Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Создание спаек в брюшной полости у мышей

Published: August 27, 2016 doi: 10.3791/54450

Introduction

Спаек в брюшной полости являются формой рубцовой ткани, которые образуют в брюшной полости в ответ на воспаление, как правило, после операции или внутрибрюшного инфекции. Спайки являются основной причиной хронической боли в области живота и бесплодия, и являются наиболее частой причиной непроходимости тонкой кишки 1. Присутствие спаек делает выполнение второй полостной операции более трудным и увеличивает вероятность осложнений 2.

Несмотря на многолетние исследования, механизмы, лежащие образование спаек остаются плохо понятыми. Известно , что первоначальное повреждение поверхности брюшины вызывает экссудацией фибрина обогащенной жидкостью, которая затем образует сгусток , который связывает поверхности кишечника и брюшной стенки вместе 3. Позже, фибробласты и другие клетки мигрируют в адгезивный пространство и секретируют соединительной ткани 4. В течение месяцев до нескольких лет адгезия созревает путем развития кровеносных сосудов и нервов

Несколько коммерческих продуктов существуют , которые предназначены для уменьшения образования спаек после операции на брюшной полости (например, Seprafilm). Все эти продукты действуют как механические барьеры и остановить образование спаек путем предотвращения физического контакта между петлями кишечника и брюшной стенки 6,7. Несмотря на доказательства из контролируемого исследования , что хирургическая адгезией барьер уменьшает образование спаек 8, многие хирурги Занимательно были разочарованы эффективностью механических барьерных продуктов.

В настоящее время нет никаких лекарств на основе анти-адгезионные терапии, которая отражает тот факт, что точные процессы, участвующие в формировании адгезии плохо изучены. Разработка терапии, которая конкретно направлена ​​на клеточных или молекулярных агентов, участвующих в образовании спаек потребует более четкого понимания событий, которые участвуют в формировании адгезии. Несколько группаs выявили молекулярные пути , которые могут быть важны для образования спаек 9-11. Животные модели обеспечивают превосходную среду для изучения образования спаек. Многие исследования были опубликованы , описывающее хирургическое создание адгезии в нескольких животных особое крысы и мыши 6,12-14. Учитывая наш опыт с изучением фиброзом у мышей и широкой доступности трансгенных мышей и мышей на основе антител, мы выбрали мышь в качестве нашей модели для изучения спаек. Здесь мы сообщаем о технике, которую мы разработали, чтобы воспроизводимо и надежно создавать спаек в брюшной полости у мышей.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Следующий протокол был одобрен Институциональные уходу и использованию животных комитета Стэнфордского университета (IACUC) путем и соответствует всем институциональным этических принципов в отношении использования лабораторных животных.

1. Создание спаек брюшной полости

  1. Запуск мыши на антибактериальной чау диеты за одну неделю до процедуры.
  2. Автоклав хирургических инструментов и предварительно согреть солевой раствор для орошения.
  3. Обезболить мышь, используя 2% вдыхаемого изофлуран.
  4. С помощью машинки для стрижки волос с последующим быстрым приложением (5 - 10 сек) для депиляции агента, удалить волосы из большинства поверхности живота. Тщательно удалите депиляции средство, аккуратно протерев влажной марлей и, необязательно, осторожно макая нижнюю половину мыши в теплую воду. Тщательно высушите животное.
  5. Поместите морду животного в анестезирующего конусообразной. В течение всей операции, внимательно следить за гespiratory скорость животного и титруют скорость потока анестетика по мере необходимости.
  6. Используйте устройство потепления, таких как грелку или согревающий лампы, чтобы предотвратить переохлаждение.
  7. До готовя живота, закрепить мышь с полосками ленты, расположенных выше и ниже живота, чтобы предотвратить мышь от смещения во время операции. Лечить живота с бетадин, а затем следуют с 70% -ным этанолом. Укажите как можно больше площади, как это возможно в стадии подготовки, в том числе волосы на краях бритой области. Поместите стерильную драпировка над мышью. (Рисунок 1)
  8. Подкожно вводят 0,1 мг / кг бупренорфина, или 3 мкг в течение 30 г мыши.
  9. Делают разрез кожи.
    1. Начиная с нижней части живота средней линии, захватите кожу с пинцетом и сделать неглубокий вертикальный разрез в коже, используя острые ножницы.
    2. Провести разрез главно к xyphoid с ножницами. Позаботьтесь, чтобы войти только кожу.
  10. По мере того как брюшная мускулатура пвл видны покрытия внутренностей, возьмитесь за среднюю линию мускулатуры с пинцетом и очень осторожно делают небольшой разрез в нее с помощью острыми ножницами. Убедитесь в том, чтобы случайно не разрезать на брюшной орган.
  11. После ввода в брюшную пространство с небольшим разрезом и, видя мышечный слой отстраниться от органов брюшной полости, расширить разрез главно и книзу, вставляя ножницы в отверстие и тщательно резки в обоих направлениях. Продлить разрез от xyphoid главно выше мочевого пузыря книзу. (Рисунок 2)
  12. Теперь, когда кишечник подвергаются, найдите слепая кишка и осторожно экстериоризоваться его. Избегайте захватывая слепая кишка с зубчатыми или острыми щипцами. Вместо того, чтобы использовать атравматической щипцами, такой как зубчатыми щипцами Адсон.
  13. Обработайте слепая кишка с наждачной бумагой.
    1. Аккуратно обдирать всю поверхность обеих сторон слепая кишка с 100 наждачной бумаги в течение 30 - 60 секунд, пока поверхность не станет менее блестящей и петехии appeaг на поверхности. Если хирург правой рукой, она помогает ориентировать слепая кишка с наконечником, обращенной вправо и драпировка слепая кишка над левым указательным пальцем хирурга. (Рисунок 3)
    2. Выполните шлифовальную осторожно, так как это легко случайно вызвать перфорацию тонкой стенки слепой кишки. Небольшое количество зернистости должно восприниматься как наждачная бумага перемещается вдоль поверхности слепой кишки. Если наждачная бумага ощущается неоднократно ловить на слепую, это, вероятно, вызовет разрыв в стенке слепой кишки. Внимательно следите, чтобы гарантировать, что частицы наждачной бумаги не смещать и остаются в брюшной полости, так как это может привести к чрезмерной реакции на инородное тело.
    3. Если разрыв в стенке слепой кишки происходит, прекратить процедуру и усыпить животное.
    4. Если слепокишечный кровеносный сосуд срезается с помощью наждачной бумаги и вызывает кровотечение, удерживая давление в течение до двух минут с марлей. Однако, если кровотечение продолжается после этого времени, поместите фигурное из восьми 7-0 мононити шов вокруг да околоточка кровотечения. Это позволит надежно остановить кровотечение почти во всех случаях. Заботьтесь, чтобы не включать большое количество слепой кишки стены в шовного материала, так как это вызывает риск некроз пораженной части стены.
  14. Травмировать правой брюшной боковой стенки.
    1. Используйте полосу наждачной бумагой, чтобы обдирать перитонеальный поверхность мышцы правой брюшной боковой стенки. Будьте более агрессивными с шлифовкой здесь, чем на слепую и продолжайте, пока вся поверхность правой брюшной боковой стенки не появится разогнали. Избегайте шлифования так сильно, что кожа видна через отверстия в мышечном слое. (Рисунок 4)
    2. Использование драйвера Кастро-Вьехо иглы, место между двумя и четырьмя термоэлектрическую восемь 4-0 шелковые швы в мышечный слой правой брюшной боковой стенки. Оставьте хвосты длиной примерно 5 мм. Будьте осторожны, чтобы случайно не поймать стенку кишечника в шовного материала. (Рисунок 5)
  15. С помощью 10 мл шприц, заполненный WIth нагретый солевой раствор, орошают Кишечник несколько раз. Прямой поток солевого раствора в брюшную полость, чтобы орошать интерьер, а также. Если поверхность под мышью становится замачивают, переместить курсор или заменить поверхность, чтобы избежать гипотермии.
  16. Используйте стерильную марлю, расположенную над надрез, чтобы впитать избыток орошения.
  17. Возьмем щепотку крахмала и посыпать его на поверхность правой брюшной боковой стенки и на обе стороны слепой кишки. (Рисунок 6)
  18. Убедитесь, что нет активного кровотечения. Если есть, использовать марлевую губкой, чтобы оказать давление непосредственно на точку кровотечения, пока он не остановится. Если кровотечение делает легко не остановить, поместите кровоостанавливающее швом, как описано выше.
  19. Используя тупой конец щипцами и пальцем, осторожно надавите кишечники обратно в брюшную полость. Поместите слепую кишку рядом с швами в правой брюшной боковой стенки, с тем, чтобы максимально увеличить образование спаек.
  20. Спотерять брюшной разрез.
    1. Использование 6-0 рассасывающийся плетеный шовный материал, поместите бегущий стежок в мышечный слой в верхней части разреза.
    2. Запуск шовного материала вниз по направлению к нижней части разреза, в результате чего вместе мышечный слой. Путешествие примерно 3 мм и принимать 3 мм укусы с каждой новой строчкой. Будьте осторожны, чтобы случайно не принять укус кишечника при размещении швов.
    3. В нижней части разреза, оставьте петлю из нити от предыдущего укуса и использовать это, чтобы инструмент связать шовный материал. Отрежьте нить, оставив 5 мм хвосты.
    4. Повторите вышеуказанные три шага с 6-0 нейлоновой мононити швом, чтобы закрыть кожу.
  21. Администрирование 20 мл / кг подкожно-солевой болюса (примерно 0,5 мл на 30 г мыши).
  22. С помощью сухой марлей, тщательно высушить все животное, как спинной мех имеет тенденцию становиться влажным во время полива.
  23. Неплотно заверните клей повязка вокруг живота, чтобы покрыть надрез. Заботьтесь, чтобы не ограничивать Aноги Нимал в дыхательные или механика с заправкой.
  24. Внимательно следить за состоянием животного, как он оправится от анестезии. Администрирование бупренорфина каждые 12 ч в течение 2-3 дней после процедуры для контроля боли.

2. Заготовка Адгезия ткани

  1. Подождите, как минимум семи дней после первоначальной операции. Опять же, автоклав хирургические инструменты и обезболить мышь с изофлуран.
  2. Стерилизовать живота с последующим бетадин 70% этанола. Бритье и депилировать дополнительные волосы с правой стороны живота, так что адгезия образца, содержащего кожу не будут покрыты волосами, что делает более трудным гистологии.
  3. Используйте левую парасрединную надрез, так как кишечник часто прилипает к первоначальному надрез. Начиная с нижнего конца живота, около 5 мм слева от нижней части первоначального разреза, схватить кожу с маленькими зубчатыми щипцами и нарезать на кожу с острыми ножницами. Продлить это сократить превосходствоLY к ребрам. (Рисунок 7)
  4. С помощью ножниц, разрезают на мышечный слой и после ввода в брюшную пространство, расширить разрез на верхней и нижней части разреза. Там будет клеевой ткани вызывает слепую кишку и тонкую кишку, чтобы прилипать к правой боковой стенки живота и, возможно, также к первоначальному разреза. (Рисунок 8)
  5. С помощью ножниц и, начиная от края разреза, выше уровня слепой кишки, начинают резки в брюшную стенку в круг вокруг области, где кишка клейкий.
  6. Переменный выше и ниже уровня слепой кишки, постепенно сократить весь путь вокруг адгезией и замкнуть круг, что дает "остров" кожи и брюшной стенки прилежит к кишечника. (Рисунок 9)
  7. Опять же с помощью ножниц, разрезают на кишечник и отделить прилипшие часть от остальной части кишечника, что дает сэндвич ткани, которая состоит из кожи и брюшной стенкис одной стороны, кишечника, с другой стороны, и клеевой ткани, соединяющей два между ними. (Рисунок 10)
  8. Необязательно использовать заостренным ножницы, чтобы резко отделить кожу от брюшной стенки мышцы. Для гистологии рассмотреть оставляя кожу прилагается, но для пищеварения и выделения клеток кожи может быть удален. Если ткань будет использоваться для гистологии, убедитесь, чтобы удалить как можно больше шовного материала, насколько это возможно без чрезмерного нарушения интерфейс клеевой. Для пищеварения и выделения клеток допустимо оставить швы на месте до тех пор, как ткань фильтруют дайджеста.
  9. После иссечения спаек ткани, усыпить мышь, используя гуманный метод, одобренный вашим институциональном использования животных комитета.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

В семь дней после операции, слепой кишки и, возможно, восходящей ободочной кишки, печени и петли тонкой кишки должен быть приверженцем правосторонней брюшной стенки. (Рисунок 8) иссекают ткань может быть вложена и секционного и даст отличные гистологические слайды. (Рисунок 11, 12)

Когда процедура выполняется должным образом, 100% мышей должны иметь существенные спаек в семь дней. Смертность должна быть менее 5%.

Рисунок 1
Рисунок 1: Подготовка к операции (а) Животное было обеспечено с помощью ленты и живот бетадин нацелен (б) бетадин был очищен с тампоном , смоченным спиртом и стерильным драпировка был помещен...ом / файлов / ftp_upload / 54450 / 54450fig1large.jpg "целевых =" _blank "> Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

фигура 2
Рисунок 2:.. Разрез Разрез должен проходить от уровня мочевого пузыря к xyphoid Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 3
Рис . 3: истирание слепой кишки (а) драпировки слепая кишка над левым указательным пальцем с наконечником , указывая вправо позволяет основание слепую быть стабилизирована большой палец левой руки (б) соответствующий уровень шлифовкой оставляет. слепая кишка с шероховатой поверхностью, которая менее блестящей, чем раньше, и с несколькими точками петехиальные кровотечения. Особую осторожность следует соблюдать осторожность при шлифовании вблизи мезентериального стороны, как сосуды здесь будет кровоточить самым быстрым шагом. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 4
Рис . 4: ссадины брюшной стенки внутренностей отметаются и до тех пор, пока не появится грубый перитонеальный поверхность мышц стенки шлифуют. Кровеносных сосудов видели чуть выше наждачной бумаги в брюшной стенке часто встречающегося , но не будет кровоточить по существу. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

1 "> Рисунок 5
Рисунок 5:.. Размещение Шов Рис-из-восьми шелковая фигурное из восьми-шовный помещают в мышечную стенку, до будучи привязанным Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 6
Рис . 6: Применение Starch легкий слой крахмала посыпают брюшной боковой стенки и кишечника. Два из фигурного-восьми Швы наблюдаются в мышечной стенке. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 7
Рисунок 7: Разрез для второй операции (а) Разрез начинается только слева от первоначального разреза (б) Новый Разрез должен проходить от уровня мочевого пузыря к ребрам... Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы увидеть увеличенную версию эта фигура.

Рисунок 8
Рисунок 8:. Адгезия петли тонкого кишечника (SB) являются прилежит к правой боковой стенке и друг к другу. Оригинальный срединный разрез, теперь зажила, видно (Inc). Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 9
Чонг> Рисунок 9: Акцизирование Адгезия ткани. (а) и (б) "остров" из кожи и брюшной стенки , приверженного подстилающей кишки освобождается путем разрезания в полный круг вокруг клейкого области. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 10
Рисунок 10:. Устанавливается образец для резки через кишечник даст сандвич из ткани с кишечником , с одной стороны (а) и кожи с другой стороны (б). Куски швом видимого должны быть удалены , если образец должен быть использован для гистологического исследования. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

jove_content "ВОК: Keep-together.within-странице =" 1 "> Рисунок 11
Рисунок 11:. Гистологии гематоксилином и эозином (Н & Е) окрашивали сечение сцепления на семь дней после операции , показывая кожи и брюшной стенки (дна) , присоединенные через интерфейс адгезией к слепой кишке (вверху). На этом раннем этапе времени слепая кишка, вероятно , приклеивают к брюшной стенке в основном за счет фибрина и других молекул, а также существенная рубцовой ткани еще не сформирован. Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Рисунок 12
Рисунок 12: Иммунофлуоресцентного визуализации Секция адгезии на семь дней после операции immunofluorescently окрашивали для альфа-гладких мышц переменного тока.олово, показывая истинное окрашивание волосяных фолликулов кожи (слева) и слепой кишки стенки мышц ( в центре) и неспецифическое окрашивание поверхности слепой кишки в просвете (справа). Пожалуйста , нажмите здесь , чтобы посмотреть увеличенную версию этой фигуры.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Критические шаги в этой процедуре являются: тщательно абразивной слепой кишки, не вызывая перфорацию, размещение швов в брюшной боковой стенки, и применяя нужное количество крахмала. применять наждачную бумагу только в слепую кишку, или в небольшой определенной части кишечника. Широкое использование наждачной бумаги на больших объемах тонкой кишки, как правило, вызывают значительную непроходимость. Позаботьтесь, чтобы обдирать слепая кишка с достаточной силой, что поверхность становится шероховатой, но не так много, что стена слез. Нахождение этого баланса может занять некоторое время. Всегда тщательно обрабатывать кишечник и избегать использования острых или зубчатым щипцов для манипулирования кишечника. Это легко случайно вызвать кровотечение, захватывая небольшой брыжейки кишечника с пинцетом или потянув на кишечник слишком сильно.

Если разрыв происходит в стенке слепой кишки, процедура должна быть прекращена, и животное усыпляют. По нашему опыту, ободочнокишечных результаты слезой в смерти животного после нескольких дней, даже если слеза РепаIRED хорошо. Кроме того, слеза слепой кишки стены вызовет утечку стула, который будет влиять на воспалительную реакцию непредсказуемым образом.

Гемостаз должен быть полным в конце процедуры. Некоторые сосуды кровотечение будет вновь открыть и начинают кровоточить после появления остановилось. В случае сомнений, поместите рассасывающиеся мононити в форме восьмерки вокруг шовного точки кровотечения. Этот тип шовного материала предпочтительнее шелка или плетеного рассасывающиеся швом, так как он может вытянуть хотя ткани с минимальным сопротивлением. Тем не менее, мы обнаружили, что шелк, или вплетенными рассасывающийся шовный наиболее эффективен в брюшной боковой стенки для индукции спаек, так как мононити меньше воспалительный.

Применение крахмала в конце процедуры способствует увеличению образование спаек, но мы обнаружили, что чрезмерное количество крахмала вызывает воспалительную реакцию, что приводит к смерти. Крахмал следует посыпать на lightlу. Там не должно быть так, что он образует твердый слой.

При первом изучении этой процедуры, обычно потерять несколько мышей. В нашем опыте наиболее распространенными причинами смерти являются обезвоживание организма из-за непроходимости, вызванной чрезмерно энергичной истирания кишечника и сепсис вследствие перфорации кишечника. Смерть в результате кровотечение может произойти, если полный гемостаз не будет достигнуто в конце операции.

Если образование спаек недостаточно, рекомендуется использовать более агрессивную истирание слепую кишку и правой боковой стенки, в результате чего больше крахмала, или помещая больше швов на брюшной боковой стенки. По нашему опыту, ожидая менее чем за неделю до открытия брюшной полости результаты менее чем адекватной образования спаек. С другой стороны, если уровень смертности мышей после операции высок, рекомендуется использовать менее агрессивную истирание слепую кишку, более внимательно проверять для гемостаза, и применяя меньше крахмала. Кроме того, важно внимательно следить зачастота дыхания мыши во время операции. После того, как получает опыт хирурга с этой процедурой, смертность должна быть менее 10%.

Этот метод предназначен для в первую очередь образовывать спайки между слепой кишки и правой брюшной боковой стенки. Спайки также часто образуют между тонкой кишки, печени, и срединный разрез. С помощью этого метода, как правило, не вызывают спайки на левой стороне живота. Ограничение этого метода заключается в том, что спайки между кишечником и брюшной стенки, более вероятно, чем сформировать спаек между петлями кишечника. Кроме того, это может привести к полностью замороженный живот полон клейкой ткани, которая часто наблюдается у людей, у которых были несколько хирургических операций нет.

Как было сказано во введении, многие способы получения спаек в брюшной полости у мышей и других видов, в частности , крысы, были описаны в литературе 6,12-14. Есть гораздо меньше Опубликованная Protoco Ls для создания спаек у мышей. Мы полагаем, что, поскольку создание спаек у мышей гораздо сложнее, чем у крыс, большинство исследователей предпочли развивать свою технику у крыс. Тем не менее, из-за большей доступности трансгенных мышей и антител анти-мыши, мы считаем, что важно иметь надежную модель для создания адгезии у мышей, несмотря на большую техническую сложность. Мы разработали этот протокол после попытки многих из опубликованных протоколов крыс. Мы обнаружили, что методы создания спаек у крыс, такие, как использование электрокоагуляции на слепую кишку, часто вызывают у мышей умирать. Мы не были удовлетворены с плотностью спаек, полученных с помощью методов, которые используют одну вмешательства, например, размещение боковин ишемические кнопки в одиночку, или только абразивной слепой кишки. Техника, которую мы приводим здесь представляет собой сочетание мер, которые мы нашли, путем проб и ошибок, чтобы произвести спайки последовательно при сведении к минимуму смертность.

Содержание "> Поскольку этот метод последовательно приводит к клеевой ткани с образованием между слепую и боковой стенкой, мы считаем, что он идеально подходит для тестирования вмешательств, направленных на снижение образования спаек. Кроме того, этот метод может быть использован для изучения молекулярных путей и типов клеток, которые участвует в образовании спаек. ткань адгезии легко может быть вырезана и подготовлены к гистологии, а выходы отличные гистологических изображениях ( на рисунках 11, 12).

Некоторые исследователи могут захотеть модель, в которой спайки образуют менее чем на 100% времени. Опуская применение крахмала уменьшит скорость адгезия к примерно 80%. Уменьшение количества швами из шелка, помещенных в правую брюшную боковине приведет к дальнейшему снижению скорости адгезии.

По нашему опыту, на седьмой день после операции первый момент времени, когда кишечник последовательно прилежит к брюшной стенке. Тем не менее, другие моменты времени могут быть более подходящими в зависимостина фокусе проекта. Например, исследователи заинтересованы в миграции нейтрофилов и макрофагов в спаек пространство может понадобиться для сбора ткани в первые пять дней после операции. С другой стороны, отложение коллагена фибробластами происходит в течение нескольких недель после первоначальной травмы, и для этого он будет более целесообразно исследовать ткани в моменты времени, разнесены в течение нескольких недель после операции.

Хирургические луп очень полезны для увеличения операционного поля во время выполнения этой процедуры. Оперативный микроскоп также может быть использован, но ограничивает возможности хирурга, чтобы осмотреть операционное поле с разных точек зрения. Процедура также может быть сделано без каких-либо увеличения вообще.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих финансовых интересов.

Acknowledgments

МЧР был поддержан Американской коллегии хирургов (ACS) Resident Research Scholarship. MSH была поддержана Калифорнийского института регенеративной медицины (CIRM) подготовка гранта Клинический сотрудник TG2-01159. MSH, HPL, и MTL были поддержаны Американским обществом челюстно-лицевых хирургов (ASMS) / Фонд челюстно-лицевых хирургов (MSF) Research Award Грант. HPL была поддержана грантом NIH R01 GM087609 и подарок от Ingrid Лай и Билл Шу в честь Энтони Шу. HPL и MTL были поддержаны лабораторией Hagey для детской регенеративной медицины и The Oak Foundation. MTL была поддержана Ганна / Оливье фонда.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" Fisher Scientific 14-206-62
Polylined Sterile Field, 18" x 24" Busse Hospital Disposables 696 Cut a rectangular hole of the appropriate size
Isothesia isoflurane Henry Schein  050033
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" Fisher Scientific 22-415-469
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube Dechra Veterinary Products NDC 17033-211-38
Nair depilatory cream Church & Dwight Co. 22339-05
Buprenex buprenorphine  0.3 mg/ml Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. NDC 12496-0757-5
1 cc insulin syringe, 27 G Becton Dickinson 329412
Povidone Iodine Prep Solution Medline MDS093944H
Webcol alcohol prep swabs Covidien 6818
General-Purpose Labarotory Labeling tape VWR 89097-912
BioGel PI surgical gloves Mölnlycke Health Care ALA42675Z
Micro Forceps with teeth Roboz RS-5150
Fine scissors- sharp Fine Science Tools 14060-09
Straight serrated forceps Fine Science Tools 11050-10
Castro-Viejo needle driver Fine Science Tools 12565-14
100 grit 1/4 sheet sandpaper ACE Hardware 1010446 Cut into strips
4-0 silk suture, 30", SH needle Ethicon K831
7-0 PDS II absorbable monofilament suture, 30", BV-1 needle Ethicon Z135 Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures.
Rice starch MP Biomedicals 102955
0.9% Sodium Chloride Irrigation Baxter BHL2F7121 Warm to 37 °C prior to use
10 ml syringe Becton Dickinson 309604
6-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", RB-1 taper needle Ethicon J212H
6-0 Ethilon nylon monofilament  suture, 18", P-3 needle,  Ethicon 1698G
Tegaderm Transparent Film Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm 3M 1624W Cut in half lengthwise

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ellis, H., et al. Adhesion-related hospital readmissions after abdominal and pelvic surgery: a retrospective cohort study. Lancet. 353 (9163), 1476-1480 (1999).
  2. Brochhausen, C., et al. Current strategies and future perspectives for intraperitoneal adhesion prevention. J Gastrointest Surg. 16 (6), 1256-1274 (2012).
  3. diZerega, G. S., Campeau, J. D. Peritoneal repair and post-surgical adhesion formation. Hum Reprod Update. 7 (6), 547-555 (2001).
  4. Hellebrekers, B. W., Kooistra, T. Pathogenesis of postoperative adhesion formation. Br J Surg. 98 (11), 1503-1516 (2011).
  5. Herrick, S. E., et al. Human peritoneal adhesions are highly cellular, innervated, and vascularized. J Pathol. 192 (1), 67-72 (2000).
  6. Beyene, R. T., Kavalukas, S. L., Barbul, A. Intra-abdominal adhesions: Anatomy, physiology, pathophysiology, and treatment. Curr Probl Surg. 52 (7), 271-319 (2015).
  7. ten Broek, R. P., et al. Benefits and harms of adhesion barriers for abdominal surgery: a systematic review and meta-analysis. Lancet. 383 (9911), 48-59 (2014).
  8. Becker, J. M., et al. Prevention of postoperative abdominal adhesions by a sodium hyaluronate-based bioresorbable membrane: a prospective, randomized, double-blind multicenter study. J Am Coll Surg. 183 (4), 297-306 (1996).
  9. Cassidy, M. R., Sherburne, A. C., Heydrick, S. J., Stucchi, A. F. Combined intraoperative administration of a histone deacetylase inhibitor and a neurokinin-1 receptor antagonist synergistically reduces intra-abdominal adhesion formation in a rat model. Surgery. 157 (3), 581-589 (2015).
  10. Thaler, K., et al. Coincidence of connective tissue growth factor expression with fibrosis and angiogenesis in postoperative peritoneal adhesion formation. Eur Surg Res. 37 (4), 235-241 (2005).
  11. Hong, G. S., et al. Effects of macrophage-dependent peroxisome proliferator-activated receptor gamma signalling on adhesion formation after abdominal surgery in an experimental model. Br J Surg. 102 (12), 1506-1516 (2015).
  12. Whang, S. H., et al. In search of the best peritoneal adhesion model: comparison of different techniques in a rat model. J Surg Res. 167 (2), 245-250 (2011).
  13. Buckenmaier, C. C. 3rd, Pusateri, A. E., Harris, R. A., Hetz, S. P. Comparison of antiadhesive treatments using an objective rat model. Am Surg. 65 (3), 274-282 (1999).
  14. Rajab, T. K., et al. An improved model for the induction of experimental adhesions. J Invest Surg. 23 (1), 35-39 (2010).

Tags

Медицина выпуск 114 анатомии хирургии мыши прилипание брюшной полости небольшой непроходимость кишечника фиброз рубцевание
Создание спаек в брюшной полости у мышей
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, More

Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, T., Barnes, L. A., Cheung, A. T. M., Malhotra, S., Lorenz, H. P., Longaker, M. T. Creation of Abdominal Adhesions in Mice. J. Vis. Exp. (114), e54450, doi:10.3791/54450 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter