Nós desenvolvemos um método semi-automático de análise Optical Heartbeat (SOHA) para analisar as gravações ópticas de alta velocidade a partir de<em> Drosophila</em>, Peixe-zebra e corações embrionárias de camundongos. Nós demonstramos a aplicação de nossa metodologia para a análise da função cardíaca na mosca da fruta e corações embrionárias de camundongos.
Abstract
Nós desenvolvemos um método para analisar gravações ópticas de alta velocidade a partir de<em> Drosophila</em>, Peixe-zebra e corações embrionárias de camundongos (Fink, et. Al., 2009). Nosso semi-automático de análise de pulsação óptica (SOHA) utiliza um algoritmo de detecção de movimento que novela é capaz de detectar movimentos cardíacos associados com contráteis individuais e eventos relaxamento. O programa oferece uma série de leituras fisiologicamente relevantes, incluindo pressão arterial sistólica e diastólica intervalos, a freqüência cardíaca, bem como medidas qualitativas e quantitativas de arrhythmicity batimento cardíaco. O programa também calcula medições de diâmetro do coração durante a diástole e sístole tanto a partir do qual fração de encurtamento e mudanças área fracional são calculados. Saída é fornecido como um arquivo digital compatível com a maioria dos programas de planilha. As medições são feitas para cada batimento cardíaco em um registro de aumentar o poder estatístico da produção. Demonstramos cada uma das etapas em que a entrada do usuário é necessário e mostrar a aplicação da nossa metodologia para a análise da função cardíaca em todos os três modelos de coração geneticamente tratável.
Protocol
Clique aqui para ver uma visão geral dos batimentos cardíacos semi automatizado de análise procedimento (SOHA). Semi-automático de análise batimentos cardíacos óptico 1. Preprocess – Esta etapa fornece informações sobre os diâmetros cardíaca diastólica e sistólica. Bordas cardíacas são identificadas e marcadas durante a…
Discussion
O modelo de Drosophila provou ser uma poderosa ferramenta genética que tem sido utilizado para tratar uma variedade de questões científicas que vão desde desenvolvimento embrionário para a aprendizagem e memória. Recentemente, este organismo modelo versátil, tem sido usado para investigar a genética da função cardíaca. Uma série de tentativas para quantificar a fisiologia do coração em adultos Drosophila têm contado com observações feitas em moscas intacta através da cutícula abdominal. A maioria dess…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
KO e AC são suportados por uma bolsa e uma bolsa de estudos da Associação Americana do Coração. SIB e RB são suportados por concessões do NIH.
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
MatLab software
Math Works, Inc
Required environment for the analysis software.
EM-CCD digital camera
Hamamatsu Corp.
9100 or 9300
Other high speed digital cameras will also work.
HC image data capture software
Hamamatsu Corp.
Other image capture software that produces movies in avi format will also work.
Light Microscope with 10x objective
Leica
A dipping lens that eliminates the air water interface greatly improves resolution
Ocorr, K., Fink, M., Cammarato, A., Bernstein, S. I., Bodmer, R. Semi-automated Optical Heartbeat Analysis of Small Hearts. J. Vis. Exp. (31), e1435, doi:10.3791/1435 (2009).