PCR : réaction de polymérisation en chaîne

La réaction en chaîne par polymérase, ou PCR, est une technique utilisée pour amplifier l’ADN à travers des thermocycles – cycles de changement de températures à des intervalles de temps fixés. En utilisant un ADN polymérase thermostable, la PCR peut créer de nombreuses copies d’ADN depuis les blocs de construction de l’ADN appelés dinucléosides de triphospshates ou dNTPS. Il y a trois étapes dans la PCR: la dénaturation, l’hybridation, et l’élongation. La dénaturation est la première étape dans le cycle et provoque la fonte de l’ADN par la rupture des liaisons hydrogènes entre les bases, donnant lieu à un ADN simple brin. L’hybridation descend suffisament la température pour autoriser la liaison d’amorces oligonucléotidiques à l’ADN modèle. Lors de l’étape d’élongation, l’ADN polymérase va synthétiser un nouveau ADN double brin.

Cette vidéo fournit une introduction à la procédure de PCR. Les principes de base de la PCR sont décrits ainsi qu’une procédure pas à pas pour la mise en place d’une réaction de PCR généralisée. La vidéo montre les composants nécessaires pour une réaction de PCR, ce qui inclut les instructions pour la conception d’amorces, et fournit des astuces utiles pour assurer le succès des réactions de PCR.