Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Skapande av buken adhesioner hos möss

Published: August 27, 2016 doi: 10.3791/54450

Introduction

Buken sammanväxningar är en form av ärrvävnad som bildas i magen som svar på inflammation, vanligtvis efter operation eller intraabdominal infektion. Sammanväxningar är en viktig orsak till kronisk buksmärta och infertilitet, och är den vanligaste orsaken till Tunntarmsobstruktioner en. Närvaron av adhesioner gör att utföra en andra bukoperation svårare och ökar sannolikheten för komplikationer 2.

Trots år av forskning, förblir de mekanismer som ligger bakom bildandet av adhesioner dåligt kända. Det är känt att en initial skada på den peritoneala ytan orsakar en utsvettning av fibrin-rik vätska, som sedan bildar en propp som binder ytorna av tarmen och bukväggen tillsammans 3. Senare, fibroblaster och andra celler migrerar in i klistret utrymmet och utsöndrar bindväv 4. Under månader till år vidhäftningen mognar genom att utveckla blodkärl och nerver

Flera kommersiella produkter finns som är utformade för att minska bildningen av sammanväxningar efter bukkirurgi (t.ex. Seprafilm). Alla dessa produkter fungerar som mekaniska hinder och stoppa adhesionsbildning genom att förhindra fysisk kontakt mellan öglor av tarmen och bukväggen 6,7. Trots bevis från en kontrollerad studie som en kirurgisk adhesionsspärren minskar bildandet av sammanväxningar 8, anekdot många kirurger har varit besviken med effektiviteten av mekaniska barriärprodukter.

För närvarande finns det inga läkemedelsbaserade anti-vidhäftnings terapier, vilket återspeglar det faktum att de exakta processer i ärrbildning är dåligt förstådd. Utveckla en behandling som specifikt riktar cellulära eller molekylära personer som deltar i bildandet av sammanväxningar kommer att kräva en bättre förståelse av de händelser som är inblandade i bildandet av vidhäftningen. flera grupps har identifierat molekylära vägar som kan vara viktiga för adherensbildning 9-11. Djurmodeller ger en utmärkt miljö för att studera bildningen av sammanväxningar. Många studier har publicerats som beskriver den kirurgiska skapandet av vidhäftning i flera djur, särskilt hos råtta och mus 6,12-14. Med tanke på vår erfarenhet med att studera fibros i musen och stora tillgången på transgena möss och mus-baserade antikroppar, valde vi musen som vår modell för att studera sammanväxningar. Häri rapporterar vi den teknik som vi har utvecklat för att reproducerbart och tillförlitligt skapa buken sammanväxningar i musen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Följande protokoll har godkänts av Stanford University Institutional Animal Care och användning kommittén (IACUC) och uppfyller alla institutionella etiska riktlinjer för användning av försöksdjur.

1. Skapande av buken Sammanväxningar

  1. Börja med musen på antibiotika chow diet en vecka före ingreppet.
  2. Autoklav kirurgiska instrument och pre-varm salt bevattning lösning.
  3. Söva musen med 2% inhalerad isofluran.
  4. Med användning av en hårklippare följt av en snabb applikation (5-10 sek) av hårborttagningsmedel, ta bort hår från huvuddelen av ytan av buken. Grundligt bort hårborttagningsmedel genom att försiktigt torka med våt gasväv och, eventuellt, genom att noggrant dunking den nedre halvan av musen till varmt vatten. Torka djuret.
  5. Placera djurets nos in i anestetisk noskonen. Under hela operationen, noga övervaka respiratory hastigheten hos djuret och titrera anestesiflödeshastigheten som behövs.
  6. Använda en värmande enhet, till exempel en värmedyna eller en värmande lampa, för att förhindra hypotermi.
  7. Före prepping buken, säkra musen med tejpremsor placerade ovanför och under magen för att förhindra att musen inte flyttar sig under kirurgi. Desinficera buken med Betadine, sedan med 70% etanol. Inkludera så mycket område som möjligt i prep, inklusive håret på kanterna av det rakade området. Placera en steril duk över musen. (Figur 1)
  8. Subkutant injicera 0,1 mg / kg buprenorfin, eller 3 | ig för en 30 g mus.
  9. Gör snitt huden.
    1. Från och med den nedre delen av buken mittlinjen, ta tag i huden med pincett och göra ett grunt vertikalt snitt i huden med hjälp av vass sax.
    2. Bär snittet mycket fint till xyphoid med saxen. Var noga med att ange endast huden.
  10. Såsom den abdominala muskulaturen är now synlig täcker inälvorna, ta tag i mittlinjen av muskulaturen med pincett och mycket noggrant göra ett litet snitt i den med vass sax. Se till att inte råkar skära i buken organ.
  11. När du har angett det peritoneala utrymmet med ett litet snitt och ser muskelskiktet dras bort från bukorganen förlänga snittet mycket fint och inferiorly genom att sätta saxen i öppningen och noggrant skära i båda riktningarna. Förläng snittet från xyphoid superiorly ovan blåsan inferiorly. (Figur 2)
  12. Nu när tarmarna är utsatta, lokalisera blindtarmen och försiktigt exteriorize det. Undvik att ta tag i blindtarmen med tandade eller vassa pincett. Använd istället en atraumatisk pincett som en Adson sågtandade pincett.
  13. Skava på blindtarmen med sandpapper.
    1. skava på hela ytan av båda sidor av cekum med 100 grit sandpapper för 30 försiktigt - 60 sek tills ytan blir mindre glansigt och petekier appear på ytan. Om kirurgen är högerhänt, hjälper det att orientera blindtarmen med spetsen vänd åt höger och drapera blindtarmen över kirurgens vänster pekfinger. (Figur 3)
    2. Utföra slipningen försiktigt, eftersom det är lätt att oavsiktligt orsaka en perforering av den tunna cecal väggen. En liten mängd av grynighet skall kännas som sandpappret förflyttas längs cecal ytan. Om sandpapper känns upprepade gånger att fånga på blindtarmen, kommer detta sannolikt leda till en tår i cecal väggen. Titta noga för att säkerställa att partiklar av sandpapper inte loss och stanna kvar i magen, eftersom det kan orsaka överdriven främmande kroppsreaktion.
    3. Om en reva i cecal väggen inträffar avsluta förfarandet och avliva djuret.
    4. Om en cecal blodkärl skjuvas av sandpapper och orsakar blödningar, hålla tryck i upp till två minuter med gasbinda. Men om blödningen kvarstår efter denna tid, placera en siffra-of-åtta 7-0 monofilamentsutur runtpunkt för blödning. Detta kommer på ett tillförlitligt sätt stoppa blödningen i nästan samtliga fall. Se till att inte införliva en stor mängd cecal vägg i suturen, eftersom detta riskerar att orsaka nekros av de inblandade delen av väggen.
  14. Skada högra delen av buken sidoväggen.
    1. Använda en remsa av sandpapper för att slipa den peritoneala ytan av muskeln i högra delen av buken sidoväggen. Vara mer aggressiva med slip här än på blindtarmen och fortsätta tills hela ytan av den högra delen av buken sidoväggen verkar misshandlade. Undvik slipning så hårt att huden blir synlig genom öppningar i muskelskiktet. (Figur 4)
    2. Med hjälp av en Castro-Viejo nål förare, mellan två och fyra siffra-of-åtta 4-0 siden stygn i muskelskiktet i högra delen av buken sidoväggen. Lämna svansarna omkring 5 mm lång. Se till att inte av misstag fånga tarmväggen in i suturen. (Figur 5)
  15. Med hjälp av en 10 ml spruta fylld wte värmde saltlösning, vattna tarmarna flera gånger. Rikta strålen med saltlösning i bukhålan för att bevattna det inre samt. Om ytan under musen blir blöt, flytta musen över eller byta ytan, för att undvika hypotermi.
  16. Använd en steril gasväv placeras över snittet för att suga upp överskott bevattning.
  17. Ta en nypa stärkelse och stänka på ytan av den högra delen av buken sidoväggen och på båda sidor av blindtarmen. (Figur 6)
  18. Se till att det inte finns någon aktiv blödning. Om det finns, använd en gasbinda svamp att utöva påtryckningar direkt på platsen för blödning tills det tar stopp. Om blödningen inte slutar lätt, placera en hemostatisk sutur som beskrivits ovan.
  19. Använda den trubbiga änden av tången och ett finger, tryck försiktigt tarmarna tillbaka in i bukhålan. Positionera cekum bredvid suturerna i den högra delen av buken sidoväggen för att maximera vidhäftningen bildning.
  20. Cförlorar buksnitt.
    1. Med användning av 6-0 absorberbar flätad sutur, placera en körs stitch in i muskelskiktet på toppen av snittet.
    2. Köra suturen ned mot botten av snittet, som samlar den muskulära skiktet. Res med ca 3 mm och ta 3 mm bites med varje ny stygn. Se till att inte av misstag ta en bit av tarmen medan placera suturer.
    3. Vid botten av snittet, att lämna en suturögla från föregående bit och använda detta för att instrumentet binda sutur. Skär suturen lämnar 5 mm svansar.
    4. Upprepa ovanstående tre steg med 6-0 nylon monofilament sutur för att stänga huden.
  21. Administrera en 20 ml / kg subkutan saltlösning bolus (ca 0,5 ml för en 30 g mus).
  22. Med hjälp av en torr gasväv, torka hela djuret, som rygg päls tenderar att bli blöt under bevattning.
  23. Löst svepa ett bindemedel förband runt buken för att täcka snittet. Var noga med att inte begränsa enNimal ben eller andningsmekanik med förbandet.
  24. Noga övervaka djuret som återhämtar sig från anestesi. Administrera buprenorfin varje 12 timmar under 2-3 dagar efter ingreppet för smärtkontroll.

2. Skörde Vidhäftning Tissue

  1. Vänta minst sju dagar efter den första operationen. Återigen, autoklaveras kirurgiska instrument och söva musen med isofluran.
  2. Sterilisera buken med Betadine följt av 70% etanol. Raka och Vaxning varar ytterligare hår från den högra sidan av buken så att vidhäftnings provet som innehåller hud inte kommer att täckas i håret, vilket gör histologi svårare.
  3. Använd vänster para snitt, eftersom tarm ofta fastnat till den ursprungliga snittet. Med början vid den nedre änden av buken, cirka 5 mm till vänster om botten av den ursprungliga snittet, ta tag i huden med små tandade pincett och skär in i huden med vass sax. Förlänga denna klippa överlägsenly till bröstkorgen. (Figur 7)
  4. Med sax, skära in i muskellagret och efter att det peritoneala utrymmet, utöka snittet till toppen och botten av snittet. Det kommer att finnas vidhäftande vävnad orsakar cekum och tunntarm för att ansluta sig till den högra sidoväggen av buken och eventuellt även till den ursprungliga snittet. (Figur 8)
  5. Använda saxen och starta på kanten av snittet, ovanför nivån för blindtarmen, börja skära i bukväggen i en cirkel runt det område där tarmen är vidhäftande.
  6. Alternerande över och under nivån för blindtarmen, gradvis skära hela vägen runt adhesionen och fullborda cirkeln, vilket gav en "ö" av hud och bukväggen vidhäftande till tarmen. (Figur 9)
  7. Återigen med användning av saxen, skuren i tarmen och separera vidhäftande delen från resten av tarmen, vilket gav en sandwich av vävnad som består av hud och bukväggenpå en sida, tarm på den andra sidan, och adhesiv vävnad som förbinder två däremellan. (Figur 10)
  8. Du kan också använda en spetsig sax för att kraftigt separera huden från bukväggen muskler. För histologi överväga att lämna huden fäst, men för matsmältning och cellisolering huden kan tas bort. Om vävnaden kommer att användas för histologi, se till att ta bort så mycket suturmaterial som möjligt utan att överdrivet störa adhesivgränsytan. För matsmältningen och cellisolering är det acceptabelt att lämna de suturer på plats så länge som vävnaden digere filtreras.
  9. Efter skära vidhäftning vävnad, euthanize musen med en human metod som godkänts av din Institutional Animal Use Committee.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Vid sju dagar efter operationen, blindtarmen och eventuellt colon ascendens, lever, och slingor av tunntarmen bör vara vidhäftande till den högra delen av buken väggen. (Figur 8) utskurna vävnaden kan bäddas och sektioneras och kommer att ge utmärkta histologiska diabilder. (Fig 11, 12)

När proceduren utförs på rätt sätt, bör 100% av möss har betydande sammanväxningar på sju dagar. Dödligheten bör vara mindre än 5%.

Figur 1
Figur 1: Förberedelse för kirurgi (a) Djuret har säkerställts med tejp och buken förberedd med Betadine (b) Betadine har rensats med en alkoholservett och en steril duk har placerats...om / filer / ftp_upload / 54450 / 54450fig1large.jpg "target =" _ blank "> Klicka här för att se en större version av denna siffra.

figur 2
Figur 2:.. Snitt Snittet bör sträcka sig från nivån på urinblåsan till xyphoid Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figur 3
Figur 3:. Nötning av cekum (a) Drapering cekum över vänstra pekfinger med spetsen pekande åt höger tillåter basen av blindtarmen, som skall stabiliseras av vänster tumme (b) En lämplig nivå av slip lämnar. blindtarmen med en grov yta som är mindre glänsande än tidigare, och med flera petekiala punkter blödning. Extra försiktighet bör iakttas när slipning nära mesenteriska sidan, eftersom fartygen här kommer att blöda mest raskt. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

figur 4
Figur 4:. Nötnings av bukväggen Inälvor sveps undan och peritoneala ytan av muskeln väggen slipas tills det verkar grov. Fartyget blod sett precis ovanför sandpapper i bukväggen ofta påträffas men kommer inte att blöda kraftigt. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

1 "> figur 5
Figur 5:.. Placering av figuren-of-åtta Suture En siden figur av åtta sutur placeras i muskeln väggen, innan de bunden Klicka här för att se en större version av denna siffra.

figur 6
Figur 6:. Tillämpning av stärkelse En ljus lager av stärkelse strös över buken sidoväggen och tarm. Två siffra-of-åtta suturer ses i muskeln väggen. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

figur 7
figur 7: Snitt för andra operation (a) Snittet har precis börjat till vänster om den ursprungliga snitt (b) Den nya snitt bör sträcka sig från nivån på urinblåsan till bröstkorgen... Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figur 8
Figur 8:. Vidhäftningen Slingor av tunntarmen (SB) är vidhäftande till den högra sidoväggen och till varandra. Den ursprungliga mittlinjen snitt, nu läkt, ses (Inc). Klicka här för att se en större version av denna siffra.

figur 9
Trong> Figur 9: skära Adhesion Tissue. (a) och (b) en "ö" av hud och bukväggen vidhäftande till den underliggande tarm befrias genom att skära i en cirkel runt det vidhäftande området. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figur 10
Figur 10:. Preparat skär igenom de tarmen kommer att ge en sandwich av vävnad med tarm på ena sidan (a) och huden på den andra sidan (b). Bitarna av sutur synlig bör tas bort om provet ska användas för histologi. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

jove_content "fo: keep-together.within-page =" 1 "> Figur 11
Figur 11:. Histologi En hematoxylin och eosin (H & E) färgade delen av en vidhäftning på sju dagar efter operationen visar hud och bukväggen (botten) fäst via adhesivgränsytan till blindtarmen (överst). På detta tidiga tidpunkt blindtarmen sannolikt fäst vid bukväggen främst genom fibrin och andra molekyler, och betydande ärrvävnad har ännu inte bildats. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figur 12
Figur 12: Immunofluorescerande Imaging En del av vidhäftning vid sju dagar efter operationen immunofluorescently färgas för α-glatt muskulatur ac.tenn, visar verklig färgning av huden hårsäckar (vänster) och cecal muskelvägg (mitten) och icke-specifik färgning av cecal luminala ytan (höger). Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

De kritiska stegen i den här proceduren är: noggrant slipa blindtarmen utan att orsaka perforering, placera suturer i buken sidovägg, och tillämpa rätt mängd stärkelse. Endast gälla sandpapper för blindtarmen, eller en liten viss del av tarmen. Bred användning av sandpapper på stora mängder av tunntarmen tenderar att orsaka betydande ileus. Vara noga med att slipa cekum med tillräcklig kraft att ytan blir ojämn, men inte så mycket att vägg tårar. Att hitta denna balans kan ta lite tid. Hantera alltid tarmen försiktigt och undvika att använda skarpa eller tandade pincett för att manipulera tarmen. Det är lätt att av misstag orsaka blödningar genom att ta tag i tunntarmen tarmkäxet med pincett eller genom att dra i tarmen alltför kraftfullt.

Om en tår inträffar i cecal väggen, bör förfarandet avslutas och djuret avlivas. I vår erfarenhet, cekala riva resulterar i djurets död efter några dagar, även om revan är repaired väl. Dessutom kommer riva av cecal väggen orsaka spill av avföring som kommer att påverka den inflammatoriska responsen på ett oförutsägbart sätt.

Hemostas måste vara klar i slutet av förfarandet. Vissa blödnings fartyg kommer att öppna och börja blöda efter ser ut att ha stannat. När du är osäker, placera en absorbermonofilament siffra-of-åtta sutur runt punkten för blödning. Denna typ av sutur är att föredra framför silke eller flätad absorberbar sutur, eftersom den kan dras fast vävnaden med minimalt motstånd. Vi har emellertid funnit att silke eller flätad absorberbara suturer är mest effektiv i buken sidoväggen för att inducera sammanväxningar, som monofilament är mindre inflammatorisk.

Applicering av stärkelse vid slutet av det förfarande bidrar till att öka bildningen av sammanväxningar, men vi har upptäckt att en överdriven mängd stärkelse kommer att orsaka en inflammatorisk reaktion som leder till döden. Stärkelsen bör strös på lightly. Det bör inte vara så mycket att det bildar ett fast skikt.

När först lära denna procedur, är det vanligt att förlora flera möss. I vår erfarenhet de vanligaste dödsorsakerna är uttorkning på grund av ileus orsakad av alltför kraftig nötning av tarmen, och sepsis på grund av tarmperforation. Dödsfall som orsakas av blödning kan uppstå om fullständig hemostas inte uppnås i slutet av operationen.

Om adherenser är otillräcklig, överväga att använda mer aggressiv nötning av blindtarmen och högra sidoväggen, vilket ger mer stärkelse, eller placera flera suturer på buken sidoväggen. I vår erfarenhet, väntar på mindre än en vecka innan att återuppta på buken resulterar i mindre än adekvat adhesion formation. Å andra sidan, om dödligheten hos möss efter operationen är hög, överväga att använda mindre aggressiva nötning av blindtarmen, inspektera närmare för hemostas, och tillämpa mindre stärkelse. Det är också viktigt att noga följaandningsfrekvensen av musen under operation. När kirurgen vinster erfarenhet med detta förfarande, bör dödligheten vara mindre än 10%.

Denna teknik är utformad för att i första hand bilda sammanväxningar mellan blindtarmen och högra delen av buken sidoväggen. Adhesioner kommer också ofta bildas mellan tunntarmen, levern, och mittlinjen snitt. Med användning av denna teknik kommer vanligtvis inte att orsaka sammanväxningar på den vänstra sidan av buken. En begränsning med denna teknik är att sammanväxningar mellan tarm och bukväggen är mer benägna att bilda än sammanväxningar mellan slingor av tarmen. Dessutom är det inte sannolikt att resultera i en helt fryst mage full av klister vävnad, som ofta ses hos människor som har haft flera operationer.

Såsom diskuterats i inledningen, många tekniker för framställning av abdominala adhesioner på möss och andra arter, i synnerhet råtta, har beskrivits i litteraturen 6,12-14. Det finns långt färre publicerade protoco ls för att skapa sammanväxningar i möss. Vi spekulerar att eftersom skapandet av sammanväxningar i möss är svårare än i råttor, de flesta forskare valde att utveckla sin teknik i råtta. Men på grund av den större tillgängligheten av transgena möss och anti-mus-antikroppar, vi tror att det är värdefullt att ha en robust modell för vidhäftning skapande i möss, trots den större tekniska svårigheter. Vi utvecklade detta protokoll efter att ha provat många av de publicerade rått protokoll. Vi fann att metoder för att skapa sammanväxningar i råtta, såsom användning av diatermi på blindtarmen, ofta orsakar möss att dö. Vi var inte nöjda med tätheten av sammanväxningar som produceras av tekniker som använder en enda ingripa, som att placera sidovägg ischemiska knappar ensam, eller bara slipning blindtarmen. Tekniken vi presenterar här är en kombination av åtgärder som vi hittade genom trial and error, för att producera sammanväxningar konsekvent samtidigt som man minimerar dödlighet.

innehåll "> Eftersom denna teknik orsakar konsekvent vidhäftande vävnad för att bilda mellan blindtarmen och sidoväggen, vi tror att det är idealiskt för att testa insatser för att minska vidhäftningsbildning. Även denna teknik kan användas för att undersöka de molekylära vägar och celltyper som är involverade i adhesion formation. vidhäftningen vävnad kan lätt skäras och förberedda för histologi, och ger utmärkt histologiska bilder (figur 11, 12).

Vissa forskare kan önskar en modell där sammanväxningar bildar mindre än 100% av tiden. Utelämna tillämpningen av stärkelse kommer att minska vidhäftningshastigheten till ungefär 80%. Minska antalet silkessuturer placeras in i den högra delen av buken sidoväggen kommer att minska vidhäftningen hastigheten ytterligare.

Enligt vår erfarenhet är dag sju efter operation den första tidpunkten där tarmen är genomgående vidhäftande till bukväggen. Dock kan andra tidpunkter vara mer relevant beroendepå fokus för projektet. Till exempel kan forskarna intresserade av migration av neutrofiler och makrofager i vidhäftningsutrymmet vill skörda vävnad under de första fem dagarna efter operationen. Å andra sidan, avsättning av kollagen av fibroblaster sker i veckor efter den initiala skadan, och för detta kommer det att vara mer lämpligt att undersöka vävnad vid tidpunkter åtskilda ut i flera veckor efter operationen.

Kirurgiska luppar är till stor hjälp för förstoring av det kirurgiska området när de utför denna procedur. En operativ mikroskop kan också användas men begränsar kirurgens förmåga att inspektera operationsfältet från olika vinklar. Proceduren kan också göras utan förstoring alls.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Författarna förklarar att de inte har några konkurrerande ekonomiska intressen.

Acknowledgments

CDM stöddes av American College of Surgeons (ACS) Resident forskningsstipendium. MSH stöddes av California Institute för regenerativ medicin (CIRM) Clinical Fellow utbildningsbidrag TG2-01159. MSH, HPL, och MTL stöddes av American Society of Maxillofacial Surgeons (ASMs) / käkkirurger Foundation (MSF) bidrag Award. HPL stöddes av NIH bidrag R01 GM087609 och en gåva från Ingrid Lai och Bill Shu ära Anthony Shu. HPL och MTL stöddes av Hagey Laboratoriet för Pediatric regenerativ medicin och The Oak Foundation. MTL stöddes av Gunn / Olivier Fund.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" Fisher Scientific 14-206-62
Polylined Sterile Field, 18" x 24" Busse Hospital Disposables 696 Cut a rectangular hole of the appropriate size
Isothesia isoflurane Henry Schein  050033
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" Fisher Scientific 22-415-469
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube Dechra Veterinary Products NDC 17033-211-38
Nair depilatory cream Church & Dwight Co. 22339-05
Buprenex buprenorphine  0.3 mg/ml Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. NDC 12496-0757-5
1 cc insulin syringe, 27 G Becton Dickinson 329412
Povidone Iodine Prep Solution Medline MDS093944H
Webcol alcohol prep swabs Covidien 6818
General-Purpose Labarotory Labeling tape VWR 89097-912
BioGel PI surgical gloves Mölnlycke Health Care ALA42675Z
Micro Forceps with teeth Roboz RS-5150
Fine scissors- sharp Fine Science Tools 14060-09
Straight serrated forceps Fine Science Tools 11050-10
Castro-Viejo needle driver Fine Science Tools 12565-14
100 grit 1/4 sheet sandpaper ACE Hardware 1010446 Cut into strips
4-0 silk suture, 30", SH needle Ethicon K831
7-0 PDS II absorbable monofilament suture, 30", BV-1 needle Ethicon Z135 Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures.
Rice starch MP Biomedicals 102955
0.9% Sodium Chloride Irrigation Baxter BHL2F7121 Warm to 37 °C prior to use
10 ml syringe Becton Dickinson 309604
6-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", RB-1 taper needle Ethicon J212H
6-0 Ethilon nylon monofilament  suture, 18", P-3 needle,  Ethicon 1698G
Tegaderm Transparent Film Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm 3M 1624W Cut in half lengthwise

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
  2. Brochhausen, C., et al. Current strategies and future perspectives for intraperitoneal adhesion prevention. J Gastrointest Surg. 16 (6), 1256-1274 (2012).
  3. diZerega, G. S., Campeau, J. D. Peritoneal repair and post-surgical adhesion formation. Hum Reprod Update. 7 (6), 547-555 (2001).
  4. Hellebrekers, B. W., Kooistra, T. Pathogenesis of postoperative adhesion formation. Br J Surg. 98 (11), 1503-1516 (2011).
  5. Herrick, S. E., et al. Human peritoneal adhesions are highly cellular, innervated, and vascularized. J Pathol. 192 (1), 67-72 (2000).
  6. Beyene, R. T., Kavalukas, S. L., Barbul, A. Intra-abdominal adhesions: Anatomy, physiology, pathophysiology, and treatment. Curr Probl Surg. 52 (7), 271-319 (2015).
  7. ten Broek, R. P., et al. Benefits and harms of adhesion barriers for abdominal surgery: a systematic review and meta-analysis. Lancet. 383 (9911), 48-59 (2014).
  8. Becker, J. M., et al. Prevention of postoperative abdominal adhesions by a sodium hyaluronate-based bioresorbable membrane: a prospective, randomized, double-blind multicenter study. J Am Coll Surg. 183 (4), 297-306 (1996).
  9. Cassidy, M. R., Sherburne, A. C., Heydrick, S. J., Stucchi, A. F. Combined intraoperative administration of a histone deacetylase inhibitor and a neurokinin-1 receptor antagonist synergistically reduces intra-abdominal adhesion formation in a rat model. Surgery. 157 (3), 581-589 (2015).
  10. Thaler, K., et al. Coincidence of connective tissue growth factor expression with fibrosis and angiogenesis in postoperative peritoneal adhesion formation. Eur Surg Res. 37 (4), 235-241 (2005).
  11. Hong, G. S., et al. Effects of macrophage-dependent peroxisome proliferator-activated receptor gamma signalling on adhesion formation after abdominal surgery in an experimental model. Br J Surg. 102 (12), 1506-1516 (2015).
  12. Whang, S. H., et al. In search of the best peritoneal adhesion model: comparison of different techniques in a rat model. J Surg Res. 167 (2), 245-250 (2011).
  13. Buckenmaier, C. C. 3rd, Pusateri, A. E., Harris, R. A., Hetz, S. P. Comparison of antiadhesive treatments using an objective rat model. Am Surg. 65 (3), 274-282 (1999).
  14. Rajab, T. K., et al. An improved model for the induction of experimental adhesions. J Invest Surg. 23 (1), 35-39 (2010).

Tags

Medicin anatomi kirurgi mus abdominal vidhäftning liten tarmvred fibros ärrbildning
Skapande av buken adhesioner hos möss
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, More

Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, T., Barnes, L. A., Cheung, A. T. M., Malhotra, S., Lorenz, H. P., Longaker, M. T. Creation of Abdominal Adhesions in Mice. J. Vis. Exp. (114), e54450, doi:10.3791/54450 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter