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Medicine

Criação de abdominais aderências em Ratos

Published: August 27, 2016 doi: 10.3791/54450

Introduction

adesões abdominais são uma forma de tecido cicatricial que se formam no abdómen em resposta à inflamação, tipicamente, após a cirurgia ou a infecção intra-abdominal. As aderências são uma das principais causas de dor abdominal crônica e infertilidade, e são a causa mais comum de obstrução do intestino delgado 1. A presença de aderências torna a executar uma segunda operação abdominal mais difícil e aumenta a probabilidade de complicações 2.

Apesar de anos de investigação, os mecanismos subjacentes à formação de aderências permanecem pouco compreendidos. Sabe-se que uma lesão inicial à superfície peritoneal provoca uma exsudação de fluido rica em fibrina, o qual forma um coágulo que se liga as superfícies do intestino e a parede abdominal juntamente 3. Mais tarde, os fibroblastos e outras células migram para o espaço adesiva e secretar tecido conjuntivo 4. Ao longo de meses ou anos a adesão amadurece através do desenvolvimento de vasos sanguíneos e nervos

Vários produtos comerciais existentes que foram concebidos para reduzir a formação de adesões após cirurgia abdominal (por exemplo, Seprafilm). Todos estes produtos actuam como barreiras mecânicas e parar a formação de aderência, impedindo o contacto físico entre alças intestinais e a parede abdominal 6,7. Apesar das evidências de um estudo controlado que uma barreira de adesão cirúrgica reduz a formação de aderências 8, muitos cirurgiões anecdotally foram decepcionado com a eficácia dos produtos barreira mecânica.

Actualmente não há terapias anti-adesão à base de drogas, o qual reflecte o facto de que os processos precisos envolvidos na formação de aderências são mal compreendidos. O desenvolvimento de uma terapia que visa especificamente agentes celulares e moleculares envolvidas na formação de aderências exigirá uma melhor compreensão dos eventos que estão envolvidas na formação da adesão. vários gruposs identificaram vias moleculares que podem ser importantes para a formação de aderências 9-11. Os modelos animais proporcionam um meio ambiente excelente para o estudo da formação de aderências. Muitos estudos foram publicados descrevendo a criação cirúrgica de adesão em vários animais, em particular o rato e ratinho 6,12-14. Dada a nossa experiência com o estudo fibrose no mouse e a ampla disponibilidade de ratinhos transgénicos e anticorpos baseado no mouse, escolhemos o rato como modelo para o estudo de aderências. Relata-se a técnica que desenvolvemos para criar reprodutível e confiável aderências abdominais no rato.

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Protocol

O protocolo a seguir foi aprovado pelo Comitê Animal Care Institucional e Use da Universidade de Stanford (IACUC) e está em conformidade com todas as normas éticas institucionais sobre o uso de animais de pesquisa.

1. Criação de abdominais aderências

  1. Inicie o rato na dieta de ração de antibiótico, uma semana antes do procedimento.
  2. Autoclave os instrumentos cirúrgicos e pré-aquecer a solução de irrigação salina.
  3. Anestesiar o mouse usando 2% de isoflurano inalado.
  4. Usando uma máquina de cortar cabelo, seguido por uma aplicação rápida (5-10 segundos) de agente depilatório, remover o cabelo de a maioria da superfície do abdómen. Cuidadosamente remover o agente depilatório esfregando suavemente com uma gaze molhada e, opcionalmente, por molhando cuidadosamente a metade inferior do rato em água quente. Seque bem a animal.
  5. Coloque o focinho do animal para o cone do nariz anestésico. Durante toda a cirurgia, acompanhar atentamente a rtaxa espiratory do animal e titula-se a taxa de fluxo do anestésico, conforme necessário.
  6. Usar um dispositivo de aquecimento, tal como uma almofada de aquecimento ou uma lâmpada de aquecimento, para evitar a hipotermia.
  7. Antes de preparar o abdómen, garantir o mouse com tiras de fita colocadas acima e abaixo do abdômen para impedir o mouse de deslocamento durante a cirurgia. Desinfectar o abdômen com betadine, então siga com etanol 70%. Incluem a maior área possível na preparação, incluindo o cabelo nas bordas da área rapada. Coloque uma cortina estéril sobre o mouse. (Figura 1)
  8. Injectar por via subcutânea 0,1 mg / kg de buprenorfina, ou 3 ug para um ratinho de 30 g.
  9. Fazer a incisão na pele.
    1. Começando na linha média abdominal inferior, segure a pele com uma pinça e fazer um corte vertical rasa na pele usando uma tesoura afiada.
    2. Realizar o corte superiormente ao xifóide com a tesoura. Tome cuidado para entrar apenas a pele.
  10. À medida que a musculatura abdominal é now visível cobrindo as vísceras, segure a linha média da musculatura com uma pinça e cuidadosamente fazer um pequeno corte nele usando uma tesoura afiada. Certifique-se de não cortar acidentalmente em um órgão abdominal.
  11. Depois de entrar no espaço peritoneal com um pequeno corte e vendo a camada muscular afastar os órgãos abdominais, estender o corte superior e inferiormente, inserindo a tesoura na abertura e cuidadosamente corte em ambas as direções. Estender a incisão do xifóide superiormente acima da bexiga inferiormente. (Figura 2)
  12. Agora que os intestinos são expostos, localizar o ceco e suavemente exteriorização. Evitar agarrar o ceco com pinças dentadas ou afiadas. Em vez disso use uma pinça atraumática, como um Adson forceps serrilhadas.
  13. Raspe o ceco com uma lixa.
    1. Suavemente raspe toda a superfície de ambos os lados do ceco com lixa de grão 100 para 30 - 60 segundos até que a superfície torna-se brilhante e appea menos petéquiasR na superfície. Se o cirurgião é destro, que ajuda a orientar o ceco com a ponta virada para a direita e armar o ceco sobre o dedo indicador esquerdo do cirurgião. (Figura 3)
    2. Realizar a lixar suavemente, uma vez que é fácil de fazer com que acidentalmente uma perfuração da parede cecal fina. Uma pequena quantidade de arenosidade deve ser sentida como a lixa é movido ao longo da superfície do ceco. Se a lixa é sentida repetidamente travamento no ceco, isso irá provavelmente provocar um rasgo na parede cecal. Observe com cuidado para garantir que as partículas de lixa não desalojar e permanecer no abdómen, pois isso pode causar reação de corpo estranho excessiva.
    3. Se um rasgo na parede cecal ocorre, encerrar o procedimento e eutanásia do animal.
    4. Se um vaso sanguíneo cecal é cortado pela lixa e causa sangramento, mantenha a pressão por até dois minutos com gaze. No entanto, se o sangramento persistir após esse tempo, coloque uma figura de oito 7-0 monofilamento de sutura em torno doponto de sangramento. Isto irá parar o sangramento de forma fiável em quase todos os casos. Tome cuidado para não incorporar uma grande quantidade de parede cecal para a sutura, já que esta corre o risco de provocar necrose da parte envolvida da parede.
  14. Ferir a parede lateral abdominal direita.
    1. Use uma tira de lixa para lixar a superfície peritoneal do músculo da parede lateral abdominal direita. Seja mais agressivo com o lixamento aqui do que no ceco e continuar até que toda a superfície da parede lateral abdominal direita parece agredido. Evitar lixar tão difícil que a pele é visível através de aberturas na camada muscular. (Figura 4)
    2. Usando um motorista de agulha Castro-Viejo, coloque entre dois e quatro figura de oito 4-0 pontos de seda para a camada muscular da parede lateral abdominal direita. Deixar as caudas de cerca de 5 mm de comprimento. Tome cuidado para não pegar acidentalmente parede do intestino para a sutura. (Figura 5)
  15. Usando uma seringa de 10 ml cheia wom aquecido salina, irrigar o intestino várias vezes. Dirigir a corrente de soro fisiológico na cavidade abdominal para irrigar o interior bem. Se a superfície inferior do mouse torna-se encharcado, mova o mouse sobre ou substituir a superfície, a fim de evitar a hipotermia.
  16. Use uma gaze estéril colocado sobre a incisão para absorver o excesso de irrigação.
  17. Aqui uma pitada de amido e aspergi-lo sobre a superfície da parede lateral abdominal direita e para ambos os lados do ceco. (Figura 6)
  18. Certifique-se de que não há sangramento ativo. Se não é, utilizar uma esponja de gaze para aplicar pressão directamente sobre o ponto de sangramento até parar. Se o sangramento não parar imediatamente, coloque uma sutura hemostática como descrito acima.
  19. Usando a extremidade cega da pinça e um dedo, suavemente empurrar o intestino de volta para a cavidade abdominal. Posicionar o ceco ao lado das suturas na parede lateral abdominal direita, a fim de maximizar a formação de aderências.
  20. Cperder a incisão abdominal.
    1. Usando 6-0 sutura entrelaçada absorvível, colocar um ponto corrido para a camada muscular na parte superior da incisão.
    2. Executar a sutura para baixo em direcção ao fundo da incisão, reunindo a camada muscular. Viajar de cerca de 3 mm e tomar picadas de 3 mm a cada novo ponto. Tome cuidado para não tomar acidentalmente um pedaço de intestino ao colocar suturas.
    3. Na parte inferior da incisão, deixou um laço de sutura a partir da mordida anterior e utilizar este instrumento para atar o fio de sutura. Corte a sutura deixando 5 mm caudas.
    4. Repita os três passos anteriores com 6-0 nylon monofilamento de sutura para fechar a pele.
  21. Administrar um 20 ml / kg de solução salina de bolus subcutâneo (cerca de 0,5 ml para um rato de 30 g).
  22. Usando uma gaze seca, secar completamente todo o animal, como a pele dorsal tende a ficar molhada durante a irrigação.
  23. Vagamente embrulhar um adesivo curativo em torno do abdômen para cobrir a incisão. Tome cuidado para não restringir a umAs pernas de nimal ou mecânica de respiração com o curativo.
  24. acompanhar atentamente o animal como ele se recupera da anestesia. Administrar buprenorfina cada 12 horas durante 2-3 dias após o procedimento para controle da dor.

2. A colheita adesão tecidual

  1. Espere um mínimo de sete dias após a cirurgia inicial. Mais uma vez, autoclave instrumentos cirúrgicos e anestesiar o rato com isoflurano.
  2. Esterilizar o abdômen com betadine seguido por 70% de etanol. Raspar e depilar cabelo adicional a partir do lado direito do abdómen de modo a que a amostra de adesão contendo pele não irá ser coberto no cabelo, o que torna mais difícil a histologia.
  3. Use uma incisão paramediana esquerda, desde intestino é muitas vezes preso à incisão inicial. Começando na extremidade inferior do abdómen, cerca de 5 mm para a esquerda do fundo da incisão original, compreender a pele com pinças dentadas pequenas e corte na pele, com uma tesoura afiada. Estender este corte superior,ly à caixa torácica. (Figura 7)
  4. Com uma tesoura, para cortar a camada muscular e depois de entrar na cavidade peritoneal, alargar o corte no topo e no fundo da incisão. Haverá tecido adesivo causando o ceco e no intestino delgado para aderir à parede lateral direita do abdómen e, eventualmente, também para a incisão inicial. (Figura 8)
  5. Usando as tesouras e a partir da borda da incisão, acima do nível do ceco, iniciar o corte na parede abdominal em círculo em torno da área onde o intestino é aderente.
  6. Alternando acima e abaixo do nível do ceco, reduzir gradualmente a toda a volta a adesão e completar o círculo, dando origem a uma "ilha" da pele e aderente parede abdominal para o intestino. (Figura 9)
  7. Novamente usando a tesoura, cortado no intestino e separar a parte aderente a partir do restante do intestino, obtendo-se uma sanduíche de tecido que consiste em pele e parede abdominalde um lado, do intestino, do outro lado, e o tecido adesivo que liga os dois no meio. (Figura 10)
  8. Opcionalmente, utilizar tesouras de pontas para separar nitidamente da pele a partir do músculo da parede abdominal. Para a histologia considerar deixar a pele em anexo, mas para a digestão e isolamento de células a pele pode ser removido. Se o tecido vai ser utilizado para a histologia, certifique-se para remover o material de sutura, tanto quanto possível, sem perturbar excessivamente a interface adesiva. Para a digestão e o isolamento de células é aceitável para deixar as suturas no lugar, desde que o tecido digerido é filtrado.
  9. Após excisão de tecido de adesão, eutanásia do mouse usando um método humano aprovado pelo seu comitê de uso de animais institucional.

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Representative Results

Aos sete dias após a cirurgia, o ceco e, possivelmente, cólon ascendente, fígado e alças de intestino delgado deve ser aderente à parede abdominal do lado direito. (Figura 8) tecido excisado pode ser embebida e seccionada e irá produzir excelentes preparações histológicas. (Figura 11, 12)

Quando o processo é realizado adequadamente, 100% dos murganhos deveria ter aderências substanciais em sete dias. A mortalidade deve ser inferior a 5%.

figura 1
Figura 1: Preparação para Cirurgia (a) O animal foi fixado com fita e do abdómen preparado com betadine (b) O betadine foi limpa com um algodão embebido em álcool e uma cortina estéril foi colocado...om / files / ftp_upload / 54450 / 54450fig1large.jpg "target =" _ blank "> Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 2
Figura 2:.. Incisão A incisão deve se estender a partir do nível da bexiga para o xifóide Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 3
Figura 3:. Abrasão do ceco (a) Draping o ceco sobre o dedo indicador da mão esquerda com a ponta voltada para a direita permite que a base do ceco para ser estabilizada pelo polegar esquerdo (b) um nível adequado de lixar sai da. ceco com uma superfície áspera que é menos brilhante do que antes, e com vários pontos petequiais de sangramento. Cuidado extra deve ser tomado ao lixar perto do lado mesentérica, como os vasos aqui vai sangrar o mais rapidamente. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 4
Figura 4:. Abrasão da parede abdominal As vísceras são deixadas de lado ea superfície peritoneal da parede muscular é lixada até que ele apareça áspero. O vaso sanguíneo visto logo acima da lixa na parede abdominal é frequente, mas não vai sangrar de forma substancial. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

1 "> Figura 5
Figura 5:.. Colocação da sutura Figura de oito A seda de sutura figura de oito colocado na parede do músculo, antes de ser amarrado para baixo por favor, clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 6
Figura 6:. Aplicação de amido de uma leve camada de amido é aspergido através da parede lateral do intestino abdominal e. Dois figura de oito suturas são vistos na parede do músculo. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 7
Figura 7: Incisão para a segunda cirurgia (a) A incisão é iniciado logo à esquerda da incisão inicial (b) A nova incisão deve se estender a partir do nível da bexiga para a caixa torácica... Por favor clique aqui para ver uma versão maior esta figura.

Figura 8
Figura 8:. A adesão laçadas de intestino delgado (SB) são aderentes à parede lateral direita e uma à outra. A incisão inicial da linha média, agora curado, é visto (Inc). Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 9
trong> Figura 9: Excisão adesão do tecido. (a) e (b) Uma "ilha" de pele e aderente parede abdominal para o intestino subjacente é liberado pelo corte em um círculo completo em volta da área aderente. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 10
Figura 10:. O espécime de corte através do intestino irá produzir uma sanduíche de tecido intestinal com o de um lado (A) e a pele do outro lado (b). Os pedaços de sutura visível deve ser removido se a amostra está a ser utilizado para histologia. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

jove_content "fo: manter-together.within-page =" 1 "> Figura 11
Figura 11:. Histologia A hematoxilina e eosina (H & E) a secção de uma adesão coradas em sete dias após a cirurgia e que mostra a pele da parede abdominal (inferior) ligado por meio da interface adesiva ao ceco (topo). Neste ponto do tempo no início do ceco é provável aderido à parede abdominal principalmente através de fibrina e outras moléculas, e tecido cicatricial substancial ainda não foi formada. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figura 12
Figura 12: Geração de imunofluorescência Uma seção de adesão aos sete dias após a cirurgia imunofluorescência corados para ac muscular α-suave.estanho, mostrando verdadeira coloração dos folículos pilosos da pele (à esquerda) e parede muscular do ceco (meio) e coloração não específica da superfície luminal cecal (direita). Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

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Discussion

Os passos críticos neste processo são: abrasão completamente o ceco sem causar perfuração, colocando-se suturas na parede lateral abdominal, e aplicar a quantidade certa de amido. Apenas se aplicam lixa ao ceco, ou a uma pequena porção específica do intestino. Amplo uso de lixa em grandes quantidades de intestino delgado tende a causar íleo significativa. Tome cuidado para raspar o ceco com força suficiente para que a superfície torna-se áspera, mas não tanto que as lágrimas de parede. Encontrar esse equilíbrio pode levar algum tempo. Sempre manuseie o intestino com cuidado e evitar o uso de uma pinça afiada ou dentadas para manipular intestinal. É fácil de causar hemorragia acidentalmente, agarrando o mesentério do intestino delgado com uma pinça ou puxando o intestino com demasiada força.

Se ocorrer um rasgo na parede cecal, o procedimento deve ser encerrado e o animal sacrificados. Na nossa experiência, cecal lacrimais resulta na morte do animal após alguns dias, mesmo que o rasgamento é repaIred bem. Além disso, o desgaste da parede cecal irá causar o derrame de fezes que vai afectar a resposta inflamatória de uma forma imprevisível.

A hemostasia deve estar completa no final do procedimento. Alguns vasos sangrantes será re-aberto e começar a sangrar depois de aparecer ter parado. Em caso de dúvida, coloque um fio absorvível monofilamento figura de oito em torno do ponto de sangramento. Este tipo de fio de sutura é preferível seda trançada ou sutura absorvível porque pode ser removido se o tecido com uma resistência mínima. No entanto, descobrimos que seda trançada ou sutura absorvível é mais eficaz na parede lateral para induzir aderências abdominais, como monofilamentos é menos inflamatória.

Aplicação de amido no final do procedimento ajuda a aumentar a formação de aderências, mas descobriu-se que uma quantidade excessiva de amido irá provocar uma reacção inflamatória que causa a morte. O amido deve ser aspergido sobre lightly. Não deve ser tão grande que forma uma camada sólida.

Quando começam a aprender este procedimento, é comum a perder vários ratos. Em nossa experiência, as causas mais comuns de morte são desidratação devido ao íleo causada por abrasão excessivamente vigoroso do intestino, e sepsis devido à perfuração intestinal. A morte provocada por hemorragias podem ocorrer se a hemostase completa não é conseguida no final da cirurgia.

Se a formação de aderências é inadequada, considere o uso de abrasão mais agressiva do ceco e parede lateral direita, deixando mais amido, ou colocar mais suturas na parede lateral abdominal. Em nossa experiência, à espera de menos de uma semana antes de reabrir os resultados abdômen em menos de formação de aderência adequada. Por outro lado, se a taxa de mortalidade de ratinhos após a cirurgia é alta, considerar o uso de abrasão menos agressivo do ceco, inspeccionar mais de perto para hemostasia, e aplicando menos amido. Também é importante monitorar cuidadosamentea taxa respiratória do mouse durante a cirurgia. Uma vez que o cirurgião ganhos experiência com este procedimento, a mortalidade deve ser inferior a 10%.

Esta técnica foi concebida principalmente para formar aderências entre o ceco e a parede lateral abdominal direita. As aderências também, muitas vezes, formar-se entre intestino delgado, o fígado, e a incisão na linha média. Usando esta técnica normalmente não irá causar aderências no lado esquerdo do abdômen. Uma limitação desta técnica é que as adesões entre intestino e a parede abdominal são mais propensos a formar de aderências entre alças intestinais. Além disso, não é provável que resulte de uma forma totalmente congelado abdómen cheio de tecido adesivo, que é frequentemente observada em seres humanos que tenham tido várias cirurgias.

Como discutido na introdução, muitas técnicas para a produção de aderências abdominais em ratos e outras espécies, particularmente rato, foram descritos na literatura 6,12-14. Há muito menos Protoco publicado LS para a criação de aderências em ratinhos. Especula-se que porque a criação de aderências em ratos é mais difícil do que em ratos, a maioria dos investigadores optou por desenvolver a sua técnica no rato. No entanto, devido à maior disponibilidade de ratinhos transgénicos e anticorpos anti-ratinho, acreditamos que é importante ter um modelo robusto para a criação de adesão em murganhos, apesar da maior dificuldade técnica. Nós desenvolvemos este protocolo depois de tentar muitos dos protocolos de ratos publicados. Verificou-se que os métodos para a criação de aderências no rato, como a utilização de electrocauterização no ceco, muitas vezes causar murganhos a morrer. Nós não estavam satisfeitos com a densidade de aderências produzidas por técnicas que utilizam uma única intervenção, como a colocação de parede lateral botões isquêmicos sozinho ou somente abrasão do ceco. A técnica que apresentamos aqui representa uma combinação de intervenções que encontramos, por tentativa e erro, para produzir aderências de forma consistente, minimizando mortalidade.

conteúdo "> Porque esta técnica consistentemente faz com que o tecido adesivo para formar entre o ceco e a parede lateral, acreditamos que é ideal para intervenções de teste destinado a reduzir a formação de aderência. Além disso esta técnica pode ser utilizada para explorar as vias moleculares e tipos de células que são envolvido na formação de aderências. O tecido de adesão pode ser facilmente excisado e preparados para exame histológico, os rendimentos e excelentes imagens histológicas (figuras 11, 12).

Alguns investigadores podem desejar um modelo em que as adesões forma menos do que 100% do tempo. Omitindo a aplicação de amido irá reduzir a taxa de aderência de cerca de 80%. A diminuição do número de suturas de seda colocados na parede lateral do abdominal direita irá reduzir ainda mais a taxa de adesão.

Na nossa experiência, dia sete após a cirurgia é o primeiro ponto de tempo em que o intestino é consistentemente aderente à parede abdominal. No entanto, outros pontos de tempo pode ser mais relevante, dependendosobre o foco do projecto. Por exemplo, os investigadores interessados ​​na migração de neutrófilos e macrófagos para o espaço de adesão pode quer para a colheita de tecido nos primeiros cinco dias após a cirurgia. Por outro lado, a deposição de colagénio por fibroblastos tem lugar durante semanas após a lesão inicial, e por isso será mais apropriada para examinar tecido em pontos de tempo espaçados durante várias semanas após a cirurgia.

lupas cirúrgicas são muito úteis para a ampliação do campo cirúrgico durante a realização deste procedimento. Um microscópio operatório também pode ser usado, mas limita a capacidade do cirurgião para inspeccionar o campo operatório a partir de ângulos diferentes. O procedimento também pode ser feito sem ampliação de todo.

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Disclosures

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes.

Acknowledgments

MDL foi apoiada pela American College of Surgeons (ACS) Scholarship Residente Research. MSH foi apoiado pelo Instituto da Califórnia de Medicina Regenerativa (CIRM) bolsa de formação Fellow Clínica TG2-01159. MSH, HPL, e MTL foram apoiadas pela Sociedade Americana de Cirurgiões Maxilo (ASMS) / Maxilo Cirurgiões Foundation (MSF) Research Award Grant. HPL foi apoiado pelo NIH conceder R01 GM087609 e um presente de Ingrid Lai e Bill Shu em honra de Anthony Shu. HPL e MTL foram apoiadas pelo Laboratório Hagey for Pediatric Regenerative Medicine e da Fundação Oak. MTL foi apoiado pelo Fundo / Olivier Gunn.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" Fisher Scientific 14-206-62
Polylined Sterile Field, 18" x 24" Busse Hospital Disposables 696 Cut a rectangular hole of the appropriate size
Isothesia isoflurane Henry Schein  050033
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" Fisher Scientific 22-415-469
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube Dechra Veterinary Products NDC 17033-211-38
Nair depilatory cream Church & Dwight Co. 22339-05
Buprenex buprenorphine  0.3 mg/ml Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. NDC 12496-0757-5
1 cc insulin syringe, 27 G Becton Dickinson 329412
Povidone Iodine Prep Solution Medline MDS093944H
Webcol alcohol prep swabs Covidien 6818
General-Purpose Labarotory Labeling tape VWR 89097-912
BioGel PI surgical gloves Mölnlycke Health Care ALA42675Z
Micro Forceps with teeth Roboz RS-5150
Fine scissors- sharp Fine Science Tools 14060-09
Straight serrated forceps Fine Science Tools 11050-10
Castro-Viejo needle driver Fine Science Tools 12565-14
100 grit 1/4 sheet sandpaper ACE Hardware 1010446 Cut into strips
4-0 silk suture, 30", SH needle Ethicon K831
7-0 PDS II absorbable monofilament suture, 30", BV-1 needle Ethicon Z135 Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures.
Rice starch MP Biomedicals 102955
0.9% Sodium Chloride Irrigation Baxter BHL2F7121 Warm to 37 °C prior to use
10 ml syringe Becton Dickinson 309604
6-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", RB-1 taper needle Ethicon J212H
6-0 Ethilon nylon monofilament  suture, 18", P-3 needle,  Ethicon 1698G
Tegaderm Transparent Film Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm 3M 1624W Cut in half lengthwise

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Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, More

Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, T., Barnes, L. A., Cheung, A. T. M., Malhotra, S., Lorenz, H. P., Longaker, M. T. Creation of Abdominal Adhesions in Mice. J. Vis. Exp. (114), e54450, doi:10.3791/54450 (2016).

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