オートクレーブの適切な使用

Lab Safety

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Overview

ロバート ・ m ・ Rioux ・ Zhifeng 陳、ペンシルバニア州立大学、大学公園、PA

オートクレーブは除染の目的のための研究室で最もよく使用される方法の 1 つ。オートクレーブ付きの染最も一般的な項目は、生体試料 (通常これらの微生物を含んでいる) にお問い合わせください。オートクレーブは、読み込まれた材料で現在の微生物を殺すために高温高圧蒸気を利用して動作します。十分な蒸気の流れと熱伝達は、包装材料を検討する重要な原則である非常に効率的なオートクレーブに不可欠です。ときオートクレーブ高圧および温度のための操作に従事をも考慮すべき安全性のニーズ材料対応包装、読み込み、およびアンロードの材料の特別な注意を必要とする可能性があります制限を設定します。.

Cite this Video

JoVE Science Education Database. 研究室の安全. オートクレーブの適切な使用. JoVE, Cambridge, MA, (2018).

Principles

オートクレーブ滅菌 (121 ° C) 高温除染を達成するために、少なくとも 30 分間の高圧蒸気 (少なくとも 15 psi) を利用しています。それは、過酷な条件下で細胞を脱水によって微生物を殺します。排気量は、負荷の性質に依存します。乾燥固体材料の高速排気サイクルをアクセスできます。しかし、液体や生物学的廃棄物過熱液体沸騰しないように低速排気サイクルが必要です。インジケーター テープはオートクレーブに入れることの有効性を検証するために使われます。指標は、オートクレーブ (121 ° C) 温度要件を満たしている確認する熱敏感な化学マーキングを使用してによって動作します。インジケーター テープの色を変更する色の変更負荷がない除染を示すに対し、効果的なオートクレーブを意味します。しかし、使用しないインジケーター テープ唯一の情報源として、除染の証拠のテープか、微生物が殺されるかどうかは反映されませんので、オートクレーブの温度要件を満たしている場合にのみ。労働条件はまた適している材料と安全上の懸念を提起する制限を設定します。原則として、簡単に燃焼、溶融、または高温高圧条件下で爆発する材料を避けてください。蒸気または熱湯でやけどを避けるためのオートクレーブを積みおろしするとき注意してください。十分な除染を成し遂げるためには、包装するとき十分な伝熱とオートクレーブ バッグと材料内の流れがあることを確認します。

Procedure

1。 着用適切な個人保護装置 (PPE)

高圧および温度条件のオートクレーブ滅菌中に発生した潜在的な熱燃焼または爆発上のリスクをもたらします。適切な PPE を含む閉鎖つま先の靴、耐熱手袋、安全メガネ研究室コートこれらは、オートクレーブから材料を出し入れするときに着用する必要があります。液体試料を扱う場合、着用追加 PPE は、エプロンと顔シールド

2 します読み込まれる材料の準備

  1. オートクレーブ対応材料の識別とオートクレーブ互換性のない材料
    オートクレーブを表しますが一般的に使用される、経済すべて除染法。材料は、オートクレーブ高圧と温度労働条件のために適しています。一般に、蒸発または高圧蒸気の下で溶融するすべての材料は、オートクレーブと互換性がないです。これは、有機溶媒、ポリスチレン、ポリエチレン、ステンレス鋼を除く金属など耐熱性の悪いプラスチックのような材料が含まれています。決してオートクレーブ可燃性、腐食性、毒性、反応性、または放射性化学物質。オートクレーブ対応材料パイレックスを含めるまたはホウケイ酸ガラス、ポリプロピレン、ポリカーボネート、手袋、ステンレス鋼、ピペット チップ、紙 (オートクレーブ バッグの中に入れた)、およびメディア ソリューション型します
  2. 包装材
    オートクレーブ対応材料を特定した後適切な包装も重要ですこれにより、安全性と効率的なオートクレーブに入れること。ここでは基本的な原則、包装材料:
    1. ポリプロピレン ・ ステンレス鋼セカンダリ コンテナーを常に使用します
    2. 液体試料の ½ フル周りバイアルを満たしキャップ緩めたり通気式クロージャを使用します。2/3 以上完全にキャップが完全に締め容器を満たすことはできない
    3. は、ひびがないかどうかを確認するガラス容器を検査します。亀裂が指定されている場合は、適切な容器にガラスの処分します。決して オートクレーブ知られているガラス容器
    4. は、常にパッケージ廃棄物にオートクレーブ互換袋を使用します。袋表示テープを持つべきで、両端に袋の中の蒸気を許可するようにロードする前に開く必要があります
    5. は決して袋をオーバー ロードまたは十分な許可されるようにコンテナー蒸気の完全な殺菌の流れ。項目間のスペースを残しています
    6. ドン ' t ミックス互換性のない材料
    7. ゴミ袋で決して場所の鋭い項目

3。素材を読み込む

  1. オートクレーブをチェック ' する s の内部確認がない以前のユーザーから潜在的な危険です
  2. ドレインの良好な循環を許可する素材を読み込む前にお掃除します
  3. バッグが溶融を避けるためにオートクレーブの内部の壁に触れないでいることを確認します
  4. 液体と乾燥材料の別のサイクルを必要とする別にオートクレーブ養生する必要があります
  5. ドアをしっかりと閉める

4。オートクレーブの操作

  1. 訓練された人員だけによってオートクレーブを操作できます。操作プロトコルが異なるオートクレーブによって異なりますので、必要な場合は設備の説明書を参照してください
  2. オートクレーブ ドアを必ずしっかりと閉じた後オートクレーブ温度を 121 ° C に設定し、少なくとも 15 の psi の圧力を維持します
  3. オートクレーブ時間とサイクルを設定する次の要因を考慮しなければ:
    1. メーカーから装置の推奨 ' s マニュアルします
    2. 内の読み込まれている材料の種類: 乾燥または液体
    3. 素材の量が読み込まれます
    4. 形状と使用されるコンテナーのサイズ
    5. コンテナーおよび材料の導電率を熱します
    6. 除染の目的します

5。オートクレーブ材料のアンロード

  1. 上記のように適切な PPE を着用します
  2. 温度・ オートクレーブの圧力が安全な範囲に戻っていることを確認します
  3. 慎重にドアの後ろに立って部屋にオートクレーブ内任意の残りの蒸気を解放への扉を開きます
  4. 材料に蒸気や熱風をリリースする 10 分間立ってオートクレーブ内に閉じ込められた材料許可します
  5. は、オートクレーブから除去しながら任意の液体材料を振るか。かどうか、必要に応じてラベルとして熱を避けるために熱い材料に燃える人は可能性がある材料では、オートクレーブ最近されている事実を認識できない場合があります
  6. 材料研究室の内外で研究室を輸送する前に室温に冷却するを待ちます。両方のインスタンスを輸送するための適切な封じ込めを利用してください
  7. ユーザーの材料とオートクレーブ滅菌条件の詳細を記録 ' s ログ

オートクレーブは除染の目的のための研究室で最もよく使用される方法の 1 つ

多くの科学者、特に生物試料、滅菌の必要機器とメディア、およびオートクレーブとこれらの作業を提供材料を染する迅速かつ経済的な方法。彼らは、微生物を殺すために高温高圧蒸気を使用します。これらの極端な条件のためしかし、彼らする必要があります慎重に使用する

このビデオは、オートクレーブのしくみと、それらを正しく使用する方法について説明します

オートクレーブ、材料を少なくとも 15 p.s.i. の圧力下で摂氏 121 度の温度に蒸気で加熱少なくとも 30 分後これらの条件は脱水し、細胞を殺すため

のオートクレーブは、液体と固体の両方の材料を殺菌することができますが、異なる動作設定が考慮されなければなりません。液体は、フラッシュの沸騰を防ぐために、蒸気を排出する固体よりも長い時間を必要とします。さらに、液体材料の大きいボリュームを適切な温度にまで加熱する長い

いないすべての材料は、オートクレーブ内部の温度を耐えることができます。したがって、決してオートクレーブ溶け、やけど、何かが爆発、または蒸発する液体です。また、オートクレーブは、有害物質、放射性化学物質を行う

今、紹介しますオートクレーブ用のサンプルを準備する方法、1 つの運営方法

はまず、材料のオートクレーブと互換性のある容器と器具のみ使用されますを選択します。パイレックス、ホウケイ酸ガラス、ステンレス、ポリプロピレン、ポリカーボネートは、オートクレーブの使用ことができます

ピペット チップ ボックスなどの他の一般的なラボ材料、互換性があります。紙はオートクレーブ互換袋オートクレーブすることができます

固形廃棄物は、適切なバッグでオートクレーブできます。蒸気循環し、ネクタイを終了するを許可するようにこのバッグのスペースを残してください。最後に、オートクレーブに入れる前に蒸気を入力するを許可するように袋に小さな開口部を作成するを確認してください

水溶液およびその他の互換性のある液体試料は、ひびなしそのままコンテナーを使用します。コンテナーを埋める約半分フルと 3 分の 2 以上について

。液体の容器からガスを換気する

キャップを緩めます。キャップがない場合はオートクレーブ材料の汚染を防止するアルミ箔で緩くカバーします

は、ポリプロピレン ・ ステンレス鋼二次容器にすべての材料を入れ。オートクレーブする別々 の液体・固体材料。材料間のスペースを残して、コンテナーいっぱいになるしないでください

。最後に、すべてのマットにオートクレーブ テープの一部を添付して

手引。このテープには、十分な温度に到達すると黒くなります温度敏感なインジケーターがあります。

ときオートクレーブを使用して高温・高圧のリスクに対して保護するために適切な保護具を着用します。これには、標準的な PPE 安全眼鏡には、白衣と閉じてつま先の靴には耐熱手袋が含まれます。液体のサンプルを処理するときにエプロンと顔のシールドを使用します

オートクレーブで最初ドアを開き、内の任意の危険性をチェックします。液体を読み込み、異なるオートクレーブ サイクルが必要なので、別途、材料を乾燥します

溶解を防ぐために材料が壁に触れないでいることを確認します。材料の十分な間隔を保つことによって熱の良い流れを確認します。最後に、閉じてドアをシールします

異なるオートクレーブ異なる取扱があります。手動で温度と時間を設定することによってまたはプリセットのリストから選択することによって、サイクルを設定可能性があります。一般に、除染は、材料のタイプの推奨サイクルを使用します

サイクルの様々 な存在固体と液体のためだけでなく、素材やオートクレーブ処理する廃棄物の量が異なる。サイクルを実行するときは、少なくとも 121 の摂氏温度そして圧力少なくとも 15 psi、温度に達したことを確認

サイクルが終わった後、圧力がゼロに戻るし、オートクレーブが下がったことを確認します。慎重に残った蒸気を出すためドアを開きます。10 分放置、熱いガスを解放するために材料を許可します。オートクレーブ テープな黒のストライプする必要がありますか、または滅菌が行われる保証はありませんが、オートクレーブと言う

適切な PPE を着用しない任意の液体試料を振るようにして材料を削除します。発生した場合に、物質や他の特殊事情の種類を含む、ログであなたの使い方を注意してください。最後に、セキュリティで保護された領域または層流フードを冷却するために材料を転送します。

オートクレーブにゼウスの導入を見ただけ。今どのような材料をオートクレーブすることができます、それらを準備する方法、および計測器を安全に使用する方法を理解する必要があります。見てくれてありがとう!

Applications and Summary

化学物質や放射線の除染方法と比較して、オートクレーブは研究室で最も経済的で実用的な方法を表します。ただし、安全性の確保 (溶融を避ける、熱、火傷や爆発)、オートクレーブ対応材料を識別し、適切な包装、読み込み、およびアンロードを練習します。十分な除染効率を確保には、コンテナーまたはバッグ材料・ オートクレーブ内物質間に十分なスペースが必要です。メンテナンスと定期的なスケジュールでオートクレーブの検査はオートクレーブが正常に動作ことを確認するために必要な

References

  1. Autoclave Safety and Operation, 2015, Division of Research Safety, University of Illinois. at Autoclave Use, Environmental Health & Safety, Princeton University. atProper Use of a Steam Autoclave, 2016, Environmental Health & Safety, Arizona State University.
  2. Fact Sheet: Using Autoclaves Safely, Environmental Health & Safety, California State University, Los Angeles.
  3. Guideline for the Safe Use of Autoclaves, 2003, Environmental Health and Safety Service, University of Ottawa.

1。 着用適切な個人保護装置 (PPE)

高圧および温度条件のオートクレーブ滅菌中に発生した潜在的な熱燃焼または爆発上のリスクをもたらします。適切な PPE を含む閉鎖つま先の靴、耐熱手袋、安全メガネ研究室コートこれらは、オートクレーブから材料を出し入れするときに着用する必要があります。液体試料を扱う場合、着用追加 PPE は、エプロンと顔シールド

2 します読み込まれる材料の準備

  1. オートクレーブ対応材料の識別とオートクレーブ互換性のない材料
    オートクレーブを表しますが一般的に使用される、経済すべて除染法。材料は、オートクレーブ高圧と温度労働条件のために適しています。一般に、蒸発または高圧蒸気の下で溶融するすべての材料は、オートクレーブと互換性がないです。これは、有機溶媒、ポリスチレン、ポリエチレン、ステンレス鋼を除く金属など耐熱性の悪いプラスチックのような材料が含まれています。決してオートクレーブ可燃性、腐食性、毒性、反応性、または放射性化学物質。オートクレーブ対応材料パイレックスを含めるまたはホウケイ酸ガラス、ポリプロピレン、ポリカーボネート、手袋、ステンレス鋼、ピペット チップ、紙 (オートクレーブ バッグの中に入れた)、およびメディア ソリューション型します
  2. 包装材
    オートクレーブ対応材料を特定した後適切な包装も重要ですこれにより、安全性と効率的なオートクレーブに入れること。ここでは基本的な原則、包装材料:
    1. ポリプロピレン ・ ステンレス鋼セカンダリ コンテナーを常に使用します
    2. 液体試料の ½ フル周りバイアルを満たしキャップ緩めたり通気式クロージャを使用します。2/3 以上完全にキャップが完全に締め容器を満たすことはできない
    3. は、ひびがないかどうかを確認するガラス容器を検査します。亀裂が指定されている場合は、適切な容器にガラスの処分します。決して オートクレーブ知られているガラス容器
    4. は、常にパッケージ廃棄物にオートクレーブ互換袋を使用します。袋表示テープを持つべきで、両端に袋の中の蒸気を許可するようにロードする前に開く必要があります
    5. は決して袋をオーバー ロードまたは十分な許可されるようにコンテナー蒸気の完全な殺菌の流れ。項目間のスペースを残しています
    6. ドン ' t ミックス互換性のない材料
    7. ゴミ袋で決して場所の鋭い項目

3。素材を読み込む

  1. オートクレーブをチェック ' する s の内部確認がない以前のユーザーから潜在的な危険です
  2. ドレインの良好な循環を許可する素材を読み込む前にお掃除します
  3. バッグが溶融を避けるためにオートクレーブの内部の壁に触れないでいることを確認します
  4. 液体と乾燥材料の別のサイクルを必要とする別にオートクレーブ養生する必要があります
  5. ドアをしっかりと閉める

4。オートクレーブの操作

  1. 訓練された人員だけによってオートクレーブを操作できます。操作プロトコルが異なるオートクレーブによって異なりますので、必要な場合は設備の説明書を参照してください
  2. オートクレーブ ドアを必ずしっかりと閉じた後オートクレーブ温度を 121 ° C に設定し、少なくとも 15 の psi の圧力を維持します
  3. オートクレーブ時間とサイクルを設定する次の要因を考慮しなければ:
    1. メーカーから装置の推奨 ' s マニュアルします
    2. 内の読み込まれている材料の種類: 乾燥または液体
    3. 素材の量が読み込まれます
    4. 形状と使用されるコンテナーのサイズ
    5. コンテナーおよび材料の導電率を熱します
    6. 除染の目的します

5。オートクレーブ材料のアンロード

  1. 上記のように適切な PPE を着用します
  2. 温度・ オートクレーブの圧力が安全な範囲に戻っていることを確認します
  3. 慎重にドアの後ろに立って部屋にオートクレーブ内任意の残りの蒸気を解放への扉を開きます
  4. 材料に蒸気や熱風をリリースする 10 分間立ってオートクレーブ内に閉じ込められた材料許可します
  5. は、オートクレーブから除去しながら任意の液体材料を振るか。かどうか、必要に応じてラベルとして熱を避けるために熱い材料に燃える人は可能性がある材料では、オートクレーブ最近されている事実を認識できない場合があります
  6. 材料研究室の内外で研究室を輸送する前に室温に冷却するを待ちます。両方のインスタンスを輸送するための適切な封じ込めを利用してください
  7. ユーザーの材料とオートクレーブ滅菌条件の詳細を記録 ' s ログ

オートクレーブは除染の目的のための研究室で最もよく使用される方法の 1 つ

多くの科学者、特に生物試料、滅菌の必要機器とメディア、およびオートクレーブとこれらの作業を提供材料を染する迅速かつ経済的な方法。彼らは、微生物を殺すために高温高圧蒸気を使用します。これらの極端な条件のためしかし、彼らする必要があります慎重に使用する

このビデオは、オートクレーブのしくみと、それらを正しく使用する方法について説明します

オートクレーブ、材料を少なくとも 15 p.s.i. の圧力下で摂氏 121 度の温度に蒸気で加熱少なくとも 30 分後これらの条件は脱水し、細胞を殺すため

のオートクレーブは、液体と固体の両方の材料を殺菌することができますが、異なる動作設定が考慮されなければなりません。液体は、フラッシュの沸騰を防ぐために、蒸気を排出する固体よりも長い時間を必要とします。さらに、液体材料の大きいボリュームを適切な温度にまで加熱する長い

いないすべての材料は、オートクレーブ内部の温度を耐えることができます。したがって、決してオートクレーブ溶け、やけど、何かが爆発、または蒸発する液体です。また、オートクレーブは、有害物質、放射性化学物質を行う

今、紹介しますオートクレーブ用のサンプルを準備する方法、1 つの運営方法

はまず、材料のオートクレーブと互換性のある容器と器具のみ使用されますを選択します。パイレックス、ホウケイ酸ガラス、ステンレス、ポリプロピレン、ポリカーボネートは、オートクレーブの使用ことができます

ピペット チップ ボックスなどの他の一般的なラボ材料、互換性があります。紙はオートクレーブ互換袋オートクレーブすることができます

固形廃棄物は、適切なバッグでオートクレーブできます。蒸気循環し、ネクタイを終了するを許可するようにこのバッグのスペースを残してください。最後に、オートクレーブに入れる前に蒸気を入力するを許可するように袋に小さな開口部を作成するを確認してください

水溶液およびその他の互換性のある液体試料は、ひびなしそのままコンテナーを使用します。コンテナーを埋める約半分フルと 3 分の 2 以上について

。液体の容器からガスを換気する

キャップを緩めます。キャップがない場合はオートクレーブ材料の汚染を防止するアルミ箔で緩くカバーします

は、ポリプロピレン ・ ステンレス鋼二次容器にすべての材料を入れ。オートクレーブする別々 の液体・固体材料。材料間のスペースを残して、コンテナーいっぱいになるしないでください

。最後に、すべてのマットにオートクレーブ テープの一部を添付して

手引。このテープには、十分な温度に到達すると黒くなります温度敏感なインジケーターがあります。

ときオートクレーブを使用して高温・高圧のリスクに対して保護するために適切な保護具を着用します。これには、標準的な PPE 安全眼鏡には、白衣と閉じてつま先の靴には耐熱手袋が含まれます。液体のサンプルを処理するときにエプロンと顔のシールドを使用します

オートクレーブで最初ドアを開き、内の任意の危険性をチェックします。液体を読み込み、異なるオートクレーブ サイクルが必要なので、別途、材料を乾燥します

溶解を防ぐために材料が壁に触れないでいることを確認します。材料の十分な間隔を保つことによって熱の良い流れを確認します。最後に、閉じてドアをシールします

異なるオートクレーブ異なる取扱があります。手動で温度と時間を設定することによってまたはプリセットのリストから選択することによって、サイクルを設定可能性があります。一般に、除染は、材料のタイプの推奨サイクルを使用します

サイクルの様々 な存在固体と液体のためだけでなく、素材やオートクレーブ処理する廃棄物の量が異なる。サイクルを実行するときは、少なくとも 121 の摂氏温度そして圧力少なくとも 15 psi、温度に達したことを確認

サイクルが終わった後、圧力がゼロに戻るし、オートクレーブが下がったことを確認します。慎重に残った蒸気を出すためドアを開きます。10 分放置、熱いガスを解放するために材料を許可します。オートクレーブ テープな黒のストライプする必要がありますか、または滅菌が行われる保証はありませんが、オートクレーブと言う

適切な PPE を着用しない任意の液体試料を振るようにして材料を削除します。発生した場合に、物質や他の特殊事情の種類を含む、ログであなたの使い方を注意してください。最後に、セキュリティで保護された領域または層流フードを冷却するために材料を転送します。

オートクレーブにゼウスの導入を見ただけ。今どのような材料をオートクレーブすることができます、それらを準備する方法、および計測器を安全に使用する方法を理解する必要があります。見てくれてありがとう!

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