Summary

셀 Lensless 온 - 칩 영상은 높은 처리량 세포 생물학 및 의료 진단을위한 새로운 도구를 제공합니다

Published: December 14, 2009
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Summary

세포의 Lensfree 온 – 칩 이미징 및 특성은 그림이다. 이 온칩 세포 이미징 접근 방식은 자원 가난한 설정을 위해 특히 적합, 의료 진단 및 높은 처리량 세포 생물학 애플 리케이션을위한 소형 및 비용 효율적인 도구를 제공합니다.

Abstract

다른 렌즈와 광학 구성 요소가 함께 작동 객관적인 렌즈의 사용에 의해 종래의 광학 현미경 이미지 세포. 꽤 효과가 있지만,이 고전적인 방법은 microfluidics에있는 예술의 고급 상태와 호환되도록 이미징 플랫폼의 소형화에 대한 특정 제한 사항이 있습니다. 이 보고서에서는, 우리는 루카스를 칭했다 lensless 온 칩 이미지 개념 실험 세부 사항 (을 소개합니다<strong<em> L</em</strong> ensless<strong<em> U</em</strong> ltra 전체 뷰 필드<strong<em> C</em</strong> 엘 모니터링<strong<em></em</strong에 따라> rray 플랫폼<strong<em> S</em</strong만큼 큰 스팬 수있는보기의 초고 다양한 분야를 통해 이미지 이종 세포 솔루션을 어떤 현미경의 목표 또는 다른 대형 광학 부품을 필요로하지 않습니다> 헤도우 영상) ~ 18cm<sup> 2</sup>. 또한, 기존의 현미경과는 달리, 루카스 이미지가 ~ 9 ML 샘플 볼륨에 해당 환기 시켰을 뿐일세 필요없이 ~ 5mm의 깊이 – 오브 – 분야 이상의 관심의 이종 세포 솔루션하실 수 있습니다. 이 영상 플랫폼 유형, 솔루션 내에 개수와 세포의 상대적 위치를 확인할 수 있습니다 각보기의 해당 분야 내에서 관심있는 세포 및 이러한 세포 그늘의 자동 디지털 처리의 그림자 (즉, lensless 디지털 홀로그램) 기록합니다. 그것이 어떤 대형 광학 부품이나 기계 검사 단계를 필요로하지 않기 때문에 그것은 동시에 치료 진단 도구 특히 지점에 대한 매우 중요 비용을 줄일 수있는 상당히 소형 플랫폼을 제공합니다. 또한,이 플랫폼의 영상 처리량이 높은 처리량 세포 생물학 실험을위한 매우 중요한 것일 수 종래의 광학 현미경보다 더 크기의 명령입니다.

Protocol

여기 루카스 [1-3]에 관련된 실험 절차를 논의합니다. 루카스의 개념의 증거를 보여주면 우리는 전체 혈액 샘플에 대한 이미징 프로세스를 설명합니다. A. 이미징 설정 루카스 이미징 플랫폼은 특히 자원 제한 설정에 대한 기존의 포인트 – 오브 – 케어 cytometry 의료 진단 도구에 대한 비용 효율적인 소형 대안을 제공하는 중요한 이점을 전시하고 있습니다. 오히려 세포?…

Discussion

우리는 루카스 플랫폼이 정확하게 계산하고 홀로그램 서명을 기반으로 한 칩에 다양한 micro-objects/cells을 식별할 수있는 그림, 그리고 포인트의 케어 의료 진단 및 높은 처리량 세포 생물학을위한 유망한 도구를 제공합니다. 정확하게 기록된 홀로그램 패턴을 처리하기 위해, 우리는 사용자 지정 개발 루카스 결정 소프트웨어를 구현했습니다. 루카스 이미지의 훈련에 의해 만들어진 통계 회절 이미…

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Charged couple device (CCD)   KODAK KAI-11002  
Charged couple device (CCD)   KODAK KAF-39000  
Complementary Metal-Oxide-Semiconductor (CMOS)   Micron MT9P031  
Xenon Lamp   Newport Corp. Cornerstone T260  
Vacuum pen   Edmund Optics NT57-636  
5, 10, and 20 μm Microbeads   Thermo Scientific 4000 Series  
RPMI   Fisher Scientific 1640  
Pure Eosin Y   Acros Organics MW=691.85  
New Methylene Blue(NMB) Dye   Acros Organics MW=347.90  
Potassium Oxalate Monohydrate   Acros Organics 99.0% Reagent ACS  

References

  1. Seo, S., Su, T., Tseng, D. K., Erlinger, A., Ozcan, A. “Lensfree Holographic Imaging for On-Chip Cytometry and Diagnostics”. Lab Chip. , (2009).
  2. Su, T., Seo, S., Erlinger, A., Ozcan, A. “High-throughput Imaging and Characterization of a Heterogeneous Cell Solution on a Chip” . Biotechnology and Bioengineering. , (2008).
  3. Su, T., Seo, S., Erlinger, A., Ozcan, A. “Multi-color LUCAS: Lensfree on-chip cytometry using tunable monochromatic illumination and digital noise reduction”. Cellular and Molecular Bioengineering. , (2008).

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Cite This Article
Mudanyali, O., Erlinger, A., Seo, S., Su, T., Tseng, D., Ozcan, A. Lensless On-chip Imaging of Cells Provides a New Tool for High-throughput Cell-Biology and Medical Diagnostics. J. Vis. Exp. (34), e1650, doi:10.3791/1650 (2009).

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