Summary
Her presenterer vi vellykkede vedlikeholds- og giftekstraksjonsprotokoller for storskala Tityus serrulatus Lutz og Mello, 1922 (brasiliansk gul skorpion) husdyrhold, med sikte på å gi gift til påfølgende skorpionantivenomproduksjon for å møte etterspørselen fra det brasilianske helsesystemet.
Abstract
Skorpionenvenomasjon er et folkehelseproblem i flere tropiske og subtropiske land. Tityus serrulatus Lutz og Mello, 1922 (brasiliansk gul skorpion) er ansvarlig for omtrent 150 000 økende tilfeller per år i Brasil, hvorav 10% trenger antivenombehandling for å reversere livstruende gifteffekter. Derfor opprettholdes tusenvis av T. serrulatus-individer under kontrollerte fangenskapsforhold for giftutvinning, som senere brukes i produksjonen av den nasjonale forsyningen av skorpionantivenom. Instituto Butantan er det viktigste antivenomproduksjonslaboratoriet i Brasil, og leverer rundt 70 000 hetteglass med skorpionantivenom til det brasilianske helsesystemet. Dermed er oppdrettsprotokollene og giftekstraksjonsmetodene nøkkelpunkter for suksessen til storskala, standardisert giftproduksjon. Målet med denne artikkelen er å beskrive fangenskapsprotokollene for T. serrulatus husdyrhold, som omfatter dyreholdsrutinen og giftekstraksjonsprosedyrene, etter god produksjonspraksis og sikring av dyrevelferd. Disse praksisene tillater vedlikehold av opptil 20.000 dyr i fangenskap, med en rutine på 3.000 til 5.000 skorpioner melket månedlig i henhold til antivenomproduksjonsbehov, og oppnår gjennomsnittlig 90% av positiv ekstraksjon.
Introduction
Skorpioner er leddyr som tilhører klassen Arachnida, orden Scorpiones, som omfatter ca. 2 621 arter 1,2. Disse dyrene har et bredt geografisk område og er til stede på alle kontinenter unntatt Antarktis1. Envenomasjon forårsaket av skorpioner resulterer i sykelighet eller død av tusenvis av mennesker hvert år globalt3. I 2019 ble det anslått at det var mer enn 1,2 millioner ulykker og 3,500 årlige dødsfall forårsaket av disse dyrene. I Brasil har antallet tilfeller økt eksponentielt, og siden 2017 har antallet tilfeller økt med mer enn 100 000 tilfeller per år,4 5,6. Den ukontrollerte urbaniseringen observert i Brasil de siste tiårene, uten tilstrekkelig kloakkbehandling og regelmessig innsamling og avhending av søppel, forbundet med miljøforringelse og klimaendringer, har gitt betingelser for spredning av invasive skorpioner, som T. serrulatus, øker kontakten med mennesker og resulterer dermed i skadelige ulykker 4,7,8. Det er omtrent 178 skorpionarter i Brasil, men stikk av medisinsk betydning er forårsaket av slekten Tityus, med fire arter (T. serrulatus, T. bahiensis, T. stigmurus og T. obscurus) som er av medisinsk bekymring, med Tityus serrulatus som ansvarlig for de alvorligste tilfellene og dødsfallene 7,9.
Instituto Butantan er det viktigste antivenomproduksjonslaboratoriet i Brasil, og leverer ca. 70 000 hetteglass med skorpionantivenom til det brasilianske helsesystemet. Kort fortalt inkluderer trinnene involvert i antivenomproduksjon inokulering av giftavledede antigener hos hester, innsamling og rensing av plasma med rike antistoffer, noe som resulterer i 5 ml hetteglass med skorpionantivenom. Hvert hetteglass er i stand til å nøytralisere minst 1 mg skorpiongift per ml antivenom. Arthropods Bioterium er en integrert del av industrisenteret, ansvarlig for å levere kildematerialet til skorpionantivenomet.
Arthropods Bioterium ved Instituto Butantan ble opprinnelig kalt Laboratory of Arthropods og ble etablert i 1967. Det var imidlertid først i 1995 at laboratoriet flyttet til et eksklusivt anlegg dedikert til å huse giftige leddyr10,11. På den tiden ble skorpionene holdt i et rom på 12 m2 uten kontrollert temperatur og fordelt på ca. 13 innhegninger, hver med maksimalt 300 dyr10. På grunn av den økende etterspørselen etter gift gjennom årene og det påfølgende behovet for å øke antall dyr, sammen med forbedringer i giftutvinningsprosessen, skjedde en stor endring i 2016. Laboratoriet ble integrert i industrisenteret til Instituto Butantan og ble omdøpt til Arthropods Bioterium. I tillegg flyttet Bioterium i 2016 til et nytt spesialbygd anlegg. Det nye skorpionrommet dekker et område på 24 m2 og inneholder ca. 48 polypropylenkapslinger, som hver huser opptil 300 dyr, som vist i figur 1. Dette resulterer i at totalt 10.000 til 20.000 individer blir opprettholdt under kontrollerte fangenskapsforhold, med variasjoner gjennom året. Skorpionene forvaltes nøye under strenge dyreholdsprotokoller for å sikre deres velferd samtidig som de oppfyller de høye produksjonskravene og overholder god praksis og etiske standarder for dyrepleie. For giftutvinning ble et spesifikt rom designet og konstruert, som huser to luftstrømskap som vist i figur 2A. Disse skapene fungerer som sikkerhetstiltak for å forhindre teknikere i å inhalere giftpartikler under ekstraksjonsprosedyren. Personlig verneutstyr (PPE) er obligatorisk for teknikerne, inkludert syntetiske forklær og FFP2-masker, for å unngå forurensning og sikre deres sikkerhet.
Figur 1: Generell oversikt over skorpionens rom i leddyrbioterium. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 2: Arbeidsområde . (A) Generell oversikt over giftutvinningsrommet til leddyrene Bioterium. (B) Luftstrømskap arbeidsflate. Alle materialer og utstyr er forberedt og arrangert på toppen av luftstrømskapets arbeidsflate. Den svarte pilen indikerer elektrostimulatorenheten, og den røde pilen indikerer tangen. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Omtrent 90% av T. serrulatus-skorpioner i leddyr Bioterium stammer fra forskjellige steder, samlet av kommunale helseagenter som en del av et overvåkings- og kontrollprogram for disse dyrene. Skorpionene blir fanget i urbane områder og deretter sendt til Instituto Butantan som en del av et samarbeidsprogram. T. serrulatus skorpioner er parthenogenetisk, noe som betyr at fødselen skjer som følge av utviklingen av avkom fra ubefruktede egg, uten tilstedeværelse av et individ av motsatt kjønn12. På grunn av denne typen reproduksjon blir noen dyr født i fangenskap i vårt anlegg og opprettholdes til de når voksenfasen, etter en lignende oppdrettsprotokoll som beskrevet nedenfor. Når de når voksenstadiet, blir de lagt til giftutvinningsrutinen. Ved ankomst gjennomgår skorpionene innledende screening, og de som er i gode helsemessige forhold holdes i kollektive innkapslinger som inneholder maksimalt 350 individer, delt på opprinnelsen. For hvert kabinett fylles et kontrollskjema ut daglig, som gir data om fôringsdato og hvilken type byttedyr som tilbys (cricket eller), vannforsyning, rengjøringsprosedyrer, antall døde dyr og antall gjenværende levende inne i kabinettet.
I en forhåndsplanlagt agenda blir dyr utsatt for elektrisk stimulering, og den resulterende giften til hundrevis av individer blir deretter lyofilisert, noe som resulterer i partier med frysetørket gift. Den standardiserte giften oppnådd fra denne prosessen er bestemt for hesteimmunisering som en del av produksjonsprosessen, samt å gi referansemateriale for kvalitetskontroll av det aktive stoffet og sluttproduktet.
Det er svært få anlegg i verden som er i stand til å holde et så stort antall skorpioner og utføre volumet av giftekstraksjoner i samsvar med god produksjonspraksis og etisk bruk av dyrene, som gjort i Arthropods Bioterium ved Instituto Butantan. Derfor er vårt mål å beskrive skorpionvedlikeholdsprotokollene og giftekstraksjonsprosedyrene som brukes i T. serrulatus-oppdrett , som vellykket gir den nødvendige mengden gift for produksjon av skorpionantivenom.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Protokoller som involverer virvelløse dyr er unntatt fra godkjenning fra Instituto Butantans komité for bruk og pleie av dyr. Imidlertid følger vedlikehold av skorpioner beskrevet her etiske parametere, og dyrevelferd respekteres i henhold til artens behov.
1. Bolig
- Oppbevar skorpionene i felles polypropylenbeholdere som innkapslinger (høyde 35 cm, bredde 35,5 cm, lengde 72 cm) som inneholder maksimalt 350 dyr.
- Vedlikehold rommet der dyreinnhegningene er plassert under en kontrollert temperatur på 24 °C (±0,5 °C) i en lyssyklus på 10 timer med lys på og 14 timer med lys av.
- Kle kapslingsgulvet (nederst) i hver beholder med kraftpapir festet med maskeringstape på kantene på alle sider slik at dyrene ikke kan komme under papiret (figur 3A).
- Bruk fire pappbrett (eggbrett) som vertikale underlag, stablet på den ene siden av beholderen, med en stiv pappark plassert mellom hvert brett (figur 3B, C).
- Plasser et grunt polypropylenbrett (vannbrett) på motsatt side av innhegningen, som inneholder gjennomvåt bomull som vannkilde for dyrene (figur 3B).
- Hold beholderne uten lokk for å øke luftstrømmen. Plasser en stripe med ca. 10 cm selvklebende plasttape på toppen av innsiden av kabinettet og på de øvre hjørnene for å gjøre veggene glatte nok til å forhindre at dyrene rømmer fra beholderen (figur 3A).
Figur 3: Klargjøring av hus og innkapsling . (A) Pilene indikerer kraftpapiret på bunnen, festet med maskeringstape på kantene. Stiplede linjer indikerer det selvklebende plastbåndet plassert på toppen av kabinettets indre overflate. (B) Vertikalt substrat (eggbrett stablet på den ene siden av beholderen) og et grunt polypropylenbrett (vannbrett) plassert på motsatt side. (C) Vertikal underlagsdetalj: eggbrett pillet med en stiv pappark mellom to brett. (D) Pappplater og eggbrett plassert i lag, som simulerer det naturlige, mørke og fuktige habitatet til T. serrulatus . (E) Dyr innkvartert i underlaget. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
2. Hygiene rutine
MERK: Hygienerutinen er delt inn i to vedlikeholdsprosedyrer: fullstendig og delvis vedlikehold. Den første utføres 2 dager etter fôring av dyrene eller når kabinettet er valgt for giftutvinning. Delvis vedlikehold utføres når dyrene ikke blir matet.
- Komplett vedlikehold
- Klargjør et rent kabinett med nytt underlag (eggbrett, papp og kraftpapir) og et rent vannbrett, som beskrevet i avsnitt 1.
- Bruk lange tang, fjern vannbrettet fra kabinettet. Hvis det er noen skorpioner på vannbrettet, fjern dem og legg dem i det rene kabinettet.
- Gjenta samme prosedyre som beskrevet i trinn 2.1.2 med alle eggbrett og pappplater, fjern alle skorpioner og plasser dem i det rene kabinettet.
- Etter fjerning av skuffene, fjern alle skorpioner som er igjen på gulvet i kabinettet og legg dem i det rene kabinettet. Sørg for å gjøre rede for eventuelle og kast dem riktig. Samle alle gjenværende levende byttedyr (insekter) og fjern dem fra kabinettet.
- Fjern alle engangsunderlag fra kabinettet (eggbrett, pappark og kraftpapir) og kast dem ordentlig. Send gjenbrukbare gjenstander (vannbrett og polypropylenbeholder) til sanitet.
MERK: Sanering av gjenbrukbare gjenstander utføres med 0,5% hypokloritt kombinert med et nøytralt vaskemiddel. Det er obligatorisk at materialene skylles grundig og rikelig med rennende vann etter bruk av sanitærprodukt eller løsning.
- Delvis vedlikehold
NOTAT: Delvis vedlikehold består av å inspisere alle underlagene (eggbrett og kraftpapir) med sikte på å fjerne døde skorpionkropper og annet uønsket rusk, men uten å kaste underlagene eller endre kabinettet.- Utfør inspeksjonen med lang tang for å forsiktig løfte hvert eggbrett og fjerne avfallet.
- Bytt om nødvendig ut ett eller flere eggbrett med et rent.
- Bytt vannbrettet helt ut med et rent med lange tang. Overfør eventuelle skorpioner på vannbrettet til eggbrettet i en annen del av kabinettet.
3. Fôring
- Fôr dyrene hver 15. dag i henhold til giftutvinningsplanen. Fôr dyr som skal melkes 7 dager før og 7 dager etter giftuttaket.
- For fôring, forsyn (Phoetalia pallida) og crickets (Gryllus sp.) vekselvis.
- Beregn mengden mat i henhold til energiinntaket til dyrene; Tilby 1 bytte for hver 3 eller 5 skorpioner i kabinettet.
- Tell den beregnede mengden byttedyr og plasser dem levende inne i innhegningen, og la dem stå i 2 dager før fullstendig vedlikehold (avsnitt 2.1).
- Når du tilbyr, bruk et kalsiumkarbonat med alkoholoppløsning rundt toppen av kapslene. Løsningen får til å glide og ikke kunne klatre på sideflaten av kabinettet, og dermed forhindre at insekter rømmer.
4. Utvinning av gift
MERK: Dyrene som brukes i giftekstraksjonsrutinen er voksne eller pre-voksne. På grunn av vanskeligheten med å bestemme den brasilianske gule skorpionens fullstendige modenhet (voksenfase), ble det bestemt at dyr med en total kroppslengde på 5 til 7 cm er kvalifisert for prosedyren.
- Melk hvert dyr hver 2-3 måneder.
- På dagen for giftuttak teller du alle levende dyr i innhegningen og overfører dem til en glassbeholder med lang tang (figur 4).
- Forbered og ordne alle materialer og utstyr som skal brukes på toppen av luftstrømskapets arbeidsflate. Koble strømledningen til elektrostimulatoren i stikkontakten og slå på elektrostimulatoren og luftstrømskapet (figur 2B).
- Bruk følgende innstillinger for elektrostimulatorparametere: potensial (forskjellen i potensialet mellom elektrodene): 540 mV, stress (varighet av den elektriske pulsen): 2 ms, virkning (intermittens for å moderere styrken som brukes, noe som vil redusere oppvarmingen av telsonorganisk vev): 70%, syklus (juster syklisk repetisjon): 1 s og intensitet (elektrisk strøm som sirkulerer gjennom dyrets muskel): 0,75 mA.
- Hold hvert dyr manuelt på en måte som telsonen står stille, ved å følge trinnene:
- Hold dyrets metassoma med rette tang (figur 5A).
- Immobiliser telsonen med buet tang (figur 5B).
- Hold telsonen fast med hånden (figur 5C,D).
- Etter fastholding, plasser telsonen i direkte kontakt med elektrostimulatorlederen, uten behov for å bruke en ledende løsning. Det elektriske støtet forårsaker en ufrivillig muskelkontraksjon av giftkjertelen og påfølgende utstøting av giftet.
- Samle giftdråpene direkte i et plastmikrorør plassert nær elektrostimulatorlederen (figur 6).
- Deretter slipper du dyret tilbake i glassbeholderen, ved å følge trinnene:
- Overfør dyrets telson fra hånden til de buede tangene.
- Plasser dyret forsiktig på bunnen av glassbeholderen.
- Utfør trinn 4.4-4.7 med hvert dyr i glassmottakeren.
- Etter at alle dyrene i glassmottakeren er melket, plasser dem tilbake i innhegningen.
- Oppbevar den oppsamlede giften ved -20 °C til lyofiliseringsprosessen.
Figur 4: Skorpioner i glassbeholderen. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 5: Fastholdelsesprosedyre for giftekstraksjon. (A) Metassoma fastholdt med rett tang (svart pil). (B) Telson immobilisert med buet tang (svart pil). (C) Overføring av den fastholdte telsonen fra tangen til hånden. (D) Telson behersket av hånden. Det anbefales at dyrene håndteres med bare hender, siden skorpionene kan gripe materialet med klørne når de bruker hansker, noe som gjør det vanskelig å frigjøre dem ved slutten av prosedyren og øker risikoen for ulykker betydelig. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 6: Giftekstraksjon. Et mikrorør av plast (hvit pil) plassert nær elektrostimulatoren (gul pil). Giftdråpene samles direkte inn i røret som opprettholdes ved romtemperatur under prosedyren. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Tretti standard operasjonelle prosedyrer (SOP) ble utviklet for hver prosedyre, noe som sikrer repeterbarhet av prosedyrene blant teknikere og overholdelse av kvalitetsparametere. Den gjennomsnittlige dødeligheten etter ekstraksjonsprosedyren er rundt 12%, noe som kan betraktes som lavt, med tanke på elektrostimuleringsrutinen og fangenskapsmiljøet, hvor stressfaktorer reduseres ved å anvende prosedyrene.
For å holde dyrene sunne, plasseres et brett dekket med bomull og vann i den ene enden av esken, mens pappplater og eggbrett er plassert i lag på motsatt side, som simulerer det naturlige mørke og fuktige habitatet til T. serrulatus (figur 3D, E). Det beskrevne substratet har vist seg å være effektivt for å opprettholde et stort antall dyr i et begrenset rom, og gir nok ly og plass, og sikrer dermed deres velferd.
Årlig overgår giftproduksjonen av T. serrulatus mengden 80 gram flytende gift, tilsvarende mer enn 13 gram frysetørket gift. Vi har samlet produksjonsindikatorer, for eksempel gjennomsnittlig gift melket per dyr, antall dyr og giftmengden oppnådd per måned, som vist relativt i tabell 1, figur 7, figur 8 og figur 9. De tre grafikkene viser en positiv trendlinje, noe som indikerer en positiv Pearsons korrelasjonskoeffisient (henholdsvis R = 0,68; R = 0,84; og R = 0,74). Omtrent 3000 til 5000 skorpioner melkes månedlig i henhold til antivenomindustriens etterspørsel, med gjennomsnittlig 90% av positive ekstraksjoner. De fleste dyrene blir utsatt for mer enn fem giftekstraksjonsprosedyrer i løpet av deres produktive liv i anlegget, noe som gjenspeiler dyrets levetid, lav sykelighet eller giftkjertelskade og lav dødelighet. Det er viktig å si at det er en nedgang i mengden gift hentet fra skorpioner som har blitt ekstrahert flere ganger, men de er fortsatt produktive.
Figur 7: Sammenligning av lyofilisert gift ekstrahert per dyr månedlig (2012-2022). Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 8: Sammenligning av lyofilisert gift ekstrahert per måned (2012-2022) Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 9: Sammenligning av antall skorpioner ekstrahert per måned (2012-2022). Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
| ÅR | Lyofilisert gift Ekstrahert per dyr / måned (mg) | Antall dyr tatt ut / måned (x1.000) | Månedlig mengde lyofilisert gift (g) |
| 2012 | 0,025 ± 0,04 | 1,0 ± 0,3 | 0,26 ± 0,08 |
| 2013 | 0,026 ± 0,04 | 0,9 ± 0,2 | 0,24 ± 0,08 |
| 2014 | 0,029 ± 0,04 | 1,3 ± 0,2 | 0,39 ± 0,1 |
| 2015 | 0,026 ± 0,1 | 1,1 ± 0,4 | 0,38 ± 0,12 |
| 2016 | 0,027 ± 0,02 | 1,5 ± 0,6 | 0,4 ± 0,14 |
| 2017 | 0,027 ± 0,04 | 2.1 ± 0,4 | 0,6 ± 0,16 |
| 2018 | 0,026 ± 0,04 | 3,3 ± 0,8 | 0,9 ± 0,24 |
| 2019 | 0,026 ± 0,01 | 5.8 ± 1.4 | 1,5 ± 0,4 |
| 2020 | 0,03 ± 0,04 | 2.3 ± 1.5 | 0,76 ± 0,3 |
| 2021 | 0,03 ± 0,04 | 3.3 ± 1.1 | 1,07 ± 0,4 |
| 2022 | 0,03 ± 0,04 | 3.6 ± 1.4 | 1,1 ± 0,5 |
Tabell 1: Sammenligning av produksjonsindikatorer (2012-2022).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Anvendelsen av de beskrevne metodene tillater oss å holde et stort antall T. serrulatus-individer og gir oss konsistent forutsigbarhet for antall skorpioner som trengs for årlig giftproduksjon. På denne måten er vi i stand til å gi nok partier gift på forhånd for å forsyne antivenomproduksjonsprosessen. Samtidig er utviklingen av forhåndsdefinerte tidsplaner for vedlikehold, fôring og giftutvinning en viktig del av aktivitetene og hjelper til med å overholde de beskrevne protokollene. Derfor er etablering av en rutine obligatorisk for å opprettholde kontinuerlig produksjon.
Så vidt forfatterne vet, er det ingen vitenskapelig beskrevne protokoller angående fangenskap av skorpioner med sikte på giftproduksjon. Dermed har utviklingen og anvendelsen av de beskrevne metodene som mål å presentere en effektiv og vellykket protokoll for å oppnå forhøyede produksjonstall, som presentert i denne artikkelen. Protokollen for giftekstraksjon som presenteres her, skiller seg fra andre tidligere beskrevne metoder da den ble utviklet med sikte på å forenkle prosedyren i størst mulig grad på grunn av behovet for å oppnå store mengder gift. Dermed tillater den presenterte metoden at et stort antall dyr kan ekstraheres på kort tid, og dermed oppnå et betydelig volum gift som er nødvendig for antivenomproduksjon. Det er viktig å fremheve at teknikerne som er involvert i håndteringen av dyrene under giftekstraksjonsprosedyren, er grundig opplært.
Grafikken illustrerer dataene presentert i tabell 1, og viser at det fra 2012 til 2022 var en lineær vekst i de presenterte markørene på grunn av det sterke forholdet mellom året og det lyofiliserte giftet ekstrahert per dyr, henholdsvis lyofilisert gift ekstrahert per måned og skorpioner ekstrahert per måned. Den lyofiliserte giften ekstrahert per dyr viste en liten økning gjennom årene, men mengden gift per måned og antall skorpioner ekstrahert økte markant fra 2016 og utover, noe som gjenspeiler de fysiske forbedringene i anlegget og utviklingen og anvendelsen av SOPene. Begge produksjonsmarkørene gikk ned i 2020 på grunn av covid-pandemien, men kom tilbake for å øke året etter.
Et annet viktig mål oppnådd med anvendelsen av den beskrevne metodikken var dyrevelferd. Protokollene ble utviklet under hensyntagen til T. serrulatus-biologien, artens nødvendigheter under fangenskapsforhold, og i en giftproduksjonsrutine, som skiller seg fra dens behov når den lever fritt, 5,12. De positive resultatene av metodikken, i tillegg til suksessen med å opprettholde en standardisert måte for et høyt antall dyr samtidig som de respekterer skorpionernes velferd og oppfyller etterspørselen etter giftproduksjon, vises i dyrets lange levetid, hvorav mange går gjennom mer enn fem giftekstraksjonsprosedyrer i løpet av deres produktive liv under de beskrevne fangenskapsforholdene.
Uansett hvilke protokoller som skal brukes, er kontinuerlig opplæring av teknikerne som er involvert i skorpionens husdyrhold eller giftutvinning ekstremt viktig for å redusere stresset forårsaket av dyrene på grunn av fangenskapsrutinen og dermed forbedre produksjonsparametrene. Konstant trening er også viktig for å redusere den potensielle risikoen for ulykker som involverer personellet under manipulering av skorpionene.
Oppdrettsprotokollene beskrevet her ble utviklet i henhold til nødvendigheten av å holde et stort antall T. serrulatus-individer i et begrenset rom, og for det var artens biologi og fysiologi av stor betydning. I tillegg til spesifisiteten til artene som holdes, kan de samme protokollene replikeres for flere andre skorpionslekter og arter, med mindre justeringer. Materialene som brukes er lett tilgjengelige og rimelige, noe som gjør vedlikeholdet levedyktig når det gjelder storskala husdyrhold som presentert. Når det gjelder giftekstraksjonsprotokollene, ble elektrostimulatoren som ble brukt spesialdesignet og kan replikeres av andre antivenomproduksjonslaboratorier.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingen interessekonflikter å opplyse.
Acknowledgments
Ingen
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Carboard sheet | NA | NA | |
| Egg tray | NA | NA | cardboard 36 places egg trays |
| Electro stimulator device | Instituto Butantan | ART-FV-01 | Internally designed for the venom extraction |
| Kraft paper | NA | NA | regular kraft paper |
| Making tape | NA | NA | White masking tape (24 mm x 50 m) |
| Polyproplene container | NA | NA | 70 L Polypropylene box (H – 35 cm, W – 35.5 cm, L - 72 cm) |
| Polyproplene tray | NA | NA | Polypropylene tray (H – 3.0 cm, W – 18.5 cm, L - 30 cm) |
| Self-adhesive plastic | NA | NA |
References
- Polis, G. A. The biology of scorpions. , Stanford University Press. (1990).
- Lacerda, A. B., et al. Scorpion envenomation in the state of São Paulo, Brazil: Spatiotemporal analysis of a growing public health concern. PLoS One. 17 (4), 0266138 (2022).
- Reckziegel, G. C., Pinto, V. L. Scorpionism in Brazil in the years 2000 to 2012. Journal of Venomous Animals and Toxins Including Tropical Diseases. 20, 46 (2014).
- Guerra-Duarte, C., et al. Scorpion envenomation in Brazil: Current scenario and perspectives for containing an increasing health problem. PLoS Neglected Tropical Diseases. 17 (2), 0011069 (2023).
- Pimenta, R. J. G., et al. Selected to survive and kill: Tityus serrulatus, the Brazilian yellow scorpion. PLoS One. 14 (4), e0214075 (2019).
- Lacerda, A. B., et al. Detection of areas vulnerable to scorpionism and its association with environmental factors in São Paulo, Brazil. Acta Tropica. 230, 106390 (2022).
- Torrez, P. P. Q., Dourado, F. S., Bertani, R., Cupo, P., França, F. O. deS. Scorpionism in Brazil: exponential growth of accidents and deaths from scorpion stings. Journal of the Brazilian Society of Tropical Medicine. 52, 20180350 (2019).
- Amado, T. F., et al. Vulnerable areas to accidents with scorpions in Brazil. Tropical Medicine & International Health. 26 (5), 13561 (2021).
- Brasil, Ministérioda da Saúde, Fundação Nacional de Saúde. Manual de diagnóstico e tratamento de acidentes por animais peçonhentos. , Ministérioda da Saúde, Fundação Nacional de Saúde. Brasília. (2001).
- Candido, D. M., Lucas, S. Maintenance of scorpions of the genus Tityus Koch (Scorpiones, Buthidae) for venom obtention at Instituto Butantan, São Paulo, Brazil. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases. 10 (1), 000100007 (2004).
- Lucas, S. O. Laboratório de Artrópodes do Instituto Butantan e os aracnídeos peçonhentos. História Ciências Saúde Manguinhos. 10 (3), 000300011 (2003).
- Braga-Pereira, G. F., Santos, A. J. Asexual reproduction in a sexual population of the Brazilian yellow scorpion (Tityus serrulatus, Buthidae) as evidence of facultative parthenogenesis. The Journal of Arachnology. 49 (2), (2021).
