Registros eletrofisiológicos de neurônios reprogramados em uma fatia de cérebro de camundongo

0 visualizações • 2:14 min. • July 8th, 2025

Pegue uma fatia coronal de camundongo geneticamente modificado imobilizado em uma câmara de gravação perfundida com tampão oxigenado.

A fatia contém a região estriada, que possui interneurônios reprogramados a partir de células precursoras de oligodendrócitos marcadas por um marcador de interneurônio e expressão de proteína fluorescente.

Monte uma pipeta de registo constituída por um eléctrodo imerso numa solução intracelular.

Identifique microscopicamente um interneurônio fluorescente.

Mantenha uma pressão positiva na pipeta e avance-a em direção ao interneurônio alvo, entrando em contato com a membrana.

Aplique pressão negativa para formar uma vedação de alta resistência.

Aplique pulsos de pressão negativa para quebrar a membrana, estabelecendo uma configuração de célula inteira.

Mantenha o potencial de membrana do interneurônio em um valor negativo constante.

Aplique breves correntes incrementais, abrindo os canais iônicos e alterando o potencial de membrana, desencadeando um potencial de ação.

Eventualmente, a membrana retorna ao potencial de repouso.

Observe essas mudanças no potencial de membrana em resposta à injeção atual, indicando maturação neuronal e reprogramação bem-su

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