Uso de alta frecuencia de estimulación eléctrica, actividades similares a convulsiones pueden ser inducidos en<em> Drosophila</em>. Esta actividad es fácilmente grabado desde el sistema de fibra gigante.
Abstract
Drosophila melanogaster es una herramienta útil para el estudio de secuestro como actividad. Una variedad de mutantes en los que las convulsiones pueden ser inducidas a través de cualquiera de choque físico o estimulación eléctrica está disponible para el estudio de diversos aspectos de la actividad convulsiva y el comportamiento. Todas las moscas, incluso de tipo salvaje, se someterá a actividades similares a convulsiones si se estimula a un voltaje suficientemente alto. Convulsivos como la actividad es una respuesta de todo o nada y cada genotipo tiene un umbral de convulsiones específicas. El umbral de las convulsiones de un genotipo específico de la mosca puede ser alterado, ya sea por tratamiento con un fármaco o por la supresión o mejora genética. El umbral se mide fácilmente por electrofisiología. Actividades similares a convulsiones pueden ser inducidas a través de la estimulación eléctrica de alta frecuencia entregados directamente al cerebro y grabado a través de los músculos dorsales longitudinales (DLMS) en el tórax. El DLMS son inervados por parte del sistema de fibra gigante. A partir de la estimulación de baja tensión, alta frecuencia, y, posteriormente, elevar la tensión en incrementos pequeños, el umbral de las convulsiones de una sola mosca puede ser medido.
Protocol
Preparación de las muestras: La noche antes del experimento, las moscas macho de genotipo deseado son anestesiados y colocados en un frasco con un tapón de nylon suave. Una bola de algodón también funcionaría. Después de anestesia, el umbral de convulsión se altera, por lo que las moscas lo mejor es dejar por lo menos 6 horas, aunque durante la noche es ideal. En el día del experimento, las moscas se montan uno a la vez a las diapositivas de cristal con una…
Discussion
Este vídeo ha demostrado los pasos básicos para determinar el umbral convulsivo de un individuo mosca Drosophila. En lugar de utilizar el osciloscopio digital, un digitalizador computarizada también se puede utilizar. Esta técnica es útil para determinar los efectos de una droga o la alteración genética en el umbral de las convulsiones de una mosca.
Acknowledgements
Este trabajo fue apoyado por una subvención del NIH de investigación, una beca de Fundación de la Epilepsia y una beca de la Fundación McKnight a la experimentación con MT en moscas de la fruta Drosophila se realizaron de acuerdo con las directrices y regulaciones establecidas por el Comité de la Universidad de Berkeley el uso de animales.