के वितरण के लिए शल्य चिकित्सा की प्रक्रिया भ्रूण स्टेम सेल व्युत्पन्न इस्कीमिक hindlimb endothelial कोशिकाओं, bioluminescence इमेजिंग द्वारा गैर इनवेसिव ट्रैकिंग के साथ प्रदर्शन किया है.
Abstract
परिधीय परिधीय धमनियों का संकुचन है कि पैर और पैरों के लिए oxygenated रक्त और पोषक तत्वों की आपूर्ति से धमनी रोग (पैड) के परिणाम, इस विकृति आंतरायिक खंजता (दर्द चलने के साथ), दर्दनाक इस्कीमिक ulcerations, या भी अंग की धमकी कोथ जैसे लक्षण का कारण बनता है. आमतौर पर यह माना है कि संवहनी endothelium, endothelial कोशिकाओं की एक monolayer है कि सभी रक्त और लसीका वाहिकाओं के luminal सतह निवेश, संवहनी homeostasis और संवहनी उत्थान में एक प्रमुख भूमिका निभाता है है. एक परिणाम के रूप में, स्टेम सेल आधारित endothelium के उत्थान पैड के इलाज के लिए एक आशाजनक दृष्टिकोण हो सकता है.
इस वीडियो में, हम भ्रूण स्टेम सेल का प्रत्यारोपण (ईएससी) का प्रदर्शन व्युत्पन्न पैड की एक मॉडल के रूप में एकतरफा hindimb ischemia के इलाज के लिए endothelial कोशिकाओं, bioluminescence इमेजिंग द्वारा घर वापस आना और सेल अस्तित्व के गैर इनवेसिव ट्रैकिंग द्वारा पीछा किया. सेल वितरण और इमेजिंग के लिए विशिष्ट सामग्री और प्रक्रियाओं का वर्णन किया जाएगा. इस प्रोटोकॉल Niiyama एट अल द्वारा hindlimb ischemia के प्रेरण का वर्णन करने में एक अन्य प्रकाशन के बाद 1 .
Protocol
1. Murine ESCs के endothelial कोशिकाओं में भेदभाव endothelial कोशिकाओं में ESCs फर्क के लिए प्रोटोकॉल कहीं वर्णित है और इस 2,3 प्रोटोकॉल का ध्यान केंद्रित नहीं है. संक्षेप में, कोशिकाओं के अंतर की अनुमति दी हैं, और कोशिकाओ?…
Discussion
ESCs भेदभाव और उनके सेल सभी तीन रोगाणु परतें, endothelial कोशिकाओं सहित शामिल प्रजातियों को जन्म देने की क्षमता उनके plasticity की वजह से से ऊतक ischemia के इलाज के लिए एक आशाजनक सेल स्रोत हैं. ESCs के साथ जुड़े नैतिक चिंताओं पर काबू पान?…
Acknowledgements
लेखक Andrea Axtell, सातोशी Itoh, एमडी, जेफ Velotta, एमडी, अनुदान होयत, रॉबर्ट सी. रॉबिंस, एमडी, जिन यू, एमडी, टिम डोयल, पीएचडी, और स्टैनफोर्ड तकनीकी सहायता के लिए छोटे पशु इमेजिंग कोर धन्यवाद. लेखकों को भी AM Bickford इंक पशु चिकित्सा उपकरणों के समर्थन के लिए धन्यवाद. इस शोध स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थानों से अनुसंधान अनुदान (HL-75,774 R01, R01 CA098303, HL085743 R21, HL087746 1K12), कैलिफोर्निया तंबाकू कैलिफोर्निया विश्वविद्यालय (15IT 0257 और 1514RT-0169) से संबंधित रोग अनुसंधान कार्यक्रम के द्वारा समर्थित किया गया , और पुनर्योजी चिकित्सा के लिए कैलिफोर्निया इंस्टीट्यूट (RS1 ००,१८३).
राष्ट्रीय राजमार्ग अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन से एक फैलोशिप द्वारा समर्थित है. हार्ट एसोसिएशन कर सकते हैं.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Surgical tools
Tool
Fine Science Tools
Syringe needle
Tool
BD
28G insulin syringe is preferred
Phosphate Buffered Saline
Reagent
Invitrogen
D-luciferin
Reagent
Biosynth International, Inc
Prepare D-luciferin in advance into filtered stock solutions of 15 mg/mL in PBS
IVIS 200 Bioluminescence imaging system and acquisition software
Huang, N. F., Niiyama, H., De, A., Gambhir, S. S., Cooke, J. P. Embryonic Stem Cell-Derived Endothelial Cells for Treatment of Hindlimb Ischemia. J. Vis. Exp. (23), e1034, doi:10.3791/1034 (2009).