Stymulacja neuronów czuciowych zwoju korzenia grzbietowego za pomocą agonisty receptora neuropeptydowego
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:07 min. • July 8th, 2025
Weź płytkę wielodołkową zawierającą transfekowane neurony czuciowe zwoju korzenia grzbietowego szczura.
Neurony studzienki testowej wykazują zmniejszoną ekspresję receptora neuropeptydowego, podczas gdy neurony studzienki kontrolnej wykazują fizjologiczne poziomy ekspresji receptora neuropeptydowego.
Zastąp pożywkę pożywką niezawierającą surowicy, aby zapewnić kontrolowane środowisko dla dokładnej reakcji na stymulację.
Dodaj agonistę receptora neuropeptydowego do studzienek i wymieszaj. Inkubuj płytkę.
W studzience kontrolnej agonista receptora neuropeptydowego wiąże się z receptorami docelowymi, uruchamiając wewnątrzkomórkową kaskadę sygnalizacyjną, która uwalnia neuroprzekaźniki.
Jednak w studzienkach testowych zmniejszona ekspresja receptora neuropeptydowego ogranicza wiązanie agonistów, co prowadzi do zmniejszonego uwalniania neuroprzekaźników w porównaniu z kontrolą.
Po inkubacji zebrać pożywkę z dołków i odwirować.
Przenieś supernatant do probówek i użyj odpowiedniego testu immunologicznego do pomiaru poziomu neuroprzekaźników. Próbka kontrolna wykazuje wyższe uwalnianie neuroprzekaźników niż próbka badana po stymulacji agonistą neuroreceptorów.
W 6 dniu, po posiewie i 72 go
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych