Geração de partículas semelhantes ao vírus Chikungunya usando o sistema de expressão de baculovírus em células de insetos

Partículas semelhantes ao vírus Chikungunya, VLPs, são estruturas não infecciosas compostas de proteínas do envelope viral embutidas em uma bicamada lipídica e desprovidas de material genético.

Para produzir VLPs Chikungunya, infecte células de insetos Spodoptera frugiperda Sf9 com baculovírus recombinantes expressando um de genes estruturais Chikungunya. O consiste em um promotor de baculovírus fundido com genes estruturais chikungunya que codificam o capsídeo e as proteínas do envelope.

Durante a incubação, as glicoproteínas do envelope do baculovírus se ligam aos receptores de superfície nas células do inseto. Isso facilita a entrada do baculovírus e a liberação de DNA viral no citoplasma, gerando poliproteínas contendo proteínas do capsídeo e do envelope da chikungunya.

A clivagem autocatalítica pós-síntese da proteína do capsídeo produz a poliproteína precursora que possui proteínas de envelope no retículo endoplasmático, ER. No lúmen do RE, as enzimas clivam a poliproteína precursora, gerando proteínas individuais que entram no compartimento de Golgi para processamento posterior, formando heterotrímeros de proteínas.

As proteases residentes em Golgi clivam os heterotrímeros d