Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Oprettelse af Abdominal adhæsioner i mus

Published: August 27, 2016 doi: 10.3791/54450

Introduction

Abdominal sammenvoksninger er en form for arvæv, der dannes i maven som reaktion på inflammation, typisk efter kirurgi eller intraabdominal infektion. Adhæsioner er en væsentlig årsag til kroniske mavesmerter og infertilitet, og er den mest almindelige årsag til tyndtarmsobstruktion 1. Tilstedeværelsen af adhæsioner gør udføre en anden abdominal operation vanskeligere og øger sandsynligheden for komplikationer 2.

Trods mange års forskning, forbliver mekanismerne bag dannelsen af ​​sammenvoksninger dårligt forstået. Det er kendt, at en første skade den peritoneale overflade forårsager en udsivning af fibrin-rig væske, som derefter danner en blodprop, der binder overfladerne af tarm og bugvæggen sammen 3. Senere, fibroblaster og andre celler migrere ind i klæbemidlet plads og udskiller bindevæv 4. Over måneder til år vedhæftningen modnes ved at udvikle blodkar og nerver

Flere kommercielle produkter findes der er designet til at reducere dannelsen af sammenvoksninger efter abdominal kirurgi (f.eks Seprafilm). Alle disse produkter virker som mekaniske barrierer og stoppe adhæsionsdannelse ved at forhindre fysisk kontakt mellem løkker af tarm og bugvæggen 6,7. Trods beviser fra et kontrolleret forsøg, at en kirurgisk vedhæftning barriere reducerer dannelsen af sammenvoksninger 8, anekdotisk mange kirurger har været skuffede med effektiviteten af mekaniske barriere produkter.

I øjeblikket er der ingen lægemiddelrelaterede baserede anti-adhæsions- terapier, hvilket afspejler, at de præcise processer involveret i adhæsionsdannelse er dårligt forstået. Udvikling af en terapi, der specifikt er rettet mod cellulære eller molekylære agenter er involveret i dannelsen af ​​sammenvoksninger vil kræve en bedre forståelse af de begivenheder, der er involveret i dannelsen af ​​vedhæftningen. adskillige gruppes har identificeret molekylære veje, der kan være vigtige for adhæsionsdannelse 9-11. Animal modeller giver en fantastisk miljø for at studere dannelsen af ​​sammenvoksninger. Mange undersøgelser er blevet offentliggjort, der beskriver den kirurgiske skabelse af vedhæftning i flere dyr, især rotter og mus 6,12-14. I betragtning af vores erfaring med at studere fibrose hos mus og den brede tilgængelighed af transgene mus og mus-baserede antistoffer, valgte vi musen som vores model for studiet af sammenvoksninger. Heri rapporterer vi den teknik, som vi har udviklet til reproducerbart og pålideligt skabe abdominal sammenvoksninger i musen.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Følgende protokol er blevet godkendt af Stanford University Institutional Animal Care og brug Udvalg (IACUC) og overholder alle institutionelle etiske retningslinjer vedrørende brugen af ​​forsøgsdyr.

1. Oprettelse af Abdominal adhæsioner

  1. Start musen på antibiotisk foderdiæt en uge før proceduren.
  2. Autoklaver kirurgiske instrumenter og præ-varm saltvand kunstvanding opløsning.
  3. Bedøver musen anvendelse af 2% inhaleret isofluran.
  4. Ved hjælp af en hårklipper efterfulgt af en hurtig applikation (5 - 10 sek) af hårfjernelsesmiddel, fjerne hår fra størstedelen af ​​overfladen af ​​maven. fjerne grundigt hårfjernelsesmiddel ved forsigtigt aftørring med våd gaze og eventuelt ved omhyggeligt dunker den nederste halvdel af musen i varmt vand. Tørre dyret.
  5. Placer dyrets snude ind bedøvelsesmidlet næsekegle. Under hele operationen, omhyggeligt overvåge respiratory sats af dyret og titreres bedøvelsesmidlet strømningshastighed efter behov.
  6. Brug en opvarmning anordning, såsom en varmepude eller en opvarmning lampe, for at forhindre hypotermi.
  7. Før prepping maven, fastgøre mus med strimler af bånd anbragt over og under maven for at forhindre musen fra skiftende under kirurgi. Desinficer maven med betadine, følg derefter med 70% ethanol. Medtage så meget område som muligt i prep, herunder hår på kanterne af det barberede område. Placer en steril filmen over musen. (Figur 1)
  8. Subkutant injicere 0,1 mg / kg buprenorphin, eller 3 ug for en 30 g mus.
  9. Gøre huden indsnit.
    1. Fra den nederste abdominal midterlinjen, tage fat i huden med en pincet og gøre en overfladisk lodret snit i huden ved hjælp af en skarp saks.
    2. Carry snittet overlegent til Xyphoid med saksen. Vær omhyggelig med at indtaste kun huden.
  10. Som den abdominale muskulatur er now synlige dækker indvoldene, fat midterlinjen af ​​muskulaturen med pincet og meget omhyggeligt lave et lille snit ind i det ved hjælp af skarp saks. Sørg for ikke at uheld skåret i en abdominal orgel.
  11. Efter indtastning af peritoneal plads med et lille snit og se den muskulære lag trække sig væk fra de abdominale organer, forlænge snittet overlegent og nedadtil ved at indsætte saksen ind i åbningen og forsigtigt skære i begge retninger. Forlæng snittet fra Xyphoid overlegent til over blæren nedadtil. (Figur 2)
  12. Nu hvor tarmene er udsat, find coecum og forsigtigt eksteriorisere det. Undgå at gribe fat coecum med fortandede eller skarpe pincet. Brug i stedet en atraumatisk tang såsom en Adson savtakkede pincet.
  13. Slib coecum med sandpapir.
    1. Forsigtigt slibe hele overfladen af ​​begge sider af coecum med 100 grit sandpapir i 30 - 60 sek indtil overfladen bliver mindre skinnende og petekkier appear på overfladen. Hvis kirurgen er højrehåndet, det hjælper til at orientere coecum med spidsen mod højre og drapere coecum over kirurgens venstre pegefinger. (Figur 3)
    2. Udfør slibning forsigtigt, da det er nemt at uheld forårsage en perforering af tynde cecal væg. En lille mængde af grynethed skal føles som sandpapir bevæges langs cecal overflade. Hvis sandpapir føles gentagne gange fange på coecum, vil det sandsynligvis medføre en tåre i cecal væg. Watch omhyggeligt for at sikre, at partikler af sandpapir ikke fordrive og forblive i maven, da dette kan forårsage overdreven udenlandsk organ reaktion.
    3. Hvis der opstår en tåre i cecal væg, afslutte proceduren og aflive dyret.
    4. Hvis en cecal blodkar forskydes af sandpapir og forårsager blødninger, hold tryk i op til to minutter med gaze. Men hvis blødningen fortsætter efter dette tidspunkt, placere et tal-of-eight 7-0 monofilament sutur omkringpunkt for blødning. Dette vil pålideligt stoppe blødningen i næsten alle tilfælde. Passe på ikke at inkorporere en stor mængde cecal væg ind suturen, da fald en risiko nekrose af den involverede del af væggen.
  14. Skade den højre abdominale sidevæg.
    1. Brug en strimmel sandpapir at slibe den peritoneale overflade af musklen af ​​retten abdominale sidevæg. Være mere aggressiv med slibning her end på coecum og fortsætte, indtil hele overfladen af ​​den højre abdominale sidevæg vises grov. Undgå slibning så hårdt, at huden er synlig gennem åbninger i den muskulære lag. (Figur 4)
    2. Ved hjælp af en Castro-Viejo nåldrivorganet, placere mellem to og fire tal-of-otte 4-0 silke sting i den muskulære lag af retten abdominale dæksiden. Lad halerne omkring 5 mm lange. Pas på ikke at uheld fange tarmvæg i sutur. (Figur 5)
  15. Anvendelse af en 10 ml sprøjte fyldt wed varmede saltvand, overrisle tarmene flere gange. Direkte strømmen af ​​saltopløsning ind i bughulen til at overrisle det indvendige samt. Hvis overfladen under musen bliver gennemblødt, bevæger musen hen over eller udskifte overfladen, for at undgå hypotermi.
  16. Brug en steril gaze placeret over incisionen at opsuge overskydende vanding.
  17. Tag en knivspids stivelse og drys det på overfladen af ​​den højre abdominale sidevæg og på begge sider af coecum. (Figur 6)
  18. Kontroller, at der ikke er nogen aktiv blødning. Hvis der er, skal du bruge en gaze svamp til at påføre tryk direkte på det punkt for blødninger, indtil det stopper. Hvis blødningen ikke stopper hurtigt, placere en hæmostatisk sutur som beskrevet ovenfor.
  19. Brug af den stumpe ende af pincet og en finger forsigtigt at skubbe tarmene tilbage i bughulen. Placer coecum ved siden suturerne i den højre abdominale sidevæg for at maksimere adhæsionsdannelse.
  20. Cmiste abdominal incision.
    1. Brug af 6-0 absorberbar flettet sutur, placere en kørende søm ind i det muskulære lag på toppen af ​​snittet.
    2. Kør suturen ned mod bunden af ​​snittet, der samler den muskulære lag. Rejse med ca. 3 mm og tage 3 mm bid med hver ny søm. Pas på ikke at uheld tager en bid af tarmen, mens placere suturer.
    3. I bunden af ​​snittet, efterlade en løkke af suturen fra den foregående bid og bruge dette til instrument binde suturen. Skær suturen forlader 5 mm haler.
    4. Gentage ovenstående tre trin med 6-0 nylon monofilament sutur for at lukke huden.
  21. Administrere en 20 ml / kg subkutant saltvand bolus (ca. 0,5 ml til en 30 g mus).
  22. Ved hjælp af en tør gaze, tørre hele dyret, da den dorsale pels tendens til at få våde under kunstvanding.
  23. Løst wrap et klæbemiddel forbinding omkring maven til at dække snittet. Pas på ikke at begrænse enNimal ben eller åndedrætsbesvær mekanik med bandagen.
  24. overvåge forsigtigt dyret som den genindvinder fra anæstesi. Administrer buprenorphin hver 12 timer i 2-3 dage efter indgrebet for smerter kontrol.

2. Høst Vedhæftning Tissue

  1. Vent mindst syv dage efter den første operation. Igen autoklave kirurgiske instrumenter og bedøver musen med isofluran.
  2. Sterilisere maven med Betadine, efterfulgt af 70% ethanol. Barbering og fjerne hår yderligere hår fra højre side af underlivet, således at vedhæftningen prøve indeholdende hud ikke bliver dækket af hår, hvilket gør histologi vanskeligere.
  3. Brug en venstre paramedian snit, da tarmen ofte sidder fast til den oprindelige snit. Begyndende ved den nedre ende af maven, omkring 5 mm til venstre for bunden af ​​den oprindelige indsnit, tage fat i huden med små fortandede pincet og skåret ind i huden med en skarp saks. Udvid dette cut overlegnely til brystkassen. (Figur 7)
  4. Med en saks, skåret i det muskulære lag og efter indtastning af peritoneal plads, udvide snittet til toppen og bunden af ​​snittet. Der vil være klæbende væv forårsager coecum og tyndtarm til at klæbe til højre sidevæg af maven og muligvis også til det oprindelige snit. (Figur 8)
  5. Brug af saks og starte på kanten af ​​snittet, over niveauet af coecum, begynde at skære ind i bugvæggen i en cirkel omkring det område, hvor tarmen er adhærerende.
  6. Skiftende over og under niveauet af coecum, gradvist skåret hele vejen rundt om adhæsion og afslutte cirklen, hvilket gav en "ø" af hud og bugvæggen klæbende til tarmen. (Figur 9)
  7. Igen med saksen, skåret i tarmen og adskille klæbende del fra resten af ​​tarmen, hvilket gav en sandwich af væv, der består af hud og bugvæggenpå den ene side, tarm på den anden side, og klæbende væv forbinder de to i mellem. (Figur 10)
  8. Eventuelt bruge en spidse saks til skarpt at adskille huden fra bugvæggen muskler. Til histologi overveje at forlade huden knyttet, men for fordøjelsen og celleisolering huden kan fjernes. Hvis der skal anvendes vævet til histologi, så sørg for at fjerne så meget suturmateriale som muligt uden overdrevent at forstyrre den selvklæbende interface. For fordøjelsen og celleisolering er det acceptabelt at forlade suturerne på plads, så længe vævet digest filtreres.
  9. Efter udtagelse vedhæftning væv, aflive musen på en human måde er godkendt af din institutionsbrug dyr udvalg.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Efter syv dage efter operationen, coecum og muligvis colon ascendens, lever og løkker af tyndtarm bør være klæbende til højresidig bugvæggen. (Figur 8) udskårne væv kan indlejres og sektioneret og vil give fremragende histologiske objektglas. (Figur 11, 12)

Når proceduren er udført korrekt, bør 100% af mus har betydelige sammenvoksninger på syv dage. Dødeligheden skal være mindre end 5%.

figur 1
Figur 1: Forberedelse til Kirurgi (a) Dyret er sikret med tape og maven prepped med betadin (b) betadin er blevet ryddet med en spritserviet og et sterilt afdækningsstykke er blevet placeret...about / filer / ftp_upload / 54450 / 54450fig1large.jpg "target =" _ blank "> Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 2
Figur 2:.. Incision Snittet bør strække sig fra det niveau af blæren til Xyphoid Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 3
Figur 3:. Afslidning af coecum (a) Drapering coecum over venstre pegefinger med spidsen pegende mod højre tillader bunden af coecum, der skal stabiliseres ved den venstre tommelfinger (b) et passende niveau slibning forlader. coecum med en ru overflade, er mindre skinnende end før, og med flere punktformede punkter af blødning. Ekstra pleje bør tages mens slibning nær den mesenteriske side, da skibene her vil bløde de mest rask. Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 4
Figur 4:. Slid af bugvæggen De indvolde er fejet til side og det peritoneale overflade af musklen væg er slebet, indtil det ser groft. Den blodkar ses lige over sandpapir i bugvæggen er ofte stødt, men vil ikke bløder væsentligt. Klik her for at se en større version af dette tal.

1 "> Figur 5
Figur 5:.. Placering af Figure-of-otte Sutur En silke figur-of-otte sutur placeres i musklen væggen, før de bindes ned Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 6
Figur 6:. Anvendelse af stivelse En let lag af stivelse er drysset over abdominale sidevæg og tarm. To tal-of-otte suturer ses i musklen væggen. Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 7
Figur 7: Incision til det andet Surgery (a) snit er lige begyndt til venstre for den oprindelige snit (b) Den nye snit bør strække sig fra det niveau af blæren til brystkassen... Klik her for at se en større udgave af dette tal.

Figur 8
Figur 8:. Adhæsionen løkker af tyndtarmen (SB) er klæbende til højre sidevæg og til hinanden. Den oprindelige midtlinieincision, nu helet, ses (Inc). Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 9
Trong> Figur 9: udtagelse Adhæsion Tissue. (a) og (b) En "ø" af hud og bugvæggen klæbende til den underliggende tarm befries ved at skære i en komplet cirkel omkring klæbende område. Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 10
Figur 10:. Prøven Cutting tværs tarmen vil give en sandwich af væv med tarm på den ene side (a), og huden på den anden side (b). De stykker af sutur synlig bør fjernes, hvis prøven skal bruges til histologi. Klik her for at se en større version af dette tal.

jove_content "fo: holde-together.within-side =" 1 "> Figur 11
Figur 11:. Histologi En hematoxylin og eosin (H & E) farvet sektion af en adhæsion på syv dage efter kirurgi viser hud og bugvæggen (nederst) bundet via den klæbende grænseflade til coecum (øverst). På dette tidlige tidspunkt coecum er sandsynligvis levet op til bugvæggen primært gennem fibrin og andre molekyler, og væsentlig arvæv har endnu ikke dannet. Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 12
Figur 12: Immunfluorescerende Imaging Et afsnit af adhæsion på syv dage efter operationen immunofluorescently farvet for α-glat muskulatur ac.tin, der viser ægte farvning af huden hårsække (venstre) og cecal muskel væg (i midten), og ikke-specifik farvning af cecal luminale overflade (til højre). Klik her for at se en større version af dette tal.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

De kritiske trin i denne procedure er: grundigt slibe coecum uden at forårsage perforering, placere suturer i den abdominale sidevæg, og anvende den rigtige mængde stivelse. gælder kun sandpapir til coecum, eller til en lille bestemt del af tarmen. Bred brug af sandpapir på store mængder af tyndtarm tendens til at forårsage betydelig ileus. Vær omhyggelig med at slibe coecum med tilstrækkelig kraft, at overfladen bliver ru, men ikke så meget, at muren tårer. At finde denne balance kan tage lidt tid. Altid håndtere tarmen omhyggeligt og undgå at bruge skarpe eller tandede pincet til at manipulere tarm. Det er nemt at uheld forårsage blødning ved at snuppe tyndtarmen mesenterium med pincet eller ved at trække i tarmen for kraftigt.

Hvis en tåre opstår i cecal væg, bør proceduren afsluttes, og dyret aflives. Det er vores erfaring, cecale tåre resulterer i dyrets død efter et par dage, selvom tåre er repaIRED godt. Desuden vil rift i cecal væg forårsage spild af afføring, der vil påvirke den inflammatoriske reaktion på en uforudsigelig måde.

Hæmostase skal være komplet ved afslutningen af ​​proceduren. Nogle blødning skibe vil genåbne og begynder at bløde ud efter have stoppet. I tvivlstilfælde, placere en absorberbar monofilament tal-of-otte sutur omkring det punkt for blødning. Denne type sutur foretrækkes at silke eller flettet absorberbar sutur, fordi det kan trækkes dog vævet med minimal modstand. Det har imidlertid vist, at silke eller flettet absorberbar sutur er mest effektiv i den abdominale sidevæg til induktion sammenvoksninger, som monofilamenter er mindre inflammatorisk.

Anvendelse af stivelse ved afslutningen af ​​proceduren kan bidrage til at øge dannelsen af ​​adhæsioner, men vi har opdaget, at en stor mængde af stivelse vil forårsage en inflammatorisk reaktion, der forårsager dødsfald. Stivelsen skal drysses på lightly. Der bør ikke være så meget, at det danner et fast lag.

Når først lære denne procedure, er det almindeligt at tabe flere mus. Det er vores erfaring de mest almindelige dødsårsager er dehydrering på grund af ileus forårsaget af for kraftig slid af tarmen, og sepsis på grund af intestinal perforation. Død forårsaget af blødning kan opstå, hvis fuldstændig hæmostase ikke opnås ved afslutningen af ​​operationen.

Hvis vedhæftningen dannelse er utilstrækkelig, overveje at bruge mere aggressiv slid af coecum og højre sidevæg, så der bliver mere stivelse, eller placere flere suturer på den abdominale dæksiden. Det er vores erfaring, at vente på mindre end en uge før genåbning maven resulterer i mindre end tilstrækkelig vedhæftning formation. På den anden side, hvis dødeligheden for mus efter kirurgi er høj, overveje at bruge mindre aggressiv afslidning af coecum, inspicerende mere nøje for hæmostase, og anvende mindre stivelse. Det er også vigtigt nøje overvågeden respirationsfrekvens af musen under kirurgi. Når kirurgen gevinster erfaringer med denne procedure, bør mortalitet være mindre end 10%.

Denne teknik er udviklet til primært at danne adhæsioner mellem coecum og højre abdominale sidevæg. Adhæsioner vil også ofte dannes mellem tyndtarmen, lever, og midtlinjeincision. Brug af denne teknik vil normalt ikke forårsage adhæsioner på venstre side af maven. En begrænsning ved denne teknik er, at adhæsioner mellem tarm og bugvæggen er mere tilbøjelige til at danne end adhæsioner mellem løkker af tarmen. Desuden er det ikke sandsynligt at resultere i en fuldstændig frossen underliv fuld af klæbemiddel væv, hvilket ofte ses hos mennesker, der har haft flere operationer.

Som beskrevet i indledningen, mange teknikker til fremstilling af abdominale adhæsioner hos mus og andre arter, især rotter, er blevet beskrevet i litteraturen 6,12-14. Der er langt færre offentliggjorte protoco ls for oprettelse af sammenvoksninger i mus. Vi spekulere, at fordi oprettelsen af ​​adhæsioner i mus er vanskeligere end i rotter, de fleste forskere valgte at udvikle deres teknik i rotten. på grund af den større tilgængelighed af transgene mus og anti-mus antistoffer, tror vi imidlertid, at det er værdifuldt at have en robust model for adhæsion oprettelse i mus, på trods af større tekniske vanskeligheder. Vi udviklede denne protokol efter at have prøvet mange af de offentliggjorte rotte protokoller. Vi fandt, at metoder til oprettelse adhæsioner i rotter, såsom anvendelse af elektrokauterisation på coecum, forårsager ofte mus til at dø. Vi var ikke tilfredse med tætheden af ​​sammenvoksninger produceret af teknikker, der bruger et enkelt indgreb, såsom at placere dæksiden iskæmiske knapper alene eller kun slibe coecum. Teknikken vi præsenterer her repræsenterer en kombination af interventioner, som vi fandt, gennem trial and error, at producere sammenvoksninger konsekvent mens minimerer dødelighed.

indhold "> Fordi denne teknik konsekvent forårsager klæbende væv til at danne mellem coecum og sidevæggen, mener vi, at det er ideelt til test tiltag, der skal reducere vedhæftning formation. Også denne teknik kan bruges til at udforske de molekylære veje og celletyper, der er involveret i adhæsionsdannelse. adhæsionen væv kan let udskåret og forberedt til histologi, og udbytter fremragende histologiske billeder (fig.11 og 12).

Nogle forskere kan ønske en model, hvor sammenvoksninger dannes mindre end 100% af tiden. Udelade anvendelsen af ​​stivelse vil reducere vedhæftningen sats på omkring 80%. Mindske antallet af silkesuturer anbringes i den højre abdominale sidevæg vil reducere vedhæftning hastigheden yderligere.

Det er vores erfaring, dag syv efter operationen er det første tidspunkt, hvor tarmen er konsekvent klæbende til bugvæggen. Imidlertid kan andre tidspunkter være mere relevant afhængigtom fokus for projektet. For eksempel kan forskere interesseret i migration af neutrofiler og makrofager i vedhæftningen rummet vil høste væv i de første fem dage efter operationen. På den anden side, aflejring af kollagen af ​​fibroblaster sker i uger efter den første skade, og til dette vil det være mere hensigtsmæssigt at behandle væv ved tidspunkter fordelt ud i flere uger efter operationen.

Kirurgiske lupper er meget nyttigt for forstørrelse af det kirurgiske felt, mens de udfører denne procedure. En operativ mikroskop kan også anvendes, men begrænser kirurgens evne til at inspicere operationsfeltet fra forskellige vinkler. Proceduren kan også ske uden forstørrelse overhovedet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne erklærer, at de ikke har nogen konkurrerende finansielle interesser.

Acknowledgments

CDM blev støttet af American College of Surgeons (ACS) Resident Research Scholarship. MSH blev støttet af California Institute for regenerativ medicin (CIRM) Klinisk Fellow træning tilskud TG2-01159. MSH, HPL, og MTL blev støttet af American Society of Maxillofacial kirurger (ASMS) / maxillofacial kirurger Foundation (MSF) Research Grant Award. HPL blev støttet af NIH tilskud R01 GM087609 og en gave fra Ingrid Lai og Bill Shu ære for Anthony Shu. HPL og MTL blev støttet af Hagey Laboratorium for Pediatric regenerativ medicin og The Oak Foundation. MTL blev støttet af Gunn / Olivier Fund.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" Fisher Scientific 14-206-62
Polylined Sterile Field, 18" x 24" Busse Hospital Disposables 696 Cut a rectangular hole of the appropriate size
Isothesia isoflurane Henry Schein  050033
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" Fisher Scientific 22-415-469
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube Dechra Veterinary Products NDC 17033-211-38
Nair depilatory cream Church & Dwight Co. 22339-05
Buprenex buprenorphine  0.3 mg/ml Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. NDC 12496-0757-5
1 cc insulin syringe, 27 G Becton Dickinson 329412
Povidone Iodine Prep Solution Medline MDS093944H
Webcol alcohol prep swabs Covidien 6818
General-Purpose Labarotory Labeling tape VWR 89097-912
BioGel PI surgical gloves Mölnlycke Health Care ALA42675Z
Micro Forceps with teeth Roboz RS-5150
Fine scissors- sharp Fine Science Tools 14060-09
Straight serrated forceps Fine Science Tools 11050-10
Castro-Viejo needle driver Fine Science Tools 12565-14
100 grit 1/4 sheet sandpaper ACE Hardware 1010446 Cut into strips
4-0 silk suture, 30", SH needle Ethicon K831
7-0 PDS II absorbable monofilament suture, 30", BV-1 needle Ethicon Z135 Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures.
Rice starch MP Biomedicals 102955
0.9% Sodium Chloride Irrigation Baxter BHL2F7121 Warm to 37 °C prior to use
10 ml syringe Becton Dickinson 309604
6-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", RB-1 taper needle Ethicon J212H
6-0 Ethilon nylon monofilament  suture, 18", P-3 needle,  Ethicon 1698G
Tegaderm Transparent Film Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm 3M 1624W Cut in half lengthwise

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
  2. Brochhausen, C., et al. Current strategies and future perspectives for intraperitoneal adhesion prevention. J Gastrointest Surg. 16 (6), 1256-1274 (2012).
  3. diZerega, G. S., Campeau, J. D. Peritoneal repair and post-surgical adhesion formation. Hum Reprod Update. 7 (6), 547-555 (2001).
  4. Hellebrekers, B. W., Kooistra, T. Pathogenesis of postoperative adhesion formation. Br J Surg. 98 (11), 1503-1516 (2011).
  5. Herrick, S. E., et al. Human peritoneal adhesions are highly cellular, innervated, and vascularized. J Pathol. 192 (1), 67-72 (2000).
  6. Beyene, R. T., Kavalukas, S. L., Barbul, A. Intra-abdominal adhesions: Anatomy, physiology, pathophysiology, and treatment. Curr Probl Surg. 52 (7), 271-319 (2015).
  7. ten Broek, R. P., et al. Benefits and harms of adhesion barriers for abdominal surgery: a systematic review and meta-analysis. Lancet. 383 (9911), 48-59 (2014).
  8. Becker, J. M., et al. Prevention of postoperative abdominal adhesions by a sodium hyaluronate-based bioresorbable membrane: a prospective, randomized, double-blind multicenter study. J Am Coll Surg. 183 (4), 297-306 (1996).
  9. Cassidy, M. R., Sherburne, A. C., Heydrick, S. J., Stucchi, A. F. Combined intraoperative administration of a histone deacetylase inhibitor and a neurokinin-1 receptor antagonist synergistically reduces intra-abdominal adhesion formation in a rat model. Surgery. 157 (3), 581-589 (2015).
  10. Thaler, K., et al. Coincidence of connective tissue growth factor expression with fibrosis and angiogenesis in postoperative peritoneal adhesion formation. Eur Surg Res. 37 (4), 235-241 (2005).
  11. Hong, G. S., et al. Effects of macrophage-dependent peroxisome proliferator-activated receptor gamma signalling on adhesion formation after abdominal surgery in an experimental model. Br J Surg. 102 (12), 1506-1516 (2015).
  12. Whang, S. H., et al. In search of the best peritoneal adhesion model: comparison of different techniques in a rat model. J Surg Res. 167 (2), 245-250 (2011).
  13. Buckenmaier, C. C. 3rd, Pusateri, A. E., Harris, R. A., Hetz, S. P. Comparison of antiadhesive treatments using an objective rat model. Am Surg. 65 (3), 274-282 (1999).
  14. Rajab, T. K., et al. An improved model for the induction of experimental adhesions. J Invest Surg. 23 (1), 35-39 (2010).

Tags

Medicin anatomi kirurgi mus abdominal vedhæftning tyndtarmsobstruktion fibrose ardannelse
Oprettelse af Abdominal adhæsioner i mus
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, More

Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, T., Barnes, L. A., Cheung, A. T. M., Malhotra, S., Lorenz, H. P., Longaker, M. T. Creation of Abdominal Adhesions in Mice. J. Vis. Exp. (114), e54450, doi:10.3791/54450 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter