Summary
Здесь мы представляем успешные протоколы поддержания и экстракции яда для крупномасштабного разведения Tityus serrulatus Lutz and Mello, 1922 (бразильский желтый скорпион) с целью обеспечения ядом для последующего производства противоядия скорпионов для удовлетворения потребностей бразильской системы здравоохранения.
Abstract
Яд скорпионов является проблемой общественного здравоохранения в нескольких тропических и субтропических странах. Tityus serrulatus Лутц и Мелло, 1922 (бразильский желтый скорпион) ответственны примерно за 150 000 случаев отравления в год в Бразилии, из которых 10% требуют лечения антитоксинами, чтобы обратить вспять опасные для жизни эффекты яда. Поэтому тысячи особей T. serrulatus содержатся в контролируемых условиях содержания в неволе для извлечения яда, который впоследствии используется в производстве национального запаса противоядия для скорпионов. Институт Бутантан является главной лабораторией по производству антитоксинов в Бразилии, поставляющей около 70 000 флаконов противоядия скорпиона для бразильской системы здравоохранения. Таким образом, протоколы содержания и методологии экстракции яда являются ключевыми моментами успеха крупномасштабного, стандартизированного производства яда. Целью данной статьи является описание протоколов содержания T. serrulatus в неволе, охватывающих рутину содержания и процедуры извлечения яда, соблюдение надлежащей производственной практики и обеспечение благополучия животных. Эти методы позволяют содержать до 20 000 животных в неволе, при этом ежемесячно доят от 3 000 до 5 000 скорпионов в соответствии с потребностями в производстве антитоксинов, достигая в среднем 90% положительной экстракции.
Introduction
Скорпионы — членистоногие, принадлежащие к классу Arachnida, отряду Scorpiones, который включает около 2621 вида 1,2. Эти животные имеют широкий географический ареал и присутствуют на всех континентах, кроме Антарктиды1. Отравления, вызываемые скорпионами, ежегодно приводят к заболеваемости или смерти тысяч людей во всем мире3. По оценкам, в 2019 году эти животные ежегодно происходили более 1,2 миллиона несчастных случаев и 3 500 смертей. В Бразилии число случаев заболевания растет в геометрической прогрессии, достигнув с 2017 года более 100 000 случаев в год 4,5,6. Неконтролируемая урбанизация, наблюдаемая в Бразилии в последние десятилетия, без надлежащей очистки сточных вод и регулярного сбора и утилизации мусора, связанная с деградацией окружающей среды и изменением климата, создала условия для размножения инвазивных скорпионов, таких как T. serrulatus, увеличивая контакты с людьми и, таким образом, приводя к опасным несчастным случаям 4,7,8. В Бразилии насчитывается около 178 видов скорпионов, но укусы, имеющие медицинское значение, вызывают род Tityus, причем четыре вида (T. serrulatus, T. bahiensis, T. stigmurus и T. obscurus) представляют медицинскую опасность, причем Tityus serrulatus несет ответственность за самые тяжелые случаи и смерти 7,9.
Институт Бутантан является главной лабораторией по производству антитоксинов в Бразилии, поставляя около 70 000 флаконов противоядия скорпиона для бразильской системы здравоохранения. Вкратце, этапы, связанные с производством антитоксинов, включают в себя инокуляцию антигенов, полученных из яда, в лошади, сбор и очистку плазмы с богатыми антителами, в результате чего получаются 5-миллилитровые флаконы с антитоксином скорпиона. Каждый флакон способен нейтрализовать, по крайней мере, 1 мг яда скорпиона на мл антитоксина. Биотериум членистоногих является неотъемлемой частью промышленного центра, отвечающего за поставку исходного материала для противоядия скорпиона.
Биотериум членистоногих в Институте Бутантан первоначально назывался Лабораторией членистоногих и был основан в 1967 году. Однако только в 1995 году лаборатория переехала в эксклюзивное помещение, предназначенное для содержания ядовитых членистоногих10,11. В то время скорпионы содержались в помещении площадью 12м2 без контролируемой температуры и распределялись примерно по 13 вольерам, в каждом из которых содержалось не более 300животных. В связи с растущим с годами спросом на яд и, как следствие, необходимостью увеличения поголовья животных, а также улучшениями в процессе извлечения яда, в 2016 году произошли серьезные изменения. Лаборатория была интегрирована в промышленный центр Института Бутантан и переименована в Биотериум членистоногих. Кроме того, в 2016 году Биотериум переехал в новое специально построенное здание. Новая комната для скорпионов занимает площадь 24м2 и содержит около 48 полипропиленовых вольеров, в каждом из которых содержится до 300 животных, как показано на рисунке 1. Это приводит к тому, что в общей сложности от 10 000 до 20 000 особей содержатся в контролируемых условиях содержания в неволе, с колебаниями в течение года. За скорпионами тщательно ухаживают в соответствии со строгими протоколами содержания, чтобы обеспечить их благополучие, отвечая высоким производственным требованиям и придерживаясь передовой практики и этических стандартов ухода за животными. Для экстракции яда было спроектировано и построено специальное помещение с двумя шкафами с воздушным потоком, как показано на рисунке 2А. Эти шкафы служат мерами безопасности, предотвращающими вдыхание частиц яда техниками во время процедуры экстракции. Средства индивидуальной защиты (СИЗ) являются обязательными для технических специалистов, включая синтетические фартуки и маски FFP2, чтобы избежать любого загрязнения и обеспечить их безопасность.
Рисунок 1: Общий вид комнаты скорпионов в Биотериуме членистоногих. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 2: Рабочая зона . (А) Общий вид помещения для извлечения яда в биотериуме членистоногих. (B) Рабочая поверхность шкафа с воздушным потоком. Все материалы и оборудование подготовлены и размещены на верхней рабочей поверхности шкафа с воздушным потоком. Черная стрелка указывает на электростимулирующее устройство, а красная стрелка – на щипцы. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
Около 90% скорпионов T. serrulatus в Arthropods Bioterium происходят из разных мест, собранных муниципальными органами здравоохранения в рамках программы эпиднадзора и контроля за этими животными. Скорпионов отлавливают в городских районах, а затем отправляют в Институт Бутантан в рамках совместной программы. Скорпионы T. serrulatus являются партеногенетическими, что означает, что рождение происходит как следствие развития потомства из неоплодотворенных яиц, без присутствия особи противоположного пола12. Из-за этого типа воспроизводства некоторые животные рождаются в неволе на нашем предприятии и содержатся до тех пор, пока они не достигнут взрослой фазы, следуя аналогичному протоколу содержания, описанному ниже. Как только они достигают взрослой стадии, их добавляют к процедуре извлечения яда. По прибытии скорпионы проходят первичный скрининг, а те, кто находится в хорошем состоянии здоровья, содержатся в коллективных вольерах, содержащих максимум 350 особей, разделенных по происхождению. По каждому вольеру ежедневно заполняется контрольная форма, в которой указываются данные о дате кормления и типе предлагаемой добычи (сверчок или таракан), водоснабжении, процедурах уборки, количестве погибших животных, количестве оставшихся живых внутри вольера.
По заранее запланированной программе животные подвергаются электрической стимуляции, а полученный яд сотен особей затем лиофилизируется, в результате чего получаются партии лиофилизированного яда. Стандартизированный яд, полученный в результате этого процесса, предназначен для иммунизации лошадей как части производственного процесса, а также для обеспечения эталонного материала для контроля качества активного вещества и конечного продукта.
В мире очень мало объектов, способных содержать такое большое количество скорпионов и выполнять извлечение яда в соответствии с надлежащей производственной практикой и этичным использованием животных, как это делается в Биотериуме членистоногих Института Бутантана. Поэтому наша цель состоит в том, чтобы описать протоколы ухода за скорпионами и процедуры экстракции яда, используемые в животноводстве T. serrulatus , которые успешно обеспечивают необходимое количество яда для производства противоядия скорпиона.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Протоколы, касающиеся беспозвоночных животных, не подлежат утверждению Комитетом по использованию и уходу за животными Института Бутантан. Тем не менее, содержание скорпионов, описанное здесь, следует этическим параметрам, и благополучие животных соблюдается в соответствии с потребностями вида.
1. Жилье
- Содержать скорпионов можно в общих полипропиленовых контейнерах в виде вольеров (высота 35 см, ширина 35,5 см, длина 72 см), содержащих не более 350 животных.
- Поддерживайте в помещении, где содержатся вольеры для животных, при контролируемой температуре 24 °C (±0,5 °C) в течение 10 часов при включенном освещении и 14 часов при выключенном освещении.
- Выстелите пол (дно) вольера каждого контейнера крафт-бумагой, закрепленной малярным скотчем по краям со всех сторон, чтобы животные не могли залезть под бумагу (рисунок 3А).
- Используйте четыре картонных лотка (лотка для яиц) в качестве вертикальной подложки, уложенной на одну сторону контейнера, с жестким картонным листом, помещенным между каждым лотком (Рисунок 3B, C).
- На противоположной стороне вольера поставьте неглубокий полипропиленовый лоток (поддон для воды), содержащий замоченный хлопок в качестве источника воды для животных (Рисунок 3B).
- Держите емкости без крышек, чтобы увеличить приток воздуха. Поместите полоску самоклеящейся пластиковой ленты примерно 10 см на верхнюю часть внутренней поверхности вольера и на верхние углы, чтобы стенки были достаточно гладкими, чтобы животные не могли выбраться из контейнера (Рисунок 3А).
Рисунок 3: Подготовка корпуса и корпуса . (A) Стрелками указана крафт-бумага на дне, закрепленная малярным скотчем по краям. Пунктирными линиями обозначена самоклеящаяся пластиковая лента, размещенная на верхней части внутренней поверхности корпуса. (B) Вертикальный субстрат (лотки для яиц, сложенные на одной стороне контейнера) и неглубокий полипропиленовый лоток (лоток для воды), размещенный на противоположной стороне. (C) Вертикальная деталь подложки: лотки для яиц, покрытые жестким картонным листом между двумя лотками. (D) Картонные листы и лотки для яиц, расположенные слоями, имитирующими естественную темную и влажную среду обитания T. serrulatus . (E) Животные, размещенные в субстрате. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
2. Гигиенический распорядок
ПРИМЕЧАНИЕ: Гигиеническая процедура делится на две процедуры технического обслуживания: полное и частичное техническое обслуживание. Первая выполняется через 2 дня после кормления животных или при выборе вольера для извлечения яда. Частичное содержание проводится, когда животные не накормлены.
- Комплексное техническое обслуживание
- Подготовьте чистый корпус с новым субстратом (лотки для яиц, картон и крафт-бумагу) и поддон для чистой воды, как описано в разделе 1.
- С помощью длинных щипцов извлеките поддон для воды из корпуса. Если на поддоне для воды есть скорпионы, удалите их и поместите в чистый вольер.
- Повторите ту же процедуру, описанную в шаге 2.1.2, со всеми лотками для яиц и картонными листами, удалив всех скорпионов и поместив их в чистый корпус.
- После снятия лотков удалите всех скорпионов, оставшихся на полу вольера, и поместите их в чистый вольер. Обязательно учитывайте все тушки и выбрасывайте их должным образом. Соберите всю оставшуюся живую добычу (насекомых) и удалите ее из вольера.
- Удалите из корпуса все одноразовые субстраты (лотки для яиц, картонный лист и крафт-бумагу) и надлежащим образом утилизируйте их. Отправьте многоразовые предметы (поддон для воды и полипропиленовый контейнер) на санитарную обработку.
ПРИМЕЧАНИЕ: Дезинфекция многоразовых предметов выполняется с использованием 0,5% гипохлорита в сочетании с нейтральным моющим средством. В обязательном порядке материалы тщательно и обильно промываются проточной водой после использования любого санитарного средства или раствора.
- Частичное техническое обслуживание
ПРИМЕЧАНИЕ: Частичное техническое обслуживание заключается в осмотре всех субстратов (лотков для яиц и крафт-бумаги) с целью удаления мертвых туш скорпионов и другого нежелательного мусора, но без выброса субстратов или замены корпуса.- Выполните осмотр с помощью длинных щипцов, чтобы осторожно поднять каждый лоток для яиц и удалить отходы.
- При необходимости замените один или несколько лотков для яиц чистыми.
- Полностью замените поддон для воды на чистый с помощью длинных щипцов. Перенесите скорпионов с лотка для воды в лоток для яиц в другой части вольера.
3. Кормление
- Кормите животных каждые 15 дней согласно графику извлечения яда. Кормите животных, которые будут доиться за 7 дней до и 7 дней после извлечения яда.
- Для кормления поочередно поставляйте тараканов (Phoetalia pallida) и сверчков (Gryllus sp.).
- Рассчитать количество корма в соответствии с потреблением энергии животными; Предложите 1 добычу за каждые 3 или 5 скорпионов в вольере.
- Подсчитайте рассчитанное количество кормовых объектов и поместите их живыми внутрь вольера, оставив на 2 дня до полного содержания (раздел 2.1).
- При предложении тараканов нанесите карбонат кальция со спиртовым раствором по верхней части вольеров. Раствор приводит к тому, что тараканы скользят и не могут взобраться на боковую поверхность вольера, тем самым предотвращая побег насекомых.
4. Извлечение яда
ПРИМЕЧАНИЕ: Животные, используемые в процедуре извлечения яда, являются взрослыми или предвзрослыми. Из-за сложности определения полной половой зрелости бразильского желтого скорпиона (взрослая фаза) было определено, что для процедуры подходят животные с общей длиной тела от 5 до 7 см.
- Доят каждое животное раз в 2-3 месяца.
- В день извлечения яда пересчитайте всех живых животных в вольере и переложите их в стеклянную емкость с помощью длинных щипцов (рис. 4).
- Подготовьте и разложите все материалы и оборудование, которые будут использоваться, на верхней части рабочей поверхности шкафа с воздушным потоком. Вставьте шнур питания электростимулятора в розетку и включите электростимулятор и шкаф обдува (Рисунок 2B).
- Используйте следующие параметры электростимулятора: потенциал (разность потенциалов между электродами): 540 мВ, напряжение (длительность электрического импульса): 2 мс, действие (прерывистость для умерения используемой потенции, что уменьшит нагрев органической ткани тельсона): 70%, цикл (регулировка циклического повторения): 1 с, и интенсивность (электрический ток, циркулирующий через мышцу животного): 0,75 мА.
- Вручную удерживайте каждое животное так, чтобы тельсон стоял неподвижно, выполнив следующие действия:
- Удерживают метассому животного прямыми щипцами (рисунок 5А).
- Обездвижьте тельсон изогнутыми щипцами (рис. 5Б).
- Удерживайте тельсон рукой (рис. 5C,D).
- После фиксации поместите тельсон в непосредственный контакт с проводником электростимулятора, без необходимости использования токопроводящего раствора. Удар электрическим током вызывает непроизвольное сокращение ядовитой железы и последующий выброс яда.
- Соберите капли яда непосредственно в пластиковую микротрубку, расположенную рядом с проводником электростимулятора (рис. 6).
- Далее выпустите животное обратно в стеклянную емкость, выполнив следующие действия:
- Перенесите тельсон животного с руки на изогнутые щипцы.
- Аккуратно положите животное на дно стеклянной емкости.
- Выполните шаги 4.4-4.7 с каждым животным в стакане.
- После того, как все животные в стеклянном приемнике будут доены, поместите их обратно в вольер.
- Собранный яд хранят при температуре -20 °C до начала процесса лиофилизации.
Рисунок 4: Скорпионы в стеклянной емкости. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 5: Процедура удержания при извлечении яда. (А) Метассома, удерживаемая прямыми щипцами (черная стрелка). (Б) Тельсон обездвижен изогнутыми щипцами (черная стрелка). (В) Перенос удерживаемого тельсона с щипцов на руку. (D) Тельсон схвачен за руку. Рекомендуется обращаться с животными голыми руками, так как при использовании перчаток скорпионы могут захватить материал когтями, что затруднит их освобождение в конце процедуры и значительно увеличит риск несчастных случаев. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 6: Извлечение яда. Пластиковая микротрубка (белая стрелка), помещенная рядом с электростимулятором (желтая стрелка). Капли яда собираются непосредственно в пробирку, поддерживаемую при комнатной температуре во время процедуры. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Для каждой процедуры было разработано тридцать стандартных операционных процедур (СОП), обеспечивающих повторяемость процедур среди технических специалистов и соблюдение параметров качества. Средняя смертность после процедуры экстракции составляет около 12%, что можно считать низким, учитывая рутину электростимуляции и условия неволи, где стрессовые факторы успешно снижаются с помощью процедур.
Чтобы животные были здоровы, на один конец коробки помещают лоток, покрытый ватой и водой, а картонные листы и лотки для яиц располагают слоями на противоположной стороне, имитируя естественную темную и влажную среду обитания T. serrulatus (рис. 3D, E). Описанный субстрат доказал свою эффективность при содержании большого количества животных в замкнутом пространстве, обеспечивая достаточное укрытие и пространство, тем самым обеспечивая их благополучие.
Ежегодно производство яда T. serrulatus превышает количество в 80 граммов жидкого яда, что соответствует более чем 13 граммам лиофилизированного яда. Мы собирали производственные показатели, такие как среднее количество доения яда на одно животное, количество животных и количество яда, получаемого за месяц, как показано в таблице 1, рисунке 7, рисунке 8 и рисунке 9. Три графика показывают положительную линию тренда, указывающую на положительный коэффициент корреляции Пирсона (соответственно R= 0,68; Р= 0,84; и R= 0,74). Ежемесячно доят от 3 000 до 5 000 скорпионов в соответствии с потребностями в производстве антитоксинов, в среднем 90% положительных экстрактов. Большинство животных подвергаются более чем пяти процедурам извлечения яда в течение их продуктивной жизни на объекте, что отражает продолжительность жизни животных, низкую заболеваемость или повреждение ядовитых желез и низкий уровень смертности. Важно отметить, что количество яда, получаемого из скорпионов, которые были извлечены больше раз, уменьшается, но они по-прежнему продуктивны.
Рисунок 7: Сравнение лиофилизированного яда, извлеченного на одно животное ежемесячно (2012-2022 гг.). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 8: Сравнение лиофилизированного яда, извлеченного за месяц (2012-2022 гг .) Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 9: Сравнение количества скорпионов, извлеченных за месяц (2012-2022 гг.). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этого рисунка.
| ГОД | Лиофилизированный яд Экстрагируется на животное в месяц (мг) | Количество добытых животных в месяц (x1.000) | Ежемесячная норма лиофилизированного яда (г) |
| 2012 | 0,025 ± 0,04 | 1,0 ± 0,3 | 0,26 ± 0,08 |
| 2013 | 0,026 ± 0,04 | 0,9 ± 0,2 | 0,24 ± 0,08 |
| 2014 | 0,029 ± 0,04 | 1,3 ± 0,2 | 0,39 ± 0,1 |
| 2015 | 0,026 ± 0,1 | 1,1 ± 0,4 | 0,38 ± 0,12 |
| 2016 | 0,027 ± 0,02 | 1,5 ± 0,6 | 0,4 ± 0,14 |
| 2017 | 0,027 ± 0,04 | 2,1 ± 0,4 | 0,6 ± 0,16 |
| 2018 | 0,026 ± 0,04 | 3,3 ± 0,8 | 0,9 ± 0,24 |
| 2019 | 0,026 ± 0,01 | 5,8 ± 1,4 | 1,5 ± 0,4 |
| 2020 | 0,03 ± 0,04 | 2,3 ± 1,5 | 0,76 ± 0,3 |
| 2021 | 0,03 ± 0,04 | 3.3 ± 1.1 | 1,07 ± 0,4 |
| 2022 | 0,03 ± 0,04 | 3,6 ± 1,4 | 1,1 ± 0,5 |
Таблица 1: Сравнение производственных показателей (2012-2022 гг.).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Применение описанных методов позволяет сохранить большое количество особей T. serrulatus и дает нам последовательную предсказуемость количества скорпионов, необходимых для ежегодной продукции яда. Таким образом, мы можем заранее предоставить достаточное количество партий яда для обеспечения процесса производства антитоксинов. В то же время разработка заранее установленных графиков содержания, кормления и извлечения яда является неотъемлемой частью деятельности и способствует соблюдению описанных протоколов. Поэтому установление рутины является обязательным для поддержания непрерывного производства.
Насколько известно авторам, не существует научно описанных протоколов, касающихся содержания скорпионов в неволе с целью получения яда. Таким образом, разработка и применение описанных методов направлены на то, чтобы представить эффективный и успешный протокол для достижения повышенных производственных показателей, представленный в данной статье. Представленный здесь протокол экстракции яда отличается от других ранее описанных методик тем, что он был разработан с целью максимально упростить процедуру в связи с необходимостью получения больших объемов яда. Таким образом, представленный способ позволяет за короткий период извлечь большое количество животных, следовательно, получить значительный объем яда, необходимого для производства антитоксинов. Важно подчеркнуть, что технические специалисты, участвующие в обращении с животными во время процедуры извлечения яда, проходят тщательную подготовку.
График иллюстрирует данные, представленные в таблице 1, показывая, что с 2012 по 2022 гг. наблюдался линейный рост представленных маркеров из-за сильной связи между годом и лиофилизированным ядом, извлеченным на животное, лиофилизированным ядом, извлеченным за месяц, и скорпионами, извлеченными за месяц, соответственно. Количество лиофилизированного яда, извлеченного на одно животное, с годами немного увеличилось, но количество яда в месяц и количество извлеченных скорпионов заметно увеличились с 2016 года, что отражает физические улучшения в учреждении, а также разработку и применение СОП. В 2020 году из-за пандемии COVID оба производственных показателя снизились, но в следующем году возобновили рост.
Еще одной важной задачей, достигаемой с помощью описанной методологии, является благополучие животных. Протоколы были разработаны с учетом биологии T. serrulatus, потребностей вида в условиях неволи и режима производства яда, который отличается от его потребностей при свободном проживании 5,12. Положительные результаты методологии, в дополнение к успеху в поддержании стандартизированного образа жизни большого количества животных при уважении к благополучию скорпионов и удовлетворении потребностей в производстве яда, проявляются в длительной продолжительности жизни животных, многие из которых проходят более пяти процедур экстракции яда в течение своей продуктивной жизни в описанных условиях неволи.
Независимо от используемых протоколов, непрерывное обучение техников, участвующих в разведении скорпионов или извлечении яда, чрезвычайно важно для снижения стресса, причиняемого животным из-за рутинного содержания в неволе, и, следовательно, улучшения производственных параметров. Постоянное обучение также необходимо для снижения потенциального риска несчастных случаев с участием персонала во время манипуляций со скорпионами.
Описанные здесь протоколы содержания были разработаны в соответствии с необходимостью содержания большого количества особей T. serrulatus в ограниченном пространстве, и для этого биология и физиология вида имели большое значение. Помимо специфичности сохраняемого вида, те же протоколы могут быть воспроизведены для нескольких других родов и видов скорпионов с незначительными корректировками. Используемые материалы легко доступны и недороги, что делает обслуживание жизнеспособным в случае крупномасштабного животноводства, как представлено в представленном виде. Что касается протоколов экстракции яда, то используемый электростимулятор был специально разработан и может быть воспроизведен другими лабораториями, производящими антитоксины.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
У авторов нет конфликта интересов, который можно было бы раскрыть.
Acknowledgments
Никакой
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Carboard sheet | NA | NA | |
| Egg tray | NA | NA | cardboard 36 places egg trays |
| Electro stimulator device | Instituto Butantan | ART-FV-01 | Internally designed for the venom extraction |
| Kraft paper | NA | NA | regular kraft paper |
| Making tape | NA | NA | White masking tape (24 mm x 50 m) |
| Polyproplene container | NA | NA | 70 L Polypropylene box (H – 35 cm, W – 35.5 cm, L - 72 cm) |
| Polyproplene tray | NA | NA | Polypropylene tray (H – 3.0 cm, W – 18.5 cm, L - 30 cm) |
| Self-adhesive plastic | NA | NA |
References
- Polis, G. A. The biology of scorpions. , Stanford University Press. (1990).
- Lacerda, A. B., et al. Scorpion envenomation in the state of São Paulo, Brazil: Spatiotemporal analysis of a growing public health concern. PLoS One. 17 (4), 0266138 (2022).
- Reckziegel, G. C., Pinto, V. L. Scorpionism in Brazil in the years 2000 to 2012. Journal of Venomous Animals and Toxins Including Tropical Diseases. 20, 46 (2014).
- Guerra-Duarte, C., et al. Scorpion envenomation in Brazil: Current scenario and perspectives for containing an increasing health problem. PLoS Neglected Tropical Diseases. 17 (2), 0011069 (2023).
- Pimenta, R. J. G., et al. Selected to survive and kill: Tityus serrulatus, the Brazilian yellow scorpion. PLoS One. 14 (4), e0214075 (2019).
- Lacerda, A. B., et al. Detection of areas vulnerable to scorpionism and its association with environmental factors in São Paulo, Brazil. Acta Tropica. 230, 106390 (2022).
- Torrez, P. P. Q., Dourado, F. S., Bertani, R., Cupo, P., França, F. O. deS. Scorpionism in Brazil: exponential growth of accidents and deaths from scorpion stings. Journal of the Brazilian Society of Tropical Medicine. 52, 20180350 (2019).
- Amado, T. F., et al. Vulnerable areas to accidents with scorpions in Brazil. Tropical Medicine & International Health. 26 (5), 13561 (2021).
- Brasil, Ministérioda da Saúde, Fundação Nacional de Saúde. Manual de diagnóstico e tratamento de acidentes por animais peçonhentos. , Ministérioda da Saúde, Fundação Nacional de Saúde. Brasília. (2001).
- Candido, D. M., Lucas, S. Maintenance of scorpions of the genus Tityus Koch (Scorpiones, Buthidae) for venom obtention at Instituto Butantan, São Paulo, Brazil. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases. 10 (1), 000100007 (2004).
- Lucas, S. O. Laboratório de Artrópodes do Instituto Butantan e os aracnídeos peçonhentos. História Ciências Saúde Manguinhos. 10 (3), 000300011 (2003).
- Braga-Pereira, G. F., Santos, A. J. Asexual reproduction in a sexual population of the Brazilian yellow scorpion (Tityus serrulatus, Buthidae) as evidence of facultative parthenogenesis. The Journal of Arachnology. 49 (2), (2021).
