Name: Protokół transferu mikroRNA do dorosłych hematopoetycznych komórek macierzystych pochodzących ze szpiku kostnego w celu umożliwienia inżynierii komórkowej w połączeniu z celowaniem magnetycznym (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-06-18T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 37 s
Description: Poznaj metodę transferu mikroRNA do komórek macierzystych CD133+ przy użyciu niewirusowej transfekcji magnetycznej. Ta technika umożliwia bezpieczną modyfikację genetyczną komórek szpiku kostnego z zachowaniem ich właściwości terapeutycznych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez Federalne Ministerstwo Edukacji i Badań Naukowych Niemcy (FKZ 0312138A i FKZ 316159), Kraj Związkowy Meklemburgia-Pomorze Przednie z funduszy strukturalnych UE (ESF/IVWM-B34-0030/10 i ESF/IVBM-B35-0010/12), DFG (DA1296/2-1), Niemiecka Fundacja Kardiologiczna (F/01/12), BMBF (VIP+ 00240) i Fundacja DAMP. Ponadto F.H. i P.M. są wspierani przez program FORUN Centrum Medycznego Uniwersytetu w Rostocku (889001).

Autorzy deklarują brak konfliktu interesów.

W ostatnich latach SC CD133 + okazały się obiecującą populacją komórek dla terapii opartych na SC, o czym świadczy kilka badań klinicznych fazy I, II i III 43,44,45,46,47,48,49,50,51,52,53,54<sup clas...

CD133+ SCs reprezentują heterogeniczną populację komórek macierzystych i progenitorowych z obiecującym potencjałem dla medycyny regeneracyjnej. Ich hematopoetyczny, śródbłonkowy i miogenny potencjał różnicowania1,2,3 umożliwia komórkom CD133+, np. przyczynianie się do procesów neowaskularyzacji poprzez różnicowanie się w nowo tworzące się naczynia krwionośne i aktywację sygnalizacji proangiogennej przez mechanizmy parakrynne4,5,6,7.
Pomimo ich wysokiego potencjału wykazanego w ponad 30 zatwierdzonych badaniach klinicznych (ClinicalTrails.gov), ich wynik terapeutyczny jest nadal przedmiotem kontrowersyjnych dyskusji4. Rzeczywiście, kliniczne zastosowanie SC jest utrudnione przez niską retencję w narządzie będącym przedmiotem zainteresowania i masywną początkową śmierć komórki5,8,9. Dodatkowa inżynieria CD133+ SC przed przeszczepem może pomóc w przezwyciężeniu tych wyzwań.
Jednym z warunków wstępnych skutecznej terapii komórkowej byłoby zmniejszenie masowej początkowej śmierci komórki, aby zwiększyć wszczepianie komórek istotnych terapeutycznie10. Obecne badania wykazały ogromną utratę komórek wynoszącą 90–99% w wysoce ukrwionych narządach, takich jak mózg i serce, w ciągu pierwszych 1–2 godzin, niezależnie od typu przeszczepionej komórki lub drogi aplikacji11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21. Znakowanie SC za pomocą nanocząstek magnetycznych (MNP) umożliwia innowacyjną, nieinwazyjną strategię kierowania komórek w miejsce zainteresowania22,23,24,25,26 i jednocześnie umożliwia monitorowanie komórek za pomocą MRI27 i obrazowania cząstek magnetycznych (MPI). Najbardziej efektywne badania in vivo z zastosowaniem ukierunkowania na namagnesowane komórki wykorzystywały retencję komórek po miejscowym podaniu zamiast kierowania komórkami po wstrzyknięciu dożylnym23,24,28. Dlatego nasza grupa zaprojektowała system dostarczania składający się z superparamagnetycznych nanocząstek tlenku żelaza29. Dzięki tej technice, CD133+ SC i ludzkie komórki śródbłonka żyły pępowinowej (HUVEC) mogą być skutecznie celowane, jak wykazano w próbach in vitro30,31.
Kolejną przeszkodą w terapiach SC jest wrogie środowisko zapalne dotkniętej tkanki po przeszczepie, które przyczynia się do początkowej śmierci komórki32. Oprócz kilku badań kondycjonowania wstępnego, przetestowano zastosowanie terapeutycznych miR 33; Udało się wykazać, że antyapoptotyczne miR hamują apoptozę in vitro i zwiększają wszczepianie komórek in vivo33. Te małe cząsteczki, złożone z 20–25 nukleotydów, odgrywają kluczową rolę jako posttranskrypcyjne modulatory informacyjnego RNA (mRNA), a tym samym wpływają na los i zachowanie komórek macierzystych34. Co więcej, egzogenne wprowadzenie miR pozwala uniknąć niepożądanej stabilnej integracji z genomem gospodarza34.
Obecne próby skutecznego wprowadzenia kwasów nukleinowych (NA) do pierwotnych SC opierają się głównie na rekombinowanych wirusach8,35. Pomimo wysokiej skuteczności transfekcji, manipulacja rekombinowanym wirusem stanowi główną przeszkodę dla translacji z laboratorium na łóżko, np. niekontrolowana ekspresja genów, patogenność, immunogenność i mutageneza insercji35,36. Dlatego opracowanie niewirusowych systemów dostarczania, takich jak konstrukty na bazie polimerów, ma kluczowe znaczenie. Wśród nich polietylenenina (PEI) stanowi ważny nośnik oferujący korzyści dla miR, takie jak kondensacja NA w celu ochrony przed degradacją, wychwytem komórkowym i uwalnianiem wewnątrzkomórkowym poprzez ucieczkę endosomalną37,38. Ponadto kompleksy miR-PEI wykazały wysoką biokompatybilność w badaniach klinicznych39. Dlatego nasz system dostarczania składa się z biotynylowanego, rozgałęzionego PEI o masie 25 kDa związanego z pokrytym streptawidyną rdzeniem MNP30,31,40.
W tym manuskrypcie prezentujemy obszerny protokół opisujący (i) ręczną izolację CD133+ SC od dawcy ludzkiego szpiku kostnego (BM) ze szczegółową charakterystyką produktu SC oraz (ii) efektywną i delikatną strategię transfekcji magnetycznie niewirusowego systemu dostarczania opartego na polimerach do inżynierii genetycznej SC CD133+ przy użyciu miRs. CD133+ SC są izolowane i magnetycznie wzbogacane z ludzkich aspiracji BM mostka przy użyciu systemu sortowania komórek aktywowanych magnetycznie (MACS) opartego na przeciwciałach powierzchniowych. Następnie żywotność i czystość komórek są analizowane za pomocą cytometrii przepływowej. Następnie przygotowuje się kompleksy miR/PEI/MNP i transfekuje CD133+ SC. 18 godzin po transfekcji analizowana jest skuteczność wychwytu i wpływ transfekcji na ekspresję markera SC i żywotność komórek. Ponadto ocena wewnątrzkomórkowego rozmieszczenia związków kompleksu transfekcji odbywa się za pomocą znakowania czterokolorowego i mikroskopii oświetlenia strukturalnego (SIM).

<table><tbody><tr><td>7-AAD</td><td>BD Biosciences</td><td>559925</td><td></td></tr><tr><td>Kwas octowy z błękitem metylenowym</td><td>Technologie komórek macierzystych</td><td>7060</td><td>3%</td></tr> <tr><td>anty-CD133/2-PE (klon: 293C3)</td> <td>Miltenyi Biotec GmbH</td><td>130-090-853</td><td></td></tr><tr><td>anty-CD34-FITC (klon: AC136)</td> <td>Miltenyi Biotec GmbH</td><td>130-081-001</td><td></td></tr><tr><td>anty-CD45-APC-H7 (klon: 2D1)</td> <td>BD Biosciences</td><td></td><td></td>560178</tr><tr><td>barwnik rodaminy; Barwnik Atto 565 sprzężony z biotyną</td><td>ATTO-TEC GmbH</td><td>AD 565-71</td><td></td></tr><tr><td>BD FACS LSRII cytometr przepływowy</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>BD FACSDiva Software 6.1.2</td><td>BD Biosciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>BSA</td><td>Sigma-Aldrich GmbH</td><td>A7906</td><td></td></tr><tr><td>CD133 superparamagnetyczne cząstki dekstranu żelaza sprzężone z przeciwciałem; CD133 MicroBead Kit</td><td>Miltenyi Biotec GmbH</td><td>130-097-049</td><td></td></tr><tr><td>kolagenaza B</td><td>Roche Diagnostics GmbH</td><td>11088831001</td><td></td></tr><tr><td>komora licząca</td><td>Paul Marienfeld GmbH & Co. KG</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cyjanina 3 barwnik oznaczony jako prekursor miR; Cy3 Znakowana barwnikiem kontrola ujemna Pre-miR #1</td><td>Zestaw</td><td></td> do znakowania Ambion AM17120 <td></td></tr><tr><td>Cyjanina 5 barwnik miR; Cy5 dye Label IT Zestaw do znakowania miRNA Mirus</td><td>Bio</td><td>MIR 9650</td><td></td></tr><tr><td>DNAse I</td><td>Roche Diagnostics GmbH</td><td>10104159001</td><td>(100 U/mL)</td></tr><tr><td>ELYRA PS.1 LSM 780 mikroskop konfokalny</td><td>Carl Zeiss Jena GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Odczynnik blokujący FcR, ludzki</td><td>Miltenyi Biotec GmbH</td><td>130-059-901</td><td></td></tr><tr><td>jasnozielony zestaw do znakowania białek; Oregon Green 488 Zestaw do znakowania białek</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>O10241</td><td></td></tr><tr><td>wodne podłoże montażowe; Fluoroshield</td><td>Sigma-Aldrich GmbH</td><td>F6182</td><td></td></tr><tr><td>probówka wirówkowa z gradientem gęstości; Probówka wirówkowa Leukosep</td><td>Greiner Bio-One</td><td>89048-932</td><td></td></tr><tr><td>MACS uchwyt magnetyczny; MACS MultiStand</td><td>Miltenyi Biotec GmbH</td><td>130-042-303</td><td></td></tr><tr><td>Filtr do separacji wstępnej MACS</td><td>Miltenyi Biotec GmbH</td><td>130-041-407</td><td>30 &micro; m</td></tr><tr><td>Kolumna separacyjna MACS (MS / LS)</td><td>Miltenyi Biotec GmbH</td><td>130-042-201 / 130-042-401</td><td></td></tr><tr><td>Magnes trwały MACS; Separator MACS</td><td>Miltenyi Biotec GmbH</td><td>130-042-302</td><td></td></tr><tr><td>Millex-HV Filtr PVDF</td><td>Merck</td><td>SLHV013SL</td><td>0,45 &mu; m</td></tr><tr><td>mysz IgG 2b-PE</td><td>Miltenyi Biotec GmbH</td><td>130-092-215</td><td></td></tr><tr><td>barwnik reaktywny aminowy; Near-IR LIVE/DEAD Zestaw do naprawy barwienia martwych komórek</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>L10119</td><td></td></tr><tr><td>pożywka do separacji ludzkich limfocytów; Pancoll</td><td>Pan Biotech GmbH</td><td>P04-60500</td><td>gęstość: 1,077 g/ml</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Pan Biotech GmbH</td><td>P04-53500</td><td>bez Ca i Mg</td></tr><tr><td>PEI</td><td>Sigma-Aldrich GmbH</td><td>408727</td><td>rozgałęziony; 25 kDa</td></tr><tr><td>Penicylina/Streptomycyna</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>15140122</td><td>100 U/mL, 100 &mu; g/ml</td></tr><tr><td>PFA</td><td>, Merck, Schuchardt, OHG</td><td>1040051000</td><td></td></tr><tr><td>nieznakowany prekursor miR; Pre-miR miRNA Prekursor Kontrola negatywna #1</td><td>Ambion</td><td>AM17110</td><td></td></tr><tr><td>Bufor do lizy RBC</td><td>eBioscience</td><td>00-4333-57</td><td></td></tr><tr><td>Roztwór do dekontaminacji RNAzy; RNaseZap</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>AM9780</td><td></td></tr><tr><td>pożywka dla ludzkich limfocytów; Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 medium</td><td>Pan Biotech GmbH</td><td>P04-16500</td><td></td></tr><tr><td>rekombinowany suplement cytokin ludzkich; StemSpan CC100</td><td>Stemcell Technologies</td><td>2690</td><td></td></tr><tr><td>pożywka do namnażania komórek krwiotwórczych bez surowicy; StemSpan H3000</td><td>Stemcell Technologies</td><td>9800</td><td></td></tr><tr><td>Streptawidyna MagneSphere Cząstki paramagnetyczne</td><td>Promega Corporation</td><td>Z5481</td><td></td></tr><tr><td>Roztwór błękitu trypanowego</td><td>Sigma-Aldrich GmbH</td><td>T8154</td><td>0,4 %</td></tr><tr><td>UltraPure EDTA</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>15575020</td><td>0,5 M; pH 8,0</td></tr><tr><td>ZEN2011 oprogramowanie</td><td>Carl Zeiss Jena GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spektrofotometr NanoDrop 1000</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sonorex RK 100 SH sonikująca łaźnia wodna</td><td>Bandelin elektroniczna</td><td></td><td>Ultradźwiękowa moc nominalna: 80 W; Częstotliwość ultradźwiękowa: 35 kHz</td></tr></tbody></table>

protokół transferu mikrorna do dorosłych hematopoetycznych komórek macierzystych pochodzących ze szpiku kostnego w celu umożliwienia inżynierii komórkowej w połączeniu z celowaniem magnetycznym

Protocol for MicroRNA Transfer into Adult Bone Marrow-derived Hematopoietic Stem Cells to Enable Cell Engineering Combined with Magnetic Targeting

Chociaż udowodniono, że hematopoetyczne komórki macierzyste (SC) CD133+ mają duży potencjał w dziedzinie medycyny regeneracyjnej, ich niskie wskaźniki retencji po wstrzyknięciu do uszkodzonych tkanek, jak również obserwowane masowe wskaźniki śmierci komórek prowadzą do bardzo ograniczonych efektów terapeutycznych. Aby przezwyciężyć te ograniczenia, staraliśmy się ustalić protokół nieoparty na wirusach dla odpowiedniej inżynierii komórkowej przed ich podaniem. Modyfikacja ludzkich SC z ekspresją CD133+ za pomocą polipleksów magnetycznych obciążonych mikroRNA (miR) została skupiona pod kątem wydajności i bezpieczeństwa wychwytu, a także potencjału celowania komórek. Opierając się na naszym protokole, możemy osiągnąć wysokie wskaźniki wychwytu miR na poziomie 80-90%, podczas gdy właściwości komórek macierzystych CD133+ pozostają nienaruszone. Co więcej, te zmodyfikowane ogniwa oferują opcję celowania magnetycznego. Opisujemy tutaj bezpieczną i wysoce wydajną procedurę modyfikacji SC CD133+. Oczekujemy, że takie podejście zapewni standardową technologię optymalizacji efektów terapeutycznych komórek macierzystych i monitorowania podawanego produktu komórkowego za pomocą obrazowania metodą rezonansu magnetycznego (MRI).

Przedstawiony protokół opisuje ręczną izolację i magnetyczne wzbogacenie ludzkich komórek macierzystych CD133+ pochodzących z szpiku kostnego, z następującą strategią inżynierii komórkowej niezależnej od wirusów, jako nieinwazyjną technologię do manipulacji komórkami in vitro oraz narzędzie do monitorowania in vivo.
Ta trzyetapowa technologia izolacji umożliwia oddzielenie MNC z uprzednio strawionego...

Ten protokół ilustruje bezpieczną i skuteczną procedurę modyfikacji krwiotwórczych komórek macierzystych CD133+. Zaprezentowane niewirusowe, oparte na polipleksie magnetycznym podejście może stanowić podstawę do optymalizacji efektów terapeutycznych komórek macierzystych, a także do monitorowania podawanego produktu komórkowego za pomocą rezonansu magnetycznego.

Protokół transferu mikroRNA do dorosłych hematopoetycznych komórek macierzystych pochodzących ze szpiku kostnego w celu umożliwienia inżynierii komórkowej w połączeniu z celowaniem magnetycznym

While CD133+ hematopoietic stem cells (SCs) have been proven to provide high potential in the field of regenerative medicine, their low retention rates ...

Nasz protokół może odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie medycyny regeneracyjnej, takie jak to, czy komórki można ulepszyć pod kątem korzystnych właściwości, a także czy można je ukierunkować na interesujące Cię miejsce. Główną zaletą naszego protokołu jest fakt, że komórki mogą być przejściowo, genetycznie modyfikowane przy użyciu naszej metody transfekcji niewirusowej, zachowując w ten sposób właściwości komórek. Metoda Sautera może dostarczyć informacji na temat modyfikacji hematopoetycznych komórek macierzystych, które można zastosować do innych typów komórek stosowanych do przeszczepów, takich jak mezenchymalne komórki macierzyste.Aby rozpocząć protokół, podgrzej pożywkę ludzkich limfocytów do temperatury pokojowej i rozmroź kolagenazę B i DNazę. Zbierz szpik kostny lub BM do stożkowej rurki o pojemności 50 mililitrów. Wyrzuć wszystkie istniejące skrzepy.Pobrać próbkę BM o objętości 200 mikrolitrów do późniejszej analizy cytometrii przepływowej. Przechowywać próbkę w temperaturze czterech stopni Celsjusza do czasu, gdy będzie potrzebna. Następnie przenieś dziesięć mililitrów BM do nowej 50-mililitrowej stożkowej probówki i dodaj sześć mililitrów PBS EDTA, 20 mililitrów

protocol-for-microrna-transfer-into-adult-bone-marrow-derived

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioinżynieria

Kombinatoryczne oznaczanie 5 fluorescencyjnych białek hematopoetycznych komórek macierzystych i progenitorowych pozwala na śledzenie klonów in vivo za pomocą mikroskopii konfokalnej i dwufotonowej, dostarczając wglądu w architekturę hematopoetyczną szpiku kostnego podczas regeneracji. Metoda ta umożliwia nieinwazyjne mapowanie losów kodowanych spektralnie komórek pochodzących z HSPC w nienaruszonych tkankach przez długi czas po przeszczepie.<br...

In vivo (in vivo) Klonalne śledzenie hematopoetycznych komórek macierzystych i progenitorowych oznaczonych pięcioma białkami fluorescencyjnymi przy użyciu mikroskopii konfokalnej i wielofotonowej

Ukierunkowane dostarczanie komórek jest przydatne w różnych zastosowaniach biomedycznych.  Celem tego protokołu jest wykorzystanie superparamagnetycznych nanocząstek tlenku żelaza (SPION) do znakowania komórek, a tym samym umożliwienie podejścia do magnetycznego celowania w komórki w celu uzyskania wysokiego stopnia kontroli nad dostarczaniem i lokalizacją komórek.

Znakowanie i celowanie w komórki za pomocą superparamagnetycznych nanocząstek tlenku żelaza

Chondrogeneza z komórek macierzystych wymaga precyzyjnego dostrojenia warunków hodowli. W tym miejscu przedstawiamy magnetyczne podejście do kondensacji komórek, które jest niezbędnym krokiem do zainicjowania chondrogenezy. Ponadto wykazaliśmy, że dynamiczne dojrzewanie w bioreaktorze stosuje mechaniczną stymulację konstruktów komórkowych i zwiększa produkcję chrzęstnej macierzy zewnątrzkomórkowej.

Agregacja magnetycznych komórek macierzystych 3D i dojrzewanie bioreaktora w celu regeneracji chrząstki

Ten manuskrypt opisuje efektywne, niewirusowe dostarczanie miR do komórek śródbłonka przez wektor PEI/MNP i ich namagnesowanie. Tak więc, oprócz modyfikacji genetycznej, podejście to pozwala na magnetyczne prowadzenie komórek i wykrywalność MRI. Technika ta może być stosowana w celu poprawy właściwości terapeutycznych produktów komórkowych.

Przygotowanie i charakterystyka in vitro namagnesowanych komórek śródbłonka zmodyfikowanych miR

Ten protokół opisuje przejściową inżynierię genetyczną komórek macierzystych zębów pobranych z ludzkiego mieszków zębowych. Zastosowana strategia modyfikacji niewirusowej może stać się podstawą do udoskonalenia terapeutycznych produktów z wykorzystaniem komórek macierzystych.

Izolacja, charakterystyka i modyfikacja genetyczna ludzkich komórek pęcherzyków zębowych w oparciu o mikroRNA

Opisujemy zastosowanie przeszczepu krwiotwórczych komórek macierzystych (HSCT) do oceny potencjału nowotworowego genetycznie modyfikowanych komórek krwiotwórczych. HSCT jest przydatny do oceny różnych złośliwych komórek krwiotwórczych in vivo, a także do generowania dużej kohorty myszy z zespołami mielodysplastycznymi (MDS) lub białaczką w celu oceny nowych terapii.

Zastosowanie przeszczepu krwiotwórczych komórek macierzystych do oceny pochodzenia zespołu mielodysplastycznego

Celem tego protokołu jest wyizolowanie komórek CD34+ naczelnych innych niż człowiek z przygotowanego szpiku kostnego, modyfikowanie genów tych komórek za pomocą wektorów lentiwirusowych oraz przygotowanie produktu do infuzji do autologicznego gospodarza. Łączna długość protokołu wynosi około 48 godzin.

Przygotowanie i modyfikacja genów hematopoetycznych komórek macierzystych i progenitorowych naczelnych

Opisane są protokoły wysoce efektywnej edycji genomu mysich hematopoetycznych komórek macierzystych i progenitorowych (HSPC) przez system CRISPR/Cas9 w celu szybkiego rozwoju mysich systemów modelowych z modyfikacjami genów specyficznymi dla układu krwiotwórczego.

Edycja genomu za pośrednictwem lentiwirusowego CRISPR/Cas9 w celu badania komórek krwiotwórczych w modelach chorobowych

Obecny protokół opisuje zoptymalizowaną procedurę hodowli hematopoetycznych komórek macierzystych i progenitorowych (HSPC) w celu solidnego wszczepienia komórek z edytowanymi genami in vivo.

Edycja genów CRISPR/Cas9 hematopoetycznych komórek macierzystych i progenitorowych do zastosowań w terapii genowej

Ten protokół opisuje procedurę edycji genomu w makrofagach pochodzących ze szpiku kostnego myszy przy użyciu kompleksów rybonukleoprotein Cas9-sgRNA składanych in vitro i dostarczanych przez elektroporację.

Wysokowydajne rozrywanie genów w pierwotnych makrofagach pochodzących ze szpiku kostnego przy użyciu elektroporowanych kompleksów Cas9-sgRNA

Ten protokół opisuje doudowe wstrzyknięcie kilku krwiotwórczych lub białaczkowych komórek macierzystych, w tym komórek z edytowanymi genami, w mysich modelach ksenoprzeszczepów, co nie tylko umożliwi szybki i bezpieczny przeszczep komórek, ale także seryjne analizy szpiku kostnego.

Uproszczone iniekcje doudowe przy użyciu żywych myszy pozwalają na ciągłą analizę szpiku kostnego

Poznaj metodę transferu mikroRNA do komórek macierzystych CD133+ przy użyciu niewirusowej transfekcji magnetycznej. Ta technika umożliwia bezpieczną modyfikację genetyczną komórek szpiku kostnego z zachowaniem ich właściwości terapeutycznych.

Protokół transferu mikroRNA do dorosłych hematopoetycznych komórek macierzystych pochodzących ze szpiku kostnego w celu umożliwienia inżynierii komórkowej w połączeniu z celowaniem magnetycznym (Wideo) | JoVE Journal

Protokół transferu mikroRNA do dorosłych hematopoetycznych komórek macierzystych pochodzących ze szpiku kostnego w celu umożliwienia inżynierii komórkowej w połączeniu z celowaniem magnetycznym

Przeglądaj więcej filmów