Veia Interposição Modelo: Um modelo adequado para estudar Bypass Graft Perviedade

O objetivo geral deste procedimento é estudar a perviedade da ponte de safena em um modelo de interposição de veias de rato. Este método pode ajudar a responder a questões-chave no campo da cirurgia de bypass, como o caminho subjacente dos processos biológicos e fisiológicos durante a oclusão do bypass. A principal vantagem dessa técnica é que o procedimento cirúrgico é fácil e rápido, o que pode ser usado para estudar novas terapêuticas e tratos in vivo.

Demonstrando a técnica estará Grigol Tediashvili, um microcirurgião do nosso laboratório. Antes da cirurgia, verifique se há uma profundidade suficiente de anestesia beliscando as patas traseiras do rato e verificando a ausência de reflexos. Em seguida, aplique um pouco de pomada veterinária nos olhos para evitar o ressecamento durante a anestesia.

Em seguida, abra as patas traseiras e fixe sua posição usando fita adesiva. Em seguida, raspe o cabelo inguinal com um aparador de cabelo, seguido de uma ampla desinfecção da área com iodopovidona seguido de álcool a 80%. Repita essas esfregações alternadas um total de três vezes.

Agora, sob um microscópio, faça uma incisão vertical ao longo da linha inguinal. Em seguida, use duas pinças para separar suavemente os tecidos subcutâneos e exponha a veia epigástrica superficial até sua origem na veia femoral. Faça isso com muito cuidado, pois a veia é frágil.

Em seguida, interrompa o fluxo sanguíneo através da veia epigástrica superficial usando duas pinças. Agora, colha um segmento da veia. Levante cuidadosamente a veia isolada e corte o vaso usando uma microtesoura.

Em seguida, coloque o segmento da veia em gaze estéril. Lá, deslize cuidadosamente uma agulha de calibre 30 em uma extremidade e lave a veia com heparina. Em seguida, transfira a veia para 1% de lidocaína e mantenha-a no gelo para evitar espasmos.

Agora, eutanasiar o rato doador aumentando a anestesia para 5% de isoflurano. Em seguida, na preparação para as anastomoses, prepare o rato receptor da mesma forma que o rato doador até a etapa de barbear. Após dois a três minutos de isoflurano a 5%, abra o abdômen do rato doador ao longo da linha alba, corte o diafragma e remova o coração para interromper a circulação.

Continue preparando o rato receptor para a cirurgia. Depile o lado medial das pernas com um aparador de pêlos e desinfete a pele com três esfoliações alternadas de iodopovidona e etanol a 80%. Antes de prosseguir, faça outra pinça do dedo do pé para monitorar a anestesia.

Agora, faça uma incisão femoral mediana do joelho até a prega inguinal. Sob o microscópio, use duas pinças para separar a artéria femoral de seus arredores. Em seguida, use dois micro grampos para interromper o fluxo sanguíneo, colocando o grampo proximal primeiro.

Em seguida, corte um pequeno segmento da artéria femoral pinçada e descarte-o. Encurte o coto arterial restante para deixar uma lacuna de um a dois milímetros maior que o enxerto da veia. Em seguida, lave o coto arterial com heparina de uma agulha de calibre 30.

Se a adventícia se projetar um pouco além do coto do vaso, use uma pinça para puxar a adventícia levemente sobre a extremidade do vaso e, em seguida, remova um pedaço de adventícia. Agora, coloque o segmento da veia colhida entre os cotos arteriais na orientação correta e ajuste o tamanho da lacuna para um bom ajuste. Agora, execute a anastomose proximal primeiro usando sutura de prolene 10-0.

Comece suturando cada lado lateral e, em seguida, adicione mais três suturas ao lado ventral. Terminar com três pontos no lado dorsal. Em seguida, conecte os vasos distais usando a mesma técnica, começando com uma sutura em cada lado lateral, seguida por três suturas no lado ventral e terminando no lado dorsal.

Depois de completar as anastomoses, carregue duas seringas de um mililitro com os componentes da cola de fibrina. Em seguida, levante cuidadosamente o enxerto com uma pinça e aplique aproximadamente 100 microlitros do componente um sob o enxerto, seguido por 100 microlitros do componente dois. Os dois componentes devem ser sempre adicionados nos mesmos volumes.

Agora, coloque o enxerto de volta em sua posição e aplique 100 microlitros de cada componente sobre o enxerto para cobrir completamente o enxerto e a anastomose. Isso evita a insuficiência anastomótica e a hiperdistensão do enxerto venoso. Agora, abra cuidadosamente os grampos começando com o grampo distal.

Em seguida, confirme uma cirurgia bem-sucedida verificando se há pulso visível na veia transplantada e na artéria distal do enxerto. Antes de fechar a pele, remova qualquer excesso de cola que possa impedir o fechamento. Em seguida, feche as camadas da pele usando suturas de prolene 5-0

Antes que o rato acorde, injete quatro a cinco miligramas de carprofeno por quilograma por via subcutânea. Fique de olho no animal até que ele recupere a consciência suficiente para manter a decúbito esternal. Em seguida, dê ao rato uma gaiola doméstica sem outros animais.

Nos próximos três dias, forneça metamizol na água potável e verifique a recuperação do rato diariamente. Uma vez totalmente recuperado, o rato pode ser alojado com outros ratos. Os animais se recuperaram bem da cirurgia e apresentaram excelente condição física no pós-operatório.

A integração bem-sucedida da veia na artéria femoral e a perviedade do enxerto após o transplante foram confirmadas de forma não invasiva usando ultrassonografia duplex. Ao transplantar a veia de um rato luke-positivo para um rato luke-negativo, a imagem de bioluminescência foi usada para monitorar a presença do enxerto. Verificou-se que a hiperplasia miointimal se desenvolve progressivamente no enxerto ao longo do tempo.

A coloração histológica com tricrômico de Masson demonstra formação miointimal dentro da lâmina elástica interna. Para confirmar que o modelo reproduz a dinâmica da hiperplasia miointimal, a obliteração luminal foi medida. Observou-se uma perda gradual da perviedade do enxerto de sete dias a 28 dias após a cirurgia, o que se encaixa perfeitamente no modelo.

Uma vez dominada, essa técnica pode ser feita em 20 minutos se for executada corretamente. Obrigado por assistir e boa sorte com seus experimentos.