Administration composée II

Lab Animal Research

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Overview

source : Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR ; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Université de Notre Dame, IN

administration composée est souvent une partie intégrante d’une étude sur des animaux. Plusieurs facteurs doivent être évalués afin de s’assurer que le composé est livré correctement. La voie d’administration influe sur les mécanismes d’absorption. Les caractéristiques de la substance est présente (le pH, viscosité et concentration) peuvent dicter quelle voie d’administration est selected.1,2,3

Cite this Video

JoVE Science Education Database. Essentiel de la recherche sur les animaux de laboratoire. Administration composée II. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

les deux routes principales d’administration sont par voie entérale (par l’intermédiaire du tube digestif) et par voie parentérale (administré à l’extérieur de l’appareil digestif). Le choix de la voie d’administration est principalement déterminé par les exigences de l’étude. Le principal avantage de dosage par voie parentérale est que le composé ne subisse pas de métabolisme hépatique, ce qui entraîne une biodisponibilité supérieure. Cependant, il y a beaucoup de protocoles expérimentaux nécessitant les composés devant être administré par voie orale pour mieux imiter l’apport naturel d’une substance. Le meilleur itinéraire à utiliser est déterminé par les propriétés de la substance d’essai.

dosage oral est la méthode la plus utilisée d’administration des médicaments chez l’humain. Cela se fait avec les comprimés, capsules ou formes liquides de médicaments. Comprimés et gélules administration est impossible chez les rongeurs, donc le dosage oral commun pour souris et rats s’effectue soit dissoudre le composé dans l’eau potable, à l’aide d’aliments spécialisés qui intègre la substance dans la formule d’essai, ou en plaçant le composé de friandises. Lorsque des doses par l’eau potable, le saccharose est souvent ajouté à l’eau pour améliorer la sapidité. Toutefois, il doit être finement équilibré afin d’encourager la prise d’eau normale et pas trop boire en raison de la saveur sucrée.

de nombreuses études ont démontré que répété gavage oral est stressant pour les souris et les rats . 4,5, c’est aussi la main-d'oeuvre intensive pour le personnel de soins aux animaux. Il y a l’alimentation disponible dans le commerce qui a généralement dosés composés tels que le fenbendazole, qui est utilisée pour éliminer les parasites chez les rongeurs-incorporé dedans. Autres sociétés offrent des gâteries médicamenteux contenant des antibiotiques, antiparasitaires, anti-inflammatoires et analgésiques. Aliments pour animaux entreprises qui fabriquent les diètes formulées pour souris et rats créera des régimes d’essai spécialisé pour répondre à une exigence expérimentale. De nombreux laboratoires ont formulé leurs propres friandises avec l’utilisation du miel, de beurre d’arachide ou de gélatine à saveur de fruits. 4,5

oral dosage manque de précision, car l’absorption d’un composé est tributaire de l’acceptation de la nourriture ou l’eau, la stabilité du composé et le nombre d’animaux présent dans la cage. Toutefois, si le dosage exact n’est pas critique pour l’expérience, cette méthode non invasive de dosage est préférable pour le bien-être des animaux.

gavage oral est une méthode beaucoup plus précise de l’administration par voie entérale, car il permet pour le dépôt des composés directement dans l’estomac de l’animal, à un moment précis et à un volume déterminé. Cependant, formation est nécessaire pour assurer le succès. La restriction appropriée de l’animal est cruciale pour le succès de cette technique. Lésion de la cavité buccale, pharynx, larynx, trachée, œsophage et estomac peut résulter de mauvais positionnement de la tête et le corps. L’animal doit être fermement saisi, telle que la tête ne parvient pas à se tordre, pour empêcher de telles blessures.

aiguilles de dosage sont disponibles dans les formats réutilisables ou jetables. Bien que coûteuse, l’utilisation d’aiguilles jetables supprime le risque de contamination croisée lorsque plusieurs animaux de dosage. Il existe plusieurs tailles d’aiguilles de gavage, allant de 20-22 calibre pour la souris et le calibre de 18-20 pour les rats. Le choix de l’aiguille est déterminé par la taille de l’animal, le volume de liquide et la viscosité de la solution qui serait administré.

gavage oral doit être effectuée sur un animal conscient pour diminuer la possibilité de placer l’aiguille dans la trachée. Un animal qui a conscient conservera le réflexe de déglutition ainsi que le réflexe nauséeux, facilitant le positionnement correct dans le œsophage. Une étude a été réalisée démontrent que recouvrant l’aiguille de gavage avec saccharose induit le réflexe de déglutition et diminution de la quantité de temps nécessaire pour passer l’aiguille dans le œsophage. 6

un agent topique qui est placé directement sur la surface de la peau est généralement destiné à affecter uniquement la zone à laquelle elle est appliquée. Ceux-ci peuvent être des crèmes, lotions, onguents, mousses ou gels. Car animaux aura tendance à toiletter la zone où l’agent est appliqué, on doit considérer la toxicité de la consommation orale.

composés administrés par voie topique sont formulés pour être absorbé par les couches du derme et de l’espace sous-cutané via les follicules pileux et les glandes accessoires. Les facteurs qui affectent l’absorption des composés incluent l’état de la peau, la surface utilisée, la concentration de la substance, la solubilité dans les lipides du composé et la longueur du temps, il est en contact avec la surface de la peau. Une peau bien hydratée et minces couches vont diminuer le temps d’absorption.

lorsque vous appliquez une substance par voie topique, il est la chance pour une absorption systémique due à l’animal de la zone de toilettage. Des mesures préventives doivent être prises pour éviter l’ingestion de l’accident ou à une élimination rapide de la substance. Petits colliers ou boucliers sont disponibles pour empêcher l’animal d’atteindre touchés parties du corps. Habitat individuel peut aussi devoir empêcher allotoilettage de compagnons de cage.

Procedure

1. application topique

  1. avant d’appliquer des onguents et crèmes, retirez toutes les fourrures de la zone par l’utilisation d’une crème dépilatoire ou en se rasant.
  2. Nettoyez et séchez la peau.
  3. Appliquer la substance directement sur la peau avec un coton-tige ou via une goutte directement placés pour éviter le contact par le technicien.
  4. Pour de meilleurs résultats, appliquer plusieurs couches minces de pommade ou de crème s’opposé à une demande renouvelée d’une épaisse couche.
  5. Appliquer le liquide en séparant les cheveux et en appliquant une goutte d’eau sur la peau exposée.
  6. Lorsque vous appliquez une substance par voie topique, il y a une chance d’absorption systémique due à l’animal de la zone de toilettage. Des mesures préventives doivent être prises pour éviter l’ingestion de l’accident ou à une élimination rapide de la substance. Petits colliers ou boucliers sont disponibles pour empêcher l’animal d’atteindre touchés parties du corps. Habitat individuel peut aussi devoir empêcher allotoilettage de compagnons de cage.

Figure 1
figure 1. L’application topique chez les souris.

2. dosage oral

  1. lorsqu’ils fournissent des composés d’animaux dans l’alimentation ou l’eau, on doit calculer une dose minimale quotidienne selon le poids corporel. Le poids moyen de la souche de souris ou de rats utilisé dans l’expérience peut être utilisé pour faire les calculs, à moins qu’il est précisé que chaque animal être évaluée et la dose pensé pour chaque individu.
  2. Pour les protocoles qui nécessitent qu’un apport alimentaire et/ou d’eau être mesuré avec précision, animaux doivent être hébergés individuellement.
  3. D’alimentation spécialisées ou friandises peuvent être fabriqués pour répondre aux besoins expérimentaux.
    1. Remplacer le régime standard avec celle formulée, qui permet aux animaux d’ingérer le composé tout au long de la journée.
    2. L’aliment peut alors être remplacé plus souvent que la norme alimentaire en raison de l’instabilité composée.
  4. Substances peuvent aussi être administrés en les dissolvant dans l’eau potable, permettant les animaux à recevoir un composé tout au long de la journée
    1. une petite quantité de sucre est ajoutée à l’eau pour la rendre acceptable. Le montant exact à ajouter dépend de l’acceptation de l’eau par les souris. Utilisez la plus petite possible increment.
    2. La fréquence de changement de l’eau dépend de la stabilité du composé. Certaines substances peuvent être sensibles à la lumière ou précipitée au fil du temps.

3. Procédure de gavage

calibre 20-25 x 1.5 po aiguilles droites ou courbes de dosage sont utilisés pour les souris. Pour les rats, calibre 18-20 x 2-3 aiguilles en droite ou courbes dosage sont utilisés. Ils sont disponibles, comme les aiguilles réutilisables en acier inoxydable ou une aiguilles jetables. Les aiguilles jetables peuvent avoir un manche en plastique métal lourd ou flexible avec un embout silicone.

  1. Joindre l’aiguille dosage à une seringue sélectionnée basée sur le volume et la viscosité de la solution d’essai. Pour le dosage des liquides épais, une seringue à embout Luer lock est préférée. Ce sont généralement disponibles en commençant par un 3 taille de cc qui a 100 µl graduations. C’est peut-être pas adapté pour les petits volumes ou lorsqu’il y a un besoin pour les volumes de la dose exacte à de plus petits incréments.
  2. Fixer la seringue à l’aiguille, tels que les graduations sur le Canon peuvent être lu sans faire tourner l’aiguille. Une fois que l’aiguille a été placé dans le œsophage, toute rotation peut se rompre à le œsophage, causant la mort de l’animal.
  3. Remplir une seringue avec le volume approprié de l’article qui serait administré (volume optimal = volume de 5 ml/kg et maximum = 20 ml/kg) 4
  4. Le dispositif de retenue approprié est essentiel pour cette procédure. 7
    1. restreindre manuellement des souris en agrippant la peau à la base de la tête et scruffing eux. Il est important que l’organisme tiendra telle qu’elle est suspendue dans une ligne droite de la tête à la queue. Toute torsion du corps n’entravera le placement de l’aiguille de gavage dans le œsophage.
    2. Saisir la peau du cou étroitement afin que la tête a mouvement minimal de côté à l’autre. L’arrière-train doit être stabilisé pour empêcher la rotation du corps.
    3. De gavage un rat, saisissez-le sur les épaules à l’aide de l’index et le majeur de chaque côté du cou et la paume sur l’animal ' dos. Le pouce, troisième et quatrième doigts doivent encercler la poitrine pour empêcher les animaux de pouvoir aller de l’avant ou vers l’arrière. La position des doigts sur chaque côté du cou empêchera le rat de tourner sa tête.
    4. Il est important que le corps soit en ligne droite et pas tordus pour aider à la mise en place de l’aiguille de gavage sans dommage à la bouche, du pharynx, oesophage ou estomac.
    5. S’assurer que la tête n’a pas de mouvement excessif de côté à l’autre.
    6. Postérieurs peut-être être stabilisées pour éviter la rotation du corps. Ceci est accompli en autorisant les pattes arrières pour se reposer sur le dessus de comptoir ou cage.
  5. Administration de la substance
    1. la Position de l’aiguille avec la courbe vers le bas et en ligne avec la courbe naturelle du cou. Introduire l’aiguille dans la bouche du côté droit ou gauche, entre les incisives et les molaires à un angle vers l’arrière du pharynx.
    2. Une fois que l’aiguille se trouve dans la cavité buccale, inclinez la tête à l’aide de l’aiguille de gavage jusqu'à ce que le nez est pointé vers le haut. Ceci est particulièrement important lorsque vous utilisez des aiguilles droites. L’aiguille doit glisser facilement dans le œsophage. Ne forcez pas l’aiguille vers le bas. Si une résistance se fasse sentir, régulariser l’aiguille, puis réessayez.
    3. Une fois que l’aiguille est en position dans l’estomac, délicatement déposer le composé.
    4. Retirer l’aiguille, en vous assurant qu’aucune rotation d’une aiguille courbe ne se déroule.
    5. Si l’animal commence à lutter, retirer l’aiguille de dosage et empêcher l’animal plus solidement.
    6. Tout en effectuant la procédure, si l’animal montre des signes de cyanose ou de détresse respiratoire, ou s’il y a des solution qui coule de sa bouche, le dosage de l’aiguille doit être immédiatement retiré et l’animal dans sa cage.
    7. En général, lorsque le gavage de rats et les souris en particulier avec une substance caustique, il est recommandé d’abord offrir une petite quantité – pour tester la toux – avant tout le volume est donné. De cette façon, si l’aiguille est mal positionnée, le volume livré aux poumons est faible et que l’animal a une meilleure chance à récupération.

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Figure 2. Gavage par voie orale chez la souris (à gauche) et les rats (à droite).

nombreuses expériences exigent qu’un composé administré à un animal sur une voie orale ou topique, afin que la méthode imite mieux l’apport naturel de la substance expérimentale.

Pour administration par voie orale, le composé peut être dissous dans l’eau potable ou incorporé dans les aliments que les animaux consomment. Un autre, plus précise la méthode de dosage oral est gavage oral dans lequel une grande aiguille est utilisée pour placer le composé directement dans l’estomac. En revanche, un agent topique peut être placé directement sur la surface de la peau et est généralement destiné à affecter uniquement la zone à laquelle elle est appliquée. Chacune de ces stratégies a les avantages et les limites, que nous allons dans cette vidéo. Après que nous allons démontrer comment effectuer ces techniques administration composé dans animaux de laboratoire et certaines de leurs applications.

avant de plonger dans les protocoles, passons en revue les considérations, les avantages et les lacunes de ces techniques. Administration par voie orale avec des comprimés, capsules ou liquide, c’est la plus couramment utilisée la méthode d’administration des médicaments chez l’humain. Cependant, les comprimés et les capsules sont impraticable pour les rongeurs, donc le dosage oral commun est réalisé en dissolvant le composé dans l’eau potable ou la nourriture.

Lorsque les doses par boire de l’eau, le saccharose est souvent ajouté à l’eau pour améliorer la sapidité. Toutefois, il doit être finement équilibré afin d’encourager la prise d’eau normale et pas trop boire en raison de la saveur sucrée. Une bonne règle est de commencer avec une solution de 10 % de sucrose et ensuite régler en fonction de l’apport. Une autre consiste à dose par voie orale l’animal par les aliments spécialisés. Il y a des aliments disponibles dans le commerce qui a dosée communément composés, tels que le fenbendazole, incorporé dedans. Les rongeurs de l’alimentation peuvent également créer des régimes d’essai spécialisé pour répondre à une exigence expérimentale.

Les avantages avec cette forme d’administration par voie orale sont qu’il est non invasif, administre le composé en permanence et imite l’administration de médicament par voie orale humaine. Cependant, il manque de précision car apport composé est tributaire de l’acceptation de la nourriture ou l’eau, la stabilité du composé et le nombre d’animaux présents dans la cage. Si le dosage exact n’est pas critique pour l’expérience, cette méthode non invasive est préférable pour le bien-être des animaux.

Pour administration orale plus précise, on peut utiliser le gavage oral, qui dépose le composé directement dans l’estomac, à un moment précis et à un volume déterminé. Toutefois, une formation adéquate est nécessaire pour réaliser cette technique car les graves dommages à l’animal peuvent se produire si elles ne sont pas bien attachés.

Venant d’agents topiques, ceux-ci incluent des crèmes, lotions, onguents, aérosols et gels. En général, les agents topiques visent à affectent uniquement la zone à laquelle ils sont appliqués. Toutefois, ils peuvent aussi être absorbés dans la circulation sanguine, ce qui peut être volontaire ou involontaire. Cette absorption dépend : la condition de la peau, la surface utilisée, la concentration de la substance, la durée de contact et la solubilité dans les lipides de l’agent.

maintenant que nous avons discuté de l’arrière-plan des modes d’administration par voie orale et topique, nous allons apprendre les protocoles commençant par administration orale via la nourriture ou l’eau.

Pour le dosage des calculs, vous devez d’abord connaître la dose voulue pour être administré. Deuxièmement, vous devez déterminer le poids du corps. Au lieu de pesage des animaux individuels, vous pouvez utiliser le poids moyen de la souche de souris ou de rats pour vos calculs, sauf indication contraire. Troisièmement, vous devez être conscient du nombre d’animaux par cage, et Quatrièmement, il faut savoir la consommation quotidienne moyenne en eau ou la nourriture par cage.

N’oubliez pas, l’aliment formulé ou l’eau potable avec les composés dissous auront besoin d’être remplacées plus fréquemment que la norme alimentaire ou de l’eau en raison de l’instabilité composée. Certains composés peuvent être sensibles à la lumière ou peut précipiter au fil du temps.

maintenant, nous allons apprendre à administrer par voie orale des doses précises en effectuant le gavage oral chez les souris et les rats.

Première étape consiste à sélectionner une aiguille appropriée pour la procédure. Ceux-ci sont soit réutilisable composé d’acier inoxydable ou jetable avec une antenne en plastique souple en silicone et l’arbre. Pour les souris, 20-25 calibre droites ou courbes aiguilles de dosage qui font 1,5 pouces de longueur sont appropriés. Pour les rats, sélectionnez 18-20 jauge droite ou courbe dosage aiguilles qui sont 2-3 pouces de long. L’aiguille de bon calibre et une seringue de sélection dépend aussi de volume et de la viscosité. Examiner l’Administration composé j’ai vidéo pour comprendre l’impact de ces facteurs. Pour le dosage des liquides épais, une seringue à embout Luer lock est préférable.

Après avoir effectué la sélection, apposer la seringue à l’aiguille, tels que les graduations sur le Canon peuvent être lu sans faire tourner l’aiguille. Ceci est important car une fois que l’aiguille a été placé dans le œsophage toute rotation peut se rompre la paroi oesophagienne, entraînant la mort de l’animal. Ensuite, remplissez la seringue avec le volume de la solution qui serait administré.

Cette méthode doit toujours être effectuée sur des animaux conscients avec des réflexes de déglutition intacts afin d’éviter un placement accidentel dans la trachée. En utilisant la technique de retenue approprié est essentiel pour cette procédure. Pour souris, saisir la peau à la base de la tête et la peau du cou serré. Cela garantit que la tête a un minimum occasion pour mouvement gauche-droite. En outre, assurez-vous que le corps est suspendu dans une ligne droite de la tête à la queue ; toute torsion n’entravera le placement de l’aiguille de gavage dans le œsophage. L’arrière-train doit être également stabilisée pour éviter la rotation du corps.

Pour retenir un rat, saisissez-le sur les épaules à l’aide de l’index et le majeur de chaque côté du cou. Cela empêchera le rat de tourner sa tête d’un côté à l’autre. Le pouce, troisième et quatrième doigts entourent la poitrine pour empêcher l’animal de se déplacer vers l’avant ou vers l’arrière.

Une fois que vous avez bien attaché à l’animal, placez l’aiguille avec la courbe du côté vers le bas et conforme à la courbe naturelle du cou. Ensuite, introduire l’aiguille dans la bouche du côté droit ou gauche, par le biais de la diastemata et entre les incisives et les molaires à un angle vers l’arrière du pharynx. Maintenant que l’aiguille est placée dans la cavité buccale, utilisez-le pour incliner la tête vers l’arrière jusqu'à ce que le nez est pointé vers le haut. À ce stade, l’aiguille doit glisser facilement dans le œsophage. Une fois que l’aiguille est placée dans l’estomac, délicatement déposer le composé. Ensuite, retirer l’aiguille de l’animal, prenant soin de ne pas faire tourner. Il est important de ne pas forcer l’aiguille vers le bas. Si vous vous sentez une résistance quelconque, enlevez-le et essayez à nouveau. Lors de l’exécution de la procédure, si l’animal montre des signes de cyanose ou de détresse respiratoire ou si il y a des solution qui coule de sa bouche, le dosage de l’aiguille doit être immédiatement retiré et l’animal doit être relâché dans sa cage.

Enfin, passons en revue les procédures d’administration topique chez les animaux de laboratoire. Commencez par anesthésier l’animal. Cela se fait couramment à l’aide d’une action inhalant, rapide qui permet une rapide récupération animale. Pour plus de détails sur l’administration de l’anesthésie, s’il vous plaît voir une autre vidéo de cette collection.

Ensuite, à l’aide d’une tondeuse à cheveux supprimer toutes les fourrures de la zone d’application. Pour éviter toute coupure, placer la surface plane de la tondeuse contre la peau et raser dans le sens opposé à celui de la croissance des cheveux. Ensuite, nettoyez la peau avec de l’eau et sécher avec une compresse de gaze. Maintenant, à l’aide d’un coton-tige, appliquez la substance directement sur la peau. Pour de meilleurs résultats, appliquer plusieurs couches minces de pommade ou de crème, par opposition à une seule demande d’une couche épaisse. Pour éviter toute ingestion accidentelle d’application topique sur composé dû lieu de toilettage, un petit col ou un bouclier pour empêcher l’animal d’atteindre la partie du corps touchée. En outre, en pour empêcher l’allotoilettage de compagnons de cage, les animaux devraient être logés individuellement.

maintenant que vous avez une compréhension de ces autres voies d’administration, nous allons voir comment ils sont utilisés en recherche biomédicale aujourd'hui.

Une des applications importantes d’oral gavage est administration précise de substances afin d’étudier leur effet direct sur l’appareil digestif. Ici, les chercheurs ont utilisé cette méthode pour fournir une levure probiotique transformé directement dans l’estomac de l’animal. Et puis ils ont disséqué les plaques de Peyer, qui sont les nodules lymphatiques organisée de l’intestin grêle, afin d’étudier l’adhérence du micro-organisme livré.

Non invasif par voie orale peut être utilisée pour imiter le mode naturel de l’infection d’origine alimentaire. Dans cette expérience, le scientifique a développé un modèle pour la transmission orale de Listeria monocytogenes chez les souris par ingestion d’aliments contaminés. Suite à une infection, les chercheurs ont récolté divers organes comme l’intestin grêle, côlon, rate, foie et vésicule biliaire, d’analyser la propagation de l’infection de ces tissus.

Enfin, certains chercheurs sont intéressés par l’étude du mécanisme par lequel le rayonnement UV peut conduire à coups de soleil. Ici, les scientifiques ont utilisé la voie topique à appliquer une substance pharmacologique qui induit la production d’épiderme mélanine-a UV agent protecteur. Suite à cela, ils ont utilisé un protocole semblable aux études chez l’homme pour examiner l’effet protecteur de l’agent d’application topique contre l’érythème induit par le rayonnement UV.

vous avez regardé juste second volet du JoVE de méthodes d’administration composé traitant de dosage par voie orale et topique. Vous devez maintenant comprendre comment on peut doser oralement l’animal à l’aide de la nourriture ou l’eau, et comment on peut effectuer l’administration par gavage plus précise, par voie orale. Enfin, il faut savoir les considérations et méthode pour administration topique et des applications de ces diverses techniques. Comme toujours, Merci de regarder !

Summary

la méthode plus sûre et plus humaine de gestion composée est grâce à une administration par voie orale si il est possible d’incorporer dans la nourriture ou l’eau. Gavage oral est une méthode de dosage précise mais aussi très stressant pour l’animal, et nécessite des compétences techniques. Administration topique est habituellement accomplie avec peu ou pas de retenue de l’animal, une fois que la zone est correctement préparée. Un examen attentif de la voie d’administration doit factoriser dans le stress inutile potentiel.

References

  1. Turner, P.V., Pekow, C., Vasbinder, M. A., and Brabb, T. 2011. Administration of substances to laboratory animals: equipment and considerations, vehicle selection, and solution preparation. JAALAS. 50:5. 614-627.
  2. Shimizu, S. 2004. Routes of Administration in The Laboratory Mouse. Elsevier.
  3. Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. 2012. Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (67), e2771, doi:10.3791/2771.
  4. Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. 2011. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. JAALAS. 50, 600-613.
  5. Hoggart, A.F., Hoggart, J., Honerlaw, M., and Pelus, L.M. 2010. A spoonful of sugar helps the medicine go down: a novel technique to improve oral gavage in mice. JAALAS. 49:3. 329-334.
  6. Gonzales, C., Zaleska, M.M., Riddell, D.R., Atchison, K.P., Robshaw, A., Zhou, H., and Rizzo, S.J. 2014. Alternative method of oral administration by peanut butter pellet formulation results in target engagement of BACE1 and attenuation of gavage-induced stress responses in mice. Pharmacology, Biochemistry, and Behavior. 126:28-35.
  7. Zumkehr, B., Hermann, C., Theurillat, R., Thormann, W., Gottstein, B., and Hemphill, A. 2012. Voluntary ingestion of antiparasitic drugs emulsified in honey represents an alternative to gavage in mice. JAALAS. 51:2. 219-223.

1. application topique

  1. avant d’appliquer des onguents et crèmes, retirez toutes les fourrures de la zone par l’utilisation d’une crème dépilatoire ou en se rasant.
  2. Nettoyez et séchez la peau.
  3. Appliquer la substance directement sur la peau avec un coton-tige ou via une goutte directement placés pour éviter le contact par le technicien.
  4. Pour de meilleurs résultats, appliquer plusieurs couches minces de pommade ou de crème s’opposé à une demande renouvelée d’une épaisse couche.
  5. Appliquer le liquide en séparant les cheveux et en appliquant une goutte d’eau sur la peau exposée.
  6. Lorsque vous appliquez une substance par voie topique, il y a une chance d’absorption systémique due à l’animal de la zone de toilettage. Des mesures préventives doivent être prises pour éviter l’ingestion de l’accident ou à une élimination rapide de la substance. Petits colliers ou boucliers sont disponibles pour empêcher l’animal d’atteindre touchés parties du corps. Habitat individuel peut aussi devoir empêcher allotoilettage de compagnons de cage.

Figure 1
figure 1. L’application topique chez les souris.

2. dosage oral

  1. lorsqu’ils fournissent des composés d’animaux dans l’alimentation ou l’eau, on doit calculer une dose minimale quotidienne selon le poids corporel. Le poids moyen de la souche de souris ou de rats utilisé dans l’expérience peut être utilisé pour faire les calculs, à moins qu’il est précisé que chaque animal être évaluée et la dose pensé pour chaque individu.
  2. Pour les protocoles qui nécessitent qu’un apport alimentaire et/ou d’eau être mesuré avec précision, animaux doivent être hébergés individuellement.
  3. D’alimentation spécialisées ou friandises peuvent être fabriqués pour répondre aux besoins expérimentaux.
    1. Remplacer le régime standard avec celle formulée, qui permet aux animaux d’ingérer le composé tout au long de la journée.
    2. L’aliment peut alors être remplacé plus souvent que la norme alimentaire en raison de l’instabilité composée.
  4. Substances peuvent aussi être administrés en les dissolvant dans l’eau potable, permettant les animaux à recevoir un composé tout au long de la journée
    1. une petite quantité de sucre est ajoutée à l’eau pour la rendre acceptable. Le montant exact à ajouter dépend de l’acceptation de l’eau par les souris. Utilisez la plus petite possible increment.
    2. La fréquence de changement de l’eau dépend de la stabilité du composé. Certaines substances peuvent être sensibles à la lumière ou précipitée au fil du temps.

3. Procédure de gavage

calibre 20-25 x 1.5 po aiguilles droites ou courbes de dosage sont utilisés pour les souris. Pour les rats, calibre 18-20 x 2-3 aiguilles en droite ou courbes dosage sont utilisés. Ils sont disponibles, comme les aiguilles réutilisables en acier inoxydable ou une aiguilles jetables. Les aiguilles jetables peuvent avoir un manche en plastique métal lourd ou flexible avec un embout silicone.

  1. Joindre l’aiguille dosage à une seringue sélectionnée basée sur le volume et la viscosité de la solution d’essai. Pour le dosage des liquides épais, une seringue à embout Luer lock est préférée. Ce sont généralement disponibles en commençant par un 3 taille de cc qui a 100 µl graduations. C’est peut-être pas adapté pour les petits volumes ou lorsqu’il y a un besoin pour les volumes de la dose exacte à de plus petits incréments.
  2. Fixer la seringue à l’aiguille, tels que les graduations sur le Canon peuvent être lu sans faire tourner l’aiguille. Une fois que l’aiguille a été placé dans le œsophage, toute rotation peut se rompre à le œsophage, causant la mort de l’animal.
  3. Remplir une seringue avec le volume approprié de l’article qui serait administré (volume optimal = volume de 5 ml/kg et maximum = 20 ml/kg) 4
  4. Le dispositif de retenue approprié est essentiel pour cette procédure. 7
    1. restreindre manuellement des souris en agrippant la peau à la base de la tête et scruffing eux. Il est important que l’organisme tiendra telle qu’elle est suspendue dans une ligne droite de la tête à la queue. Toute torsion du corps n’entravera le placement de l’aiguille de gavage dans le œsophage.
    2. Saisir la peau du cou étroitement afin que la tête a mouvement minimal de côté à l’autre. L’arrière-train doit être stabilisé pour empêcher la rotation du corps.
    3. De gavage un rat, saisissez-le sur les épaules à l’aide de l’index et le majeur de chaque côté du cou et la paume sur l’animal ' dos. Le pouce, troisième et quatrième doigts doivent encercler la poitrine pour empêcher les animaux de pouvoir aller de l’avant ou vers l’arrière. La position des doigts sur chaque côté du cou empêchera le rat de tourner sa tête.
    4. Il est important que le corps soit en ligne droite et pas tordus pour aider à la mise en place de l’aiguille de gavage sans dommage à la bouche, du pharynx, oesophage ou estomac.
    5. S’assurer que la tête n’a pas de mouvement excessif de côté à l’autre.
    6. Postérieurs peut-être être stabilisées pour éviter la rotation du corps. Ceci est accompli en autorisant les pattes arrières pour se reposer sur le dessus de comptoir ou cage.
  5. Administration de la substance
    1. la Position de l’aiguille avec la courbe vers le bas et en ligne avec la courbe naturelle du cou. Introduire l’aiguille dans la bouche du côté droit ou gauche, entre les incisives et les molaires à un angle vers l’arrière du pharynx.
    2. Une fois que l’aiguille se trouve dans la cavité buccale, inclinez la tête à l’aide de l’aiguille de gavage jusqu'à ce que le nez est pointé vers le haut. Ceci est particulièrement important lorsque vous utilisez des aiguilles droites. L’aiguille doit glisser facilement dans le œsophage. Ne forcez pas l’aiguille vers le bas. Si une résistance se fasse sentir, régulariser l’aiguille, puis réessayez.
    3. Une fois que l’aiguille est en position dans l’estomac, délicatement déposer le composé.
    4. Retirer l’aiguille, en vous assurant qu’aucune rotation d’une aiguille courbe ne se déroule.
    5. Si l’animal commence à lutter, retirer l’aiguille de dosage et empêcher l’animal plus solidement.
    6. Tout en effectuant la procédure, si l’animal montre des signes de cyanose ou de détresse respiratoire, ou s’il y a des solution qui coule de sa bouche, le dosage de l’aiguille doit être immédiatement retiré et l’animal dans sa cage.
    7. En général, lorsque le gavage de rats et les souris en particulier avec une substance caustique, il est recommandé d’abord offrir une petite quantité – pour tester la toux – avant tout le volume est donné. De cette façon, si l’aiguille est mal positionnée, le volume livré aux poumons est faible et que l’animal a une meilleure chance à récupération.

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Figure 2. Gavage par voie orale chez la souris (à gauche) et les rats (à droite).

nombreuses expériences exigent qu’un composé administré à un animal sur une voie orale ou topique, afin que la méthode imite mieux l’apport naturel de la substance expérimentale.

Pour administration par voie orale, le composé peut être dissous dans l’eau potable ou incorporé dans les aliments que les animaux consomment. Un autre, plus précise la méthode de dosage oral est gavage oral dans lequel une grande aiguille est utilisée pour placer le composé directement dans l’estomac. En revanche, un agent topique peut être placé directement sur la surface de la peau et est généralement destiné à affecter uniquement la zone à laquelle elle est appliquée. Chacune de ces stratégies a les avantages et les limites, que nous allons dans cette vidéo. Après que nous allons démontrer comment effectuer ces techniques administration composé dans animaux de laboratoire et certaines de leurs applications.

avant de plonger dans les protocoles, passons en revue les considérations, les avantages et les lacunes de ces techniques. Administration par voie orale avec des comprimés, capsules ou liquide, c’est la plus couramment utilisée la méthode d’administration des médicaments chez l’humain. Cependant, les comprimés et les capsules sont impraticable pour les rongeurs, donc le dosage oral commun est réalisé en dissolvant le composé dans l’eau potable ou la nourriture.

Lorsque les doses par boire de l’eau, le saccharose est souvent ajouté à l’eau pour améliorer la sapidité. Toutefois, il doit être finement équilibré afin d’encourager la prise d’eau normale et pas trop boire en raison de la saveur sucrée. Une bonne règle est de commencer avec une solution de 10 % de sucrose et ensuite régler en fonction de l’apport. Une autre consiste à dose par voie orale l’animal par les aliments spécialisés. Il y a des aliments disponibles dans le commerce qui a dosée communément composés, tels que le fenbendazole, incorporé dedans. Les rongeurs de l’alimentation peuvent également créer des régimes d’essai spécialisé pour répondre à une exigence expérimentale.

Les avantages avec cette forme d’administration par voie orale sont qu’il est non invasif, administre le composé en permanence et imite l’administration de médicament par voie orale humaine. Cependant, il manque de précision car apport composé est tributaire de l’acceptation de la nourriture ou l’eau, la stabilité du composé et le nombre d’animaux présents dans la cage. Si le dosage exact n’est pas critique pour l’expérience, cette méthode non invasive est préférable pour le bien-être des animaux.

Pour administration orale plus précise, on peut utiliser le gavage oral, qui dépose le composé directement dans l’estomac, à un moment précis et à un volume déterminé. Toutefois, une formation adéquate est nécessaire pour réaliser cette technique car les graves dommages à l’animal peuvent se produire si elles ne sont pas bien attachés.

Venant d’agents topiques, ceux-ci incluent des crèmes, lotions, onguents, aérosols et gels. En général, les agents topiques visent à affectent uniquement la zone à laquelle ils sont appliqués. Toutefois, ils peuvent aussi être absorbés dans la circulation sanguine, ce qui peut être volontaire ou involontaire. Cette absorption dépend : la condition de la peau, la surface utilisée, la concentration de la substance, la durée de contact et la solubilité dans les lipides de l’agent.

maintenant que nous avons discuté de l’arrière-plan des modes d’administration par voie orale et topique, nous allons apprendre les protocoles commençant par administration orale via la nourriture ou l’eau.

Pour le dosage des calculs, vous devez d’abord connaître la dose voulue pour être administré. Deuxièmement, vous devez déterminer le poids du corps. Au lieu de pesage des animaux individuels, vous pouvez utiliser le poids moyen de la souche de souris ou de rats pour vos calculs, sauf indication contraire. Troisièmement, vous devez être conscient du nombre d’animaux par cage, et Quatrièmement, il faut savoir la consommation quotidienne moyenne en eau ou la nourriture par cage.

N’oubliez pas, l’aliment formulé ou l’eau potable avec les composés dissous auront besoin d’être remplacées plus fréquemment que la norme alimentaire ou de l’eau en raison de l’instabilité composée. Certains composés peuvent être sensibles à la lumière ou peut précipiter au fil du temps.

maintenant, nous allons apprendre à administrer par voie orale des doses précises en effectuant le gavage oral chez les souris et les rats.

Première étape consiste à sélectionner une aiguille appropriée pour la procédure. Ceux-ci sont soit réutilisable composé d’acier inoxydable ou jetable avec une antenne en plastique souple en silicone et l’arbre. Pour les souris, 20-25 calibre droites ou courbes aiguilles de dosage qui font 1,5 pouces de longueur sont appropriés. Pour les rats, sélectionnez 18-20 jauge droite ou courbe dosage aiguilles qui sont 2-3 pouces de long. L’aiguille de bon calibre et une seringue de sélection dépend aussi de volume et de la viscosité. Examiner l’Administration composé j’ai vidéo pour comprendre l’impact de ces facteurs. Pour le dosage des liquides épais, une seringue à embout Luer lock est préférable.

Après avoir effectué la sélection, apposer la seringue à l’aiguille, tels que les graduations sur le Canon peuvent être lu sans faire tourner l’aiguille. Ceci est important car une fois que l’aiguille a été placé dans le œsophage toute rotation peut se rompre la paroi oesophagienne, entraînant la mort de l’animal. Ensuite, remplissez la seringue avec le volume de la solution qui serait administré.

Cette méthode doit toujours être effectuée sur des animaux conscients avec des réflexes de déglutition intacts afin d’éviter un placement accidentel dans la trachée. En utilisant la technique de retenue approprié est essentiel pour cette procédure. Pour souris, saisir la peau à la base de la tête et la peau du cou serré. Cela garantit que la tête a un minimum occasion pour mouvement gauche-droite. En outre, assurez-vous que le corps est suspendu dans une ligne droite de la tête à la queue ; toute torsion n’entravera le placement de l’aiguille de gavage dans le œsophage. L’arrière-train doit être également stabilisée pour éviter la rotation du corps.

Pour retenir un rat, saisissez-le sur les épaules à l’aide de l’index et le majeur de chaque côté du cou. Cela empêchera le rat de tourner sa tête d’un côté à l’autre. Le pouce, troisième et quatrième doigts entourent la poitrine pour empêcher l’animal de se déplacer vers l’avant ou vers l’arrière.

Une fois que vous avez bien attaché à l’animal, placez l’aiguille avec la courbe du côté vers le bas et conforme à la courbe naturelle du cou. Ensuite, introduire l’aiguille dans la bouche du côté droit ou gauche, par le biais de la diastemata et entre les incisives et les molaires à un angle vers l’arrière du pharynx. Maintenant que l’aiguille est placée dans la cavité buccale, utilisez-le pour incliner la tête vers l’arrière jusqu'à ce que le nez est pointé vers le haut. À ce stade, l’aiguille doit glisser facilement dans le œsophage. Une fois que l’aiguille est placée dans l’estomac, délicatement déposer le composé. Ensuite, retirer l’aiguille de l’animal, prenant soin de ne pas faire tourner. Il est important de ne pas forcer l’aiguille vers le bas. Si vous vous sentez une résistance quelconque, enlevez-le et essayez à nouveau. Lors de l’exécution de la procédure, si l’animal montre des signes de cyanose ou de détresse respiratoire ou si il y a des solution qui coule de sa bouche, le dosage de l’aiguille doit être immédiatement retiré et l’animal doit être relâché dans sa cage.

Enfin, passons en revue les procédures d’administration topique chez les animaux de laboratoire. Commencez par anesthésier l’animal. Cela se fait couramment à l’aide d’une action inhalant, rapide qui permet une rapide récupération animale. Pour plus de détails sur l’administration de l’anesthésie, s’il vous plaît voir une autre vidéo de cette collection.

Ensuite, à l’aide d’une tondeuse à cheveux supprimer toutes les fourrures de la zone d’application. Pour éviter toute coupure, placer la surface plane de la tondeuse contre la peau et raser dans le sens opposé à celui de la croissance des cheveux. Ensuite, nettoyez la peau avec de l’eau et sécher avec une compresse de gaze. Maintenant, à l’aide d’un coton-tige, appliquez la substance directement sur la peau. Pour de meilleurs résultats, appliquer plusieurs couches minces de pommade ou de crème, par opposition à une seule demande d’une couche épaisse. Pour éviter toute ingestion accidentelle d’application topique sur composé dû lieu de toilettage, un petit col ou un bouclier pour empêcher l’animal d’atteindre la partie du corps touchée. En outre, en pour empêcher l’allotoilettage de compagnons de cage, les animaux devraient être logés individuellement.

maintenant que vous avez une compréhension de ces autres voies d’administration, nous allons voir comment ils sont utilisés en recherche biomédicale aujourd'hui.

Une des applications importantes d’oral gavage est administration précise de substances afin d’étudier leur effet direct sur l’appareil digestif. Ici, les chercheurs ont utilisé cette méthode pour fournir une levure probiotique transformé directement dans l’estomac de l’animal. Et puis ils ont disséqué les plaques de Peyer, qui sont les nodules lymphatiques organisée de l’intestin grêle, afin d’étudier l’adhérence du micro-organisme livré.

Non invasif par voie orale peut être utilisée pour imiter le mode naturel de l’infection d’origine alimentaire. Dans cette expérience, le scientifique a développé un modèle pour la transmission orale de Listeria monocytogenes chez les souris par ingestion d’aliments contaminés. Suite à une infection, les chercheurs ont récolté divers organes comme l’intestin grêle, côlon, rate, foie et vésicule biliaire, d’analyser la propagation de l’infection de ces tissus.

Enfin, certains chercheurs sont intéressés par l’étude du mécanisme par lequel le rayonnement UV peut conduire à coups de soleil. Ici, les scientifiques ont utilisé la voie topique à appliquer une substance pharmacologique qui induit la production d’épiderme mélanine-a UV agent protecteur. Suite à cela, ils ont utilisé un protocole semblable aux études chez l’homme pour examiner l’effet protecteur de l’agent d’application topique contre l’érythème induit par le rayonnement UV.

vous avez regardé juste second volet du JoVE de méthodes d’administration composé traitant de dosage par voie orale et topique. Vous devez maintenant comprendre comment on peut doser oralement l’animal à l’aide de la nourriture ou l’eau, et comment on peut effectuer l’administration par gavage plus précise, par voie orale. Enfin, il faut savoir les considérations et méthode pour administration topique et des applications de ces diverses techniques. Comme toujours, Merci de regarder !

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