Imagem de imunofluorescência multiplex baseada em código de barras de DNA para analisar amostras FFPE de melanoma murino geneticamente reprogramado

Apresentamos um protocolo para desenvolver e validar um painel de imunofluorescência multiplex para estudar tecidos FFPE de camundongos e demonstrar sua utilidade estudando amostras de um modelo de melanoma tratado com nanopartículas que fornecem DNA plasmático, codificando sinais imunológicos para reprogramar o microambiente tumoral. O campo estava faltando protocolos de imunofluorescência multiplex rigorosamente desenvolvidos e validados compatíveis com tecidos FFPE fixados em formalina de camundongo e embebidos em parafina.

A inclusão de parafina fixada em formalina preserva a morfologia do tecido a longo prazo, é fácil de manusear e armazenar e permite a criação de microarrays de tecido para visualização de várias amostras em uma única lâmina.