JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 5:06 min. • July 8th, 2025
Weź zapłodnione jajo kurze zawierające zarodek we wczesnym stadium rozwoju.
Wysterylizuj skorupę i ostrożnie ją otwórz.
Usuń zarodek. Rozciąć głowę i przenieść ją na płytkę hodowlaną zawierającą bufor. Usuń gałkę oczną.
Wykonaj nacięcie i usuń warstwy skóry, odsłaniając przodomózgowie i śródmózgowie.
Usuń wewnętrzną warstwę błoniastą i naczynia krwionośne. Wypreparuj i przenieś przodomózgowie na płytkę hodowlaną z buforem.
Pokrój tkankę na mniejsze fragmenty i przenieś je do stożkowej rurki. Gdy fragmenty osiądą, usuń bufor.
Dodaj roztwór enzymu proteolitycznego. Inkubuj w celu strawienia macierzy zewnątrzkomórkowej tkanki i rozluźnienia neuronów.
Usuń pożywki bogate w enzymy, przemyj pożywką neuropodstawną, usuwając wszelkie pozostałe enzymy.
Dodaj podłoże neuropodstawne. Mechanicznie dysocjuj tkankę, aby uzyskać zawiesinę neuronalną.
Zasiej te neurony w systemie wieloelektrodowym pokrytym macierzą zewnątrzkomórkową. Dodaj pożywkę neurobazalną i inkubuj.
Neurony przyłączają się i wydłużają projekcje, tworząc sieć neuronalną.
W dniu posiewu neuronów wyjmij fiolkę z macierzą zewnątrzkomórkową z zamrażarki o temperaturze -20 stopni Celsjusza. Spryskaj 70% etanolem i umieść na lodzie.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych