セクション1:FSMについては、蛍光標識アクチンを取得必要な材料:精製アクチン、フルオロフォア(アレクサ、X -ローダミンを推奨)。 G -バッファ、超遠心良好なFSMのムービーを取得するために重要なコンポーネントは、任意の蛍光体とアクチンの適切なラベルを(または他の細胞骨格タンパク質)が必要です。 我々は、アレクサ(488、568波長)とアクチ?…
Injection buffer (IB)
50 mM potassium glutamate
0.5 M MgCl2 (APPENDIX 2A)
Store up to 2 years at −20° C
G-buffer
2 mM Tris⋅Cl, pH 8.0 (APPENDIX 2A)
0.2 mM CaCl2 (APPENDIX 2A)
Add just before use:
0.2 mM ATP (see recipe for 100 mM)
0.5 mM 2-mercaptoethanol
Lim, J., Danuser, G. Live Cell Imaging of F-actin Dynamics via Fluorescent Speckle Microscopy (FSM). J. Vis. Exp. (30), e1325, doi:10.3791/1325 (2009).