Ativação de macrófagos derivados de medula óssea de camundongo em resposta a anticorpos

Após a exposição ao patógeno, os macrófagos sofrem ativação e liberam citocinas pró-inflamatórias e anti-inflamatórias, coordenando a resposta do sistema imunológico.

Para estudar a ativação de macrófagos derivados da medula óssea in vitro, transfira uma suspensão isolada de células da medula óssea de camundongo para um frasco de cultura. Incube brevemente.

As células mesenquimais, monócitos e macrófagos maduros aderem à superfície do frasco, enquanto os progenitores hematopoiéticos permanecem em suspensão.

Recolha os meios contendo progenitores hematopoiéticos e centrifugue. Transferir as células ressuspensas em meio de fator estimulador de colónias de macrófagos, M-CSF, para um frasco de cultura.

O M-CSF faz com que a subpopulação progenitora mieloide se diferencie em macrófagos, que parecem ramificados e aderem ao frasco.

Descarte o meio que contém células não aderentes. Adicione o meio M-CSF e incuba. Quando os macrófagos atingirem seu estado totalmente funcional, colha-os. Centrifuga.

Macrófagos de placas ressuspensos em meio M-CSF em poços de placas de vários poços. Após a adesão dos macrófagos aos poços, adicione imunoglobulinas policlonais humanas e lipopolissacarídeo bacte