Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:04 min. • July 8th, 2025
Pegue células isoladas de um cerebelo de camundongo recém-nascido contendo células-tronco, neurônios e glia.
Adicione microesferas magnéticas revestidas com anticorpos que se ligam a uma glicoproteína de superfície específica para células-tronco.
Centrifugue, remova as esferas não ligadas e ressuspenda as células em um tampão.
Carregue as células em uma coluna de separação colocada em um separador magnético, que retém as células-tronco ligadas a microesferas enquanto outras células fluem.
Adicione um meio neuroesférico para eluir as células e transferi-las para uma microplaca. Incubar para induzir a formação de neuroesferas primárias, colônias auto-renovadoras de células-tronco.
Centrifugue e descarte o meio. Ressuspenda as neuroesferas em um meio contendo enzimas para digerir as proteínas de adesão celular.
Centrifugue e remova as enzimas. Adicione o meio neurosfera e dissocie mecanicamente as células.
Incubar para permitir a proliferação de células-tronco e a formação de neuroesferas secundárias, enquanto as células diferenciadas sem características de células-tronco não proliferam.
Transfira as neuroesferas para um meio de diferenciação e incuba, promovendo a diferenciação em ne
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