Summary
Algoritmos de evaluación de los umbrales de dolor mecánico y el calor en la piel inflamada forma experimental los sujetos de estudio humanos se muestran. Los dos paradigmas dolor prueba independiente examine el procesamiento nociceptivo por las dos principales poblaciones periféricas de fibras nerviosas de la transmisión del dolor, es decir, no mielinizadas fibras C y pequeñas mielinizadas fibras A-delta.
Abstract
En un artículo anterior en el Diario de los experimentos visualizados hemos demostrado las técnicas de la piel de microdiálisis para la recogida de tejidos específicos bioquímicos nociceptivas e inflamatorias en los seres humanos. En este artículo vamos a mostrar las pruebas de dolor paradigmas que se utilizan a menudo en combinación con procedimientos de microdiálisis. La combinación de pruebas de dolor con microdiálisis proporciona el vínculo crítico entre los datos de comportamiento y la bioquímica que permite la identificación de sustancias bioquímicas clave responsables de la generación y propagación de dolor.
Dos modelos de dolor que evocan en la piel inflamada de los participantes humanos se muestran. El primer modelo provoca dolor con la ayuda de estímulos de calor. El dolor evoca el calor como se describe aquí es predominantemente mediada por pequeñas, no mielinizadas fibras nerviosas periféricas nociceptivas (fibras C). El segundo modelo provoca dolor a través de estímulos de presión marcada. Dolor marcada presión evocados es predominantemente mediada por pequeñas fibras mielínicas de los nervios periféricos nociceptivos (fibras A-delta). Los dos modelos son mecánicamente distinta e independiente examine el procesamiento nociceptivo por las dos principales poblaciones periféricas de las fibras nerviosas implicadas en la señalización del dolor.
El dolor se evoca el calor con la ayuda de la TSA II, disponible en el mercado un termo-sensorial analizador (Medoc Advanced Medical Systems, Durham, NC). Configuración del estímulo y la entrega se maneja con la ayuda de software específico. Thermodes varían en tamaño y forma, pero en principio, por una placa de metal que pueden ser calentados o enfriados a distintas velocidades y por diferentes períodos de tiempo. Algoritmos de evaluación de calor provocado dolor son múltiples. En los experimentos se muestra aquí, los participantes del estudio se les pidió que indicaran en qué momento comienza a experimentar dolor mientras que la thermode en contacto con la piel se calienta a una velocidad predeterminada a partir de una temperatura que no provoca dolor. La temperatura thermode en la que un sujeto comienza a experimentar el dolor constituye el umbral del dolor de calor.
Dolor mecánico se evoca con sondas puntuado. Estas sondas están disponibles en el mercado de varios fabricantes (filamentos de von Frey). Sin embargo, la precisión de von Frey pelos ha sido criticado y muchos investigadores utilizan encargo marcado sondas de presión. En los experimentos que se muestran aquí ocho sondas de medida marcada de diferentes pesos se aplican en orden consecutivo, un procedimiento llamado algoritmo de arriba-abajo, para identificar los puntos de percepción de desviación, es decir, un cambio de no sentir dolor para sentir dolor, o viceversa. El peso medio causando una deformación perceptiva constituye el umbral de dolor mecánico.
Protocol
Prueba de calor del dolor mediante la Thermostimulator TSA II
1. Introducción
- Este procedimiento utiliza la TSA II, disponible en el mercado un termo-sensorial analizador que ofrece estímulos de calor a la piel con una thermode (Medoc Advanced Medical Systems, Durham, NC). Una unidad central genera y transmite la señal a la thermode. Esta señal es controlada por el software propietario normalmente se almacena en un ordenador portátil conectado a la unidad central. También se adjunta a la unidad central es un control de mano que permite a un objeto de estudio para detener el calentamiento de la thermode.
- Siete estímulos de calor y secuencial idéntico se entregan, con intervalos entre estímulos de 30 años. La temperatura basal del thermode se fija en un cómodo 35 º C. La velocidad a la que se calienta thermode se fija en 1 º C / s, mientras que la velocidad a la que se enfría es de 10 º C / s. La temperatura máxima se fija en thermode 52 º C.
2. Preparación y capacitación de los sujetos
- Para preparar los temas para el asiento de Ensayo térmico dolor ellos cómodamente en una silla reclinable que provee soporte para la cabeza, brazos y piernas. La silla también debe permitir un fácil acceso a los sitios del cuerpo examinado.
- La instalación de prueba debe estar a una temperatura ambiente confortable, y proporcionar un ambiente tranquilo y neutral, sin distracciones.
- Antes de comenzar el experimento, los participantes deberán estar bien entrenados en todos los aspectos de las pruebas de dolor por calor. La formación puede tener lugar en cualquier momento antes del experimento.
- Las interacciones entre los sujetos de estudio y los investigadores deben limitarse a las necesarias para la recogida de datos. Bromas y charlas se desaniman porque puede comprometer la coherencia de los datos. Los sujetos del estudio se informó que las interacciones intencionalmente será un poco monótona y neutral durante los experimentos.
- Mantenga las instrucciones claras, simples y consistentes. Haga hincapié en que el dolor es subjetivo, y no hay respuestas correctas o incorrectas. Lo más importante es ser consistente. Definir el umbral del dolor de calor como el punto entre "estar a punto de ser doloroso" y "sólo se convirtió en dolor".
- Es muy importante que un sujeto sabe con precisión qué esperar durante una sesión de pruebas. Cualquier "sorpresas" pueden resultar en menor cantidad de datos consistente, ya que los factores de confusión como la ansiedad puede ser generada. Por ejemplo, si siete estímulos dolorosos calor se utilizan para determinar el umbral del dolor de calor, el sujeto debe saber esto.
- En cualquier momento, el sujeto puede detener el thermode de conseguir más caliente pulsando el botón de un control de mano. Tener el control se reduce la ansiedad del sujeto y que los datos sean más fiables.
- La sesión de entrenamiento ofrece una oportunidad para evaluar el rendimiento de un sujeto del estudio. Puede ser mejor para entrenar a los sujetos durante dos a cuatro ciclos de prueba para sus umbrales de dolor individuales varían en no más de 0,8 ° C, e idealmente no más de 0,6 ° C entre los ciclos de prueba los dos últimos. Los sujetos que no cumplan consistentemente suelen ser excluidos del estudio.
3. Determinar el umbral del dolor
- Para comenzar los ciclos de pruebas de umbral de dolor marca la ubicación de la thermode en la piel del sujeto. En este experimento la misma lesión inflamación de la piel utilizada para microdiálisis se pondrá a prueba para el dolor para aprender acerca de bioquímicos libera en respuesta a las pruebas de dolor.
- Luego, comenzar cada ciclo mediante la colocación de la thermode en el área de la piel marcada. Coinciden con la posición de la thermode con las marcas en la mayor medida posible. Deje que la temperatura entre la piel y thermode la que se equilibre a 35 ° C - una temperatura que con seguridad no causará dolor. Esto tomará alrededor de 5 segundos y se indicará con una lectura de 35 ° C en la pantalla del ordenador.
- Antes de comenzar, dar el control de mano para el tema.
- Use una presión constante y suave para mantener toda la superficie de la thermode en pleno contacto con la piel del sujeto durante la prueba.
- Ahora inicie el algoritmo de prueba pre-programados. El thermode comenzará a calentar hasta a 1 ° C / s. Tan pronto como el sujeto experimenta el dolor, van a presionar el dispositivo de mano.
- Después de pulsar el botón en el dispositivo de mano, el dolor que causa la temperatura thermode se registrará automáticamente y comenzará a disminuir a un ritmo de 10 ° C / s hasta su temperatura de referencia de 35 ° C.
- La sonda de temperatura de forma automática se mantendrá a 35 ° C durante 30 s antes de que comienza a elevarse de nuevo en 1 º C / s, hasta un tema nuevo pulsa el botón del dispositivo de mano. Justo antes de que la temperatura thermode está a punto de aumentar de nuevo, recordar el tema que está a punto de suceder. Esto evitará que el objeto enfocado.
- Esta secuencia se repite hasta siete registros de temperatura se han registrado. Calcular el promedio de estas temperatura lecturas, lo que es el umbral del dolor de calor.
Prueba de dolor mecánico con sondas de presión puntuado
1. Introducción
- Usamos encargo calibrado puntuado sondas de presión, ya que proporcionan resultados más consistentes que las tradicionalmente utilizadas y disponibles en el mercado de von Frey pelos. Las sondas están hechas de cables idénticos cilíndrica de acero inoxidable (240 m de diámetro) montados sobre varillas de cobre de diferentes pesos (1, 2, 4, 8, 16, 32, 49, 64 y 81 gramos) que se mueven libremente dentro de una amplia mano lugar del tubo de aluminio.
- Las mismas condiciones experimentales generales descritos para las pruebas de calor el dolor se aplican a las pruebas de dolor mecánico. Los temas deben estar bien preparados y entrenados. Es especialmente importante para tranquilizar a los sujetos que las sondas son contundentes y no se perfora la piel. Esto ayudará a los sujetos para relajarse y proporcionar datos coherentes.
2. Determinar el umbral de dolor mecánico
- Para determinar el umbral de dolor mecánico, aplicar primero la punta del alambre de acero de la más ligera de la sonda perpendicular a la piel en el centro de la lesión experimental inflamada.
- El tubo de aluminio de mano se hace descender hacia la piel, pero sin tocarlo. De esta manera, todo el peso de la varilla de cobre en el interior del tubo de aluminio se apoya en la punta del alambre de acero.
- El objeto de estudio se indica si la sonda produce dolor al decir "sí" o "no".
- Si el sujeto responde "no", ya sea la misma sonda o la sonda más pesada que viene será utilizado siguiente. Este algoritmo se llama una secuencia de estimulación ascendente. Al azar determinar si la próxima sonda es más pesado o del mismo peso. Esto evitará que un sujeto ciego con el algoritmo.
- Aplicar las sondas en orden ascendente hasta que un sujeto responde "sí." El peso promedio de los últimos dos sondas de la serie se registra como el punto de deflexión de primera.
- Después de que el sujeto responde "sí", empiece a usar una secuencia de estimulación descendente, y utilizar una sonda o la sonda más ligero que antes. Al azar determinar si la próxima sonda es más claro o más del mismo peso. Esto evitará que un sujeto ciego con el algoritmo.
- Aplicar las sondas en una secuencia descendente hasta que el sujeto responde "no". El peso promedio de los últimos dos sondeos en esta secuencia constituye el punto de deflexión de segundo.
- Cuando el sujeto responde "no", volver a una secuencia de estimulación ascendente. Alternar entre ascendientes y descendientes hasta las siete secuencias de puntos de desviación se registran. El promedio de estos siete puntos es el umbral de dolor mecánico.
Discussion
Este video muestra los algoritmos para evaluar el calor y el umbral de dolor mecánico en la piel inflamada de voluntarios humanos. La percepción del dolor es subjetiva. Recogida de datos adecuado del dolor requiere una instalación de prueba adecuados (por ejemplo, tranquilo y confortable), la formación completa de los participantes mediante la incorporación de medidas de control de calidad de datos (test-retest), la estricta adhesión a un protocolo de estudio estandarizado, y la evitación de factores de confusión (por ejemplo, estrés, ansiedad). Fiables los datos subjetivos de la sensibilidad al dolor, junto con intervenciones como la administración de un fármaco analgésico y la recolección de datos de mecanismo como la liberación local de mediadores nociceptivos proporcionan información valiosa sobre los mecanismos del dolor, y los medios para prevenir o atenuar la misma.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| TSA-II Neuro Sensory Analyzer | Tool | Medoc Advanced Medical Systems | ||
| Puntuated Pressure Probes | Tool | Custom Made | Alternatively, commercially available von Frey Hairs can be used. |
References
- Angst, M. S., Clark, J. D. Comment on Koltzenburg et al.: Differential sensitivity of three experimental pain models in detecting the analgesic effects of transdermal fentanyl and buprenorphine. Pain. 126, 165-174 (2006).
- Angst, M. S., Clark, J. D., Carvalho, B., Tingle, M., Schmelz, M., Yeomans, D. C. Cytokine profile in human skin in response to experimental inflammation, noxious stimulation, and administration of a COX-inhibitor: A microdialysis study. Pain. , (2008).
- Angst, M. S., Koppert, W., Pahl, I., Clark, J. D., Schmelz, M. Short-term infusion of the mu-opioid agonist remifentanil in humans causes hyperalgesia during withdrawal. Pain. 106, 49-57 (2003).
- Lotsch, J., Angst, M. S. The mu-opioid agonist remifentanil attenuates hyperalgesia evoked by blunt and punctuated stimuli with different potency: a pharmacological evaluation of the freeze lesion in humans. Pain. 102, 151-161 (2003).
