Imunização Intranasal com BCG em Modelo de Camundongo

Comece com um camundongo anestesiado e administre uma cepa BCG viva atenuada de Mycobacterium bovis, que reduziu a capacidade de causar doenças, através do nariz do camundongo.

As bactérias injetadas estimulam uma resposta imune no tecido pulmonar e nos linfonodos próximos.

Isso leva à geração de células T efetoras e células B que entram na circulação do camundongo.

As células B efetoras produzem anticorpos contra micobactérias.

Enquanto isso, as células T efetoras se instalam no tecido pulmonar como células T de memória residentes ou células T_RM, fornecendo imunidade de longo prazo.

Para avaliar a eficácia da imunização, administre micobactérias vivas e virulentas com capacidade causadora de doenças pelo nariz do camundongo.

Isso desencadeia a ativação de células T_RM no tecido pulmonar.

As células T_RM ativadas liberam citocinas, atraindo outras células imunes, incluindo células B efetoras.

Essas células B secretam anticorpos que se ligam às micobactérias, aumentando sua depuração pelos neutrófilos, indicando uma imunização bem-sucedida.

Para administração intranasal, carregue uma micropipeta com 20 microlitros da suspensão de BCG e coloque o camundongo anestesiado em decúbito dorsal dentro do capuz. Administrar o inóculo gota a gota entre as duas narinas até que todo o volume de 20 microlitros tenha sido depositado, deixando tempo entre as gotas para permitir que o ratinho inale a suspensão. Em seguida, recarregue a micropipeta com mais 20 microlitros de bactérias e repita a administração.

Para o desafio intranasal com a estirpe H37Rv Mycobacterium tuberculosis, no momento experimental apropriado após a vacinação, inocular os animais com a administração intranasal de 40 microlitros da suspensão bacteriana H37Rv como acabámos de demonstrar.