Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 4:08 min. • July 8th, 2025
Após a interação com estimulantes inflamatórios, as células imunes liberam moléculas de sinalização inflamatória - citocinas - para produzir uma resposta imune.
Para analisar o efeito das preparações de produtos de tabaco, TPPs, pegue uma placa de vários poços com concentrações crescentes de TPP. Semeie a placa com células mononucleares do sangue periférico humano, PBMCs contendo células imunológicas.
A nicotina - um agente imunossupressor em TPPs - liga-se aos receptores nicotínicos de acetilcolina, regulando negativamente a produção de citocinas pró-inflamatórias. Essa regulação negativa é dependente da dose, com concentrações mais altas tendo um efeito mais significativo.
Centrifugar para peletar as células e rejeitar o sobrenadante que contém resíduos de TPP.
Ressuspenda as células em um meio completo e adicione uma mistura contendo lipopolissacarídeo - um estimulador imunológico e GolgiPlug - um inibidor do transporte de proteínas.
As moléculas de lipopolissacarídeos interagem com células imunes contendo o receptor toll-like 4, desencadeando vias de sinalização intracelular e a produção de citocinas pró-inflamatórias. Enquanto isso, as moléculas do GolgiPlug bloqueiam a secreç
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