

Przenieść płytkę z próbką do komory krojenia.

Dodaj częściowo zamrożony roztwór o wysokiej zawartości sacharozy, aby utrzymać warunki fizjologiczne tkanki i zestalić klej.

Dostarcz mieszaninę dwutlenku węgla i tlenu, aby utrzymać dotlenienie tkanek.

Korzystając z ustawionych parametrów, uzyskaj początkowe plasterki i usuń je. Ponadto uzyskaj poziome plasterki hipokampa.

Ostrożnie przenieś te wycinki mózgu do komory zawierającej ACSF w celu regeneracji tkanek.

Poziome plastry hipokampa są gotowe do dalszych eksperymentów.

Umieść obie półkule na świeżo przyciętej stronie grzbietowej z brzuszną częścią mózgu skierowaną do góry i umieść kroplę superglue na płytce próbki. Użyj końcówki pipety, aby rozprowadzić klej na dużym obszarze, aby pomieścić oba kawałki tkanki, i dotknij kawałka paska bibuły filtracyjnej po brzusznej stronie jednej półkuli. Użyj innego paska z bibuły filtracyjnej, aby ostrożnie częściowo wysuszyć grzbietową stronę mózgu i umieść półkulę grzbietową w dół na kleju na płytce próbki.

Użyj dwóch dodat