Szybkie Technika Wizualizacja żywo unieruchomionych komórek drożdży
November 9th, 2006
Szybkie techniki wizualizacji coraz unieruchomionych komórek drożdży, tutaj stosowane do świetlówek dziennikarzom w cichej krycia loci HML i HMR
Celem eksperymentu jest możliwość śledzenia populacji dostarczającej sir jedną komórkę pod mikroskopem, tak abym mógł zobaczyć, jak zmieniają się stany epigenetyczne, jak często zmieniają się stany epigenne z każdym, z każdym kolejnym podziałem komórek, weź długą szkiełko nakrywkowe, weź około siedmiu mikrolitrów komórek, Umieść na długim szkiełku nakrywkowym i użyj COM, syntetycznej płytki na media. Weź żyletkę, a następnie naciąć agar. Weź więc blok agaru, podnieś go i umieść na komórkach.
Okej, w przypadku krótkoterminowych eksperymentów do trzech godzin. To samo w sobie jest w porządku. Komórki zostaną unieruchomione do długoterminowych eksperymentów, dodaję płynne podłoże li na wierzch podkładki agarowej, a następnie kładę szklane szkiełko na wierzchu całości.
Media będą nas traktować jak pieczęć między tymi dwoma. Szkiełko ma na celu wyłącznie zapobieganie parowaniu z górnej części bloku agarowego. Tak więc przy takiej konfiguracji blok eggera pozostanie wilgotny, a komórki będą się dzielić do ośmiu, co najmniej do ośmiu godzin.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Przegląd
Ten artykuł przedstawia szybką technikę wizualizowania unieruchomionych komórek drożdży, skupiając się na reporterach fluorescencyjnych w cichych lokusach kojarzenia HML i HMR. Metoda ta pozwala na obserwację zmian stanu epigenetycznego podczas podziału komórki.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Biologia komórki
- Epigenetyka
- Fizjologia mikroorganizmów
Tło
- Rozumienie zmian epigenetycznych w komórkach drożdży jest kluczowe dla poznania zachowania komórkowego.
- Reportery fluorescencyjne mogą efektywnie wizualizować lokusy genetyczne.
- Techniki unieruchomienia są niezbędne do długotrwałej obserwacji pod mikroskopem.
- Drożdże służą jako organizm modelowy do badania procesów genetycznych i epigenetycznych.
Cel badania
- Wizualizacja wzrostu i podziału unieruchomionych komórek drożdży.
- Monitorowanie zmian stanów epigenetycznych podczas podziału komórki.
- Opracowanie metody, która ułatwia przeprowadzanie eksperymentów krótko- i długoterminowych.
Stosowane metody
- Przygotowanie długiego pokrywka ze specyficznym objętością komórek drożdży.
- Wykorzystanie syntetycznych płytek z pożywką do wzrostu komórek.
- Unieruchamianie komórek za pomocą bloków agarowych do obserwacji.
- Zastosowanie pożywki płynnej dla wydłużonych czasów eksperymentu.
Główne wyniki
- Skuteczna wizualizację wzrostu i podziału komórek drożdży.
- Obserwację zmian stanów epigenetycznych w kolejnych podziałach.
- Wykazanie skuteczności techniki unieruchomienia.
- Wgląd w dynamikę zmian epigenetycznych w drożdżach.
Wnioski
- Technika ta zapewnia niezawodną metodę badania zachowania komórek drożdży.
- Reportery fluorescencyjne są skuteczne w monitorowaniu lokusów genetycznych.
- To podejście może zwiększyć zrozumienie regulacji epigenetycznej w komórkach.
