Summary
Her præsenterer vi vellykkede vedligeholdelses- og giftekstraktionsprotokoller for storstilet Tityus serrulatus Lutz og Mello, 1922 (brasiliansk gul skorpion) husdyrhold med det formål at levere gift til efterfølgende produktion af skorpionmodgift for at imødekomme efterspørgslen fra det brasilianske sundhedssystem.
Abstract
Skorpiongift er et folkesundhedsproblem i flere tropiske og subtropiske lande. Tityus serrulatus Lutz og Mello, 1922 (brasiliansk gul skorpion) er ansvarlige for ca. 150.000 gifttilfælde om året i Brasilien, hvoraf 10% kræver modgiftbehandling for at vende livstruende gifteffekter. Derfor opretholdes tusindvis af T. serrulatus-individer under kontrollerede fangenskabsbetingelser til giftekstraktion, der efterfølgende anvendes til fremstilling af den nationale forsyning af skorpionmodgift. Instituto Butantan er det vigtigste laboratorium til fremstilling af modgift i Brasilien og leverer omkring 70.000 hætteglas med skorpionmodgift til det brasilianske sundhedssystem. Således er opdrætsprotokollerne og giftekstraktionsmetoderne nøglepunkter for succesen med storstilet, standardiseret giftproduktion. Formålet med denne artikel er at beskrive protokollerne for opdræt af T. serrulatus , der omfatter opdrætsrutinen og giftudvindingsprocedurerne, følger god fremstillingspraksis og sikrer dyrevelfærd. Denne praksis giver mulighed for at opretholde op til 20.000 dyr i fangenskab med en rutine på 3.000 til 5.000 skorpioner, der malkes månedligt i henhold til efterspørgslen efter modgiftfremstilling, hvilket opnår et gennemsnit på 90% af positiv ekstraktion.
Introduction
Skorpioner er leddyr, der tilhører klassen Arachnida, orden Scorpiones, som omfatter ca. 2.621 arter 1,2. Disse dyr har et bredt geografisk område og er til stede på alle kontinenter undtagen Antarktis1. Forgiftning forårsaget af skorpioner resulterer i sygelighed eller død for tusindvis af mennesker hvert år globalt3. I 2019 blev det anslået, at der var mere end 1,2 millioner ulykker og 3,500 årlige dødsfald forårsaget af disse dyr. I Brasilien er antallet af sager steget eksponentielt og nået mere end 100,000 sager om året siden 2017 4,5,6. Den ukontrollerede urbanisering, der er observeret i Brasilien i de sidste årtier uden tilstrækkelig spildevandsbehandling og regelmæssig indsamling og bortskaffelse af affald, forbundet med miljøforringelse og klimaændringer, har givet betingelser for spredning af invasive skorpioner, såsom T. serrulatus, hvilket øger kontakten med mennesker og dermed resulterer i skadelige ulykker 4,7,8. Der er omkring 178 skorpionarter i Brasilien, men stik af medicinsk betydning er forårsaget af slægten Tityus, hvor fire arter (T. serrulatus, T. bahiensis, T. stigmurus og T. obscurus) er af medicinsk bekymring, hvor Tityus serrulatus er ansvarlig for de mest alvorlige tilfælde og dødsfald 7,9.
Instituto Butantan er det vigtigste laboratorium til fremstilling af modgift i Brasilien og leverer ca. 70.000 hætteglas med skorpionmodgift til det brasilianske sundhedssystem. Kort fortalt omfatter de trin, der er involveret i fremstilling af modgift, podning af giftafledte antigener i heste, indsamling og oprensning af rige antistofplasma, hvilket resulterer i 5 ml hætteglas med skorpionmodgift. Hvert hætteglas er i stand til at neutralisere mindst 1 mg skorpiongift pr. ml modgift. Arthropods Bioterium er en integreret del af industricentret, der er ansvarlig for at levere kildematerialet til skorpionmodgiften.
Arthropods Bioterium på Instituto Butantan blev oprindeligt navngivet Laboratory of Arthropods og blev etableret i 1967. Det var dog først i 1995, at laboratoriet flyttede til et eksklusivt anlæg dedikeret til at huse giftige leddyr10,11. På det tidspunkt blev skorpionerne holdt i et rum på 12 m2 uden kontrolleret temperatur og fordelt på ca. 13 indhegninger, der hver husede maksimalt 300 dyr10. På grund af den stigende efterspørgsel efter gift gennem årene og det deraf følgende behov for at øge antallet af dyr sammen med forbedringer i giftudvindingsprocessen skete der en større ændring i 2016. Laboratoriet blev integreret i det industrielle centrum af Instituto Butantan og blev omdøbt til Arthropods Bioterium. Derudover flyttede Bioterium i 2016 til et nyt specialbygget anlæg. Det nye skorpionrum dækker et areal på 24 m2 og indeholder ca. 48 polypropylenanlæg, der hver huser op til 300 dyr, som vist i figur 1. Dette resulterer i, at i alt 10.000 til 20.000 individer opretholdes under kontrollerede fangenskabsforhold med variationer i løbet af året. Skorpionerne forvaltes omhyggeligt under strenge opdrætsprotokoller for at sikre deres velfærd, samtidig med at de opfylder de høje produktionskrav og overholder god praksis og etiske standarder for dyrepleje. Til giftudvinding blev der designet og konstrueret et specifikt rum, der huser to luftstrømsskabe som vist i figur 2A. Disse skabe tjener som sikkerhedsforanstaltninger for at forhindre teknikere i at indånde giftpartikler under ekstraktionsproceduren. Personligt beskyttelsesudstyr (PPE) er obligatorisk for teknikerne, herunder syntetiske forklæder og FFP2-masker, for at undgå forurening og sikre deres sikkerhed.
Figur 1: Generelt billede af skorpionens rum i leddyrs bioterium. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: Arbejdsområde . (A) Generelt billede af giftekstraktionsrummet i leddyrbioterium. (B) Arbejdsflade for luftstrømskabinettet. Alle materialer og udstyr er forberedt og arrangeret på toppen af luftstrømsskabets arbejdsflade. Den sorte pil angiver elektrostimulatorenheden, og den røde pil angiver tangen. Klik her for at se en større version af denne figur.
Omkring 90% af T. serrulatus-skorpionerne i leddyrbioteriet stammer fra forskellige steder, indsamlet af kommunale sundhedsagenter som led i et overvågnings- og kontrolprogram for disse dyr. Skorpionerne fanges i byområder og sendes derefter til Instituto Butantan som en del af et samarbejdsprogram. T. serrulatus skorpioner er partenogenetiske, hvilket betyder, at fødslen opstår som følge af udviklingen af afkom fra ufrugtede æg uden tilstedeværelse af et individ af det modsatte køn12. På grund af denne type reproduktion fødes nogle dyr i fangenskab i vores anlæg og opretholdes, indtil de når voksenfasen, efter en lignende opdrætsprotokol som beskrevet nedenfor. Når de når voksenstadiet, føjes de til giftekstraktionsrutinen. Ved ankomsten gennemgår skorpionerne indledende screening, og de under gode sundhedsforhold opbevares i kollektive kabinetter, der indeholder højst 350 individer, divideret med deres oprindelse. For hvert kabinet udfyldes dagligt en kontrolformular, der giver data om fodringsdatoen og den type bytte, der tilbydes (cricket eller kakerlak), vandforsyning, rengøringsprocedurer, antallet af døde dyr og antallet af resterende levende inde i kabinettet.
I en forudbestemt dagsorden udsættes dyrene for elektrisk stimulering, og den resulterende gift fra hundredvis af individer frysetørres derefter, hvilket resulterer i partier frysetørret gift. Det standardiserede gift opnået ved denne proces er bestemt til hesteimmunisering som led i fremstillingsprocessen samt at tilvejebringe referencemateriale til kvalitetskontrol af det aktive stof og slutproduktet.
Der er meget få faciliteter i verden, der er i stand til at holde et så stort antal skorpioner og udføre mængden af giftekstraktioner i overensstemmelse med god fremstillingspraksis og etisk brug af dyrene, som det gøres i leddyrs bioterium fra Instituto Butantan. Derfor er vores mål at beskrive skorpionvedligeholdelsesprotokollerne og giftekstraktionsprocedurerne, der anvendes i T. serrulatus-husdyrhold , som med succes leverer den nødvendige mængde gift til produktion af skorpionmodgift.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Protokoller, der involverer hvirvelløse dyr, er undtaget fra Instituto Butantans udvalg for brug og pleje af dyrs godkendelse. Imidlertid følger vedligeholdelsen af skorpioner beskrevet her etiske parametre, og dyrevelfærd respekteres i henhold til artens behov.
1. Boliger
- Opbevar skorpionerne i fælles polypropylenbeholdere som kabinetter (højde 35 cm, bredde 35,5 cm, længde 72 cm), der indeholder højst 350 dyr.
- Anlæggene holdes under en kontrolleret temperatur på 24 °C (±0,5 °C) i en lyscyklus på 10 timer med tændt lys og 14 timer med slukket lys.
- Beklæd anlæggets gulv (nederst) på hver beholder med kraftpapir fastgjort med maskeringstape på kanterne på alle sider, så dyrene ikke kan komme ind under papiret (figur 3A).
- Brug fire papbakker (æggebakker) som lodrette underlag, stablet på den ene side af beholderen, med et stift papark placeret mellem hver bakke (figur 3B, C).
- På den modsatte side af anlægget anbringes en lav polypropylenbakke (vandbakke), der indeholder gennemblødt bomuld som vandkilde for dyrene (figur 3B).
- Opbevar beholderne uden låg for at øge luftstrømmen. Der anbringes en strimmel på ca. 10 cm selvklæbende plasttape øverst på anlæggets indvendige overflade og i de øverste hjørner for at gøre væggene glatte nok til at forhindre dyrene i at slippe ud af beholderen (figur 3A).
Figur 3: Forberedelse af hus og anlæg . (A) Pile angiver kraftpapiret i bunden, fastgjort med maskeringstape på kanterne. Stiplede linjer angiver den selvklæbende plasttape, der er placeret øverst på kabinettets indre overflade. (B) Lodret substrat (æggebakker stablet på den ene side af beholderen) og en lav polypropylenbakke (vandbakke) placeret på den modsatte side. (C) Lodret substratdetalje: æggebakker pillet med et stift papark mellem to bakker. D) Kartonplader og æggebakker placeret i lag, der simulerer T. serrulatus ' naturlige mørke og fugtige levested. E) Dyr, der er anbragt i underlaget. Klik her for at se en større version af denne figur.
2. Hygiejne rutine
BEMÆRK: Hygiejnerutinen er opdelt i to vedligeholdelsesprocedurer: fuldstændig og delvis vedligeholdelse. Den første udføres 2 dage efter fodring af dyrene, eller når kabinettet vælges til giftekstraktion. Delvis vedligeholdelse udføres, når dyrene ikke fodres.
- Komplet vedligeholdelse
- Forbered et rent kabinet med nyt substrat (æggebakker, pap og kraftpapir) og en bakke til rent vand som beskrevet i punkt 1.
- Brug lange tang til at fjerne vandbakken fra kabinettet. Hvis der er skorpioner på vandbakken, skal du fjerne dem og placere dem i det rene kabinet.
- Gentag den samme procedure som beskrevet i trin 2.1.2 med alle æggebakker og papplader, fjern alle skorpioner og læg dem i det rene kabinet.
- Efter fjernelse af bakkerne skal du fjerne alle de skorpioner, der er tilbage på gulvet i kabinettet, og placere dem i det rene kabinet. Sørg for at redegøre for eventuelle slagtekroppe og kassér dem korrekt. Saml alt resterende levende bytte (insekter) og fjern dem fra kabinettet.
- Fjern alle engangsunderlag fra kabinettet (æggebakker, papark og kraftpapir), og kassér dem korrekt. Send de genanvendelige genstande (vandbakke og polypropylenbeholder) til sanitet.
BEMÆRK: Saniteten af de genanvendelige genstande udføres med 0,5% hypochlorit kombineret med et neutralt rengøringsmiddel. Det er obligatorisk, at materialerne skylles grundigt og rigeligt med rindende vand efter brug af sanitetsprodukter eller -opløsninger.
- Delvis vedligeholdelse
BEMÆRK: Delvis vedligeholdelse består i inspektion af alle substrater (æggebakker og kraftpapir) med det formål at fjerne døde skorpionkroppe og andet uønsket affald, men uden at kassere substraterne eller ændre kabinettet.- Udfør inspektionen ved hjælp af lange tang for forsigtigt at løfte hver æggebakke og fjerne affaldet.
- Udskift om nødvendigt en eller flere æggebakker med en ren.
- Udskift vandbakken helt med en ren ved hjælp af lange tang. Overfør eventuelle skorpioner på vandbakken til æggebakken i en anden del af kabinettet.
3. Fodring
- Foder dyrene hver 15. dag i henhold til giftekstraktionsplanen. Foder dyr, der vil blive malket 7 dage før og 7 dage efter giftekstraktionen.
- Til fodring leveres kakerlakker (Phoetalia pallida) og crickets (Gryllus sp.) skiftevis.
- Beregn mængden af mad i henhold til dyrenes energiindtag; Tilbyd 1 bytte for hver 3 eller 5 skorpioner i kabinettet.
- Tæl den beregnede mængde byttedyr og læg dem levende inde i anlægget, og lad dem stå i 2 dage før den fuldstændige vedligeholdelse (afsnit 2.1).
- Når du tilbyder kakerlakker, skal du anvende et calciumcarbonat med alkoholopløsning omkring toppen af kabinetterne. Løsningen får kakerlakkerne til at glide og ikke være i stand til at klatre op på kabinettets sideflade, hvilket forhindrer insekterne i at undslippe.
4. Ekstraktion af gift
BEMÆRK: De dyr, der anvendes i giftekstraktionsrutinen, er voksne eller præ-voksne. På grund af vanskeligheden ved at bestemme den fuldstændige seksuelle modenhed af den brasilianske gule skorpion (voksenfase) blev det fastslået, at dyr med en samlet kropslængde på 5 til 7 cm er berettigede til proceduren.
- Mælk hvert dyr hver 2-3 måneder.
- På dagen for giftekstraktion tælles alle levende dyr i anlægget og overføres til en glasbeholder med lang tang (figur 4).
- Forbered og arranger alle materialer og udstyr, der skal bruges oven på luftstrømsskabets arbejdsflade. Sæt elektrostimulatorens netledning i stikkontakten, og tænd elektrostimulatoren og luftstrømsskabet (figur 2B).
- Brug følgende elektrostimulatorparametre: potentiale (forskel i potentialet mellem elektroderne): 540 mV, stress (varighed af den elektriske puls): 2 ms, handling (intermittens for at moderere den anvendte styrke, hvilket ville reducere opvarmningen af telsonens organiske væv): 70%, cyklus (juster den cykliske gentagelse): 1 s og intensitet (elektrisk strøm, der cirkulerer gennem dyrets muskel): 0,75 mA.
- Fasthold hvert dyr manuelt på en måde, så telsonen står stille ved at følge trinene:
- Hold dyrets metassoma med lige tang (figur 5A).
- Immobiliser telsonen med buede tang (figur 5B).
- Fasthold telsonen med hånden (figur 5C, D).
- Efter fastholdelse skal du placere telsonen i direkte kontakt med elektrostimulatorlederen uden behov for at bruge en ledende opløsning. Det elektriske stød forårsager en ufrivillig muskelsammentrækning af giftkirtlen og deraf følgende udstødning af giften.
- Opsaml giftdråberne direkte i et plastmikrorør placeret tæt på elektrostimulatorlederen (figur 6).
- Slip derefter dyret tilbage i glasbeholderen ved at følge trinene:
- Overfør dyrets telson fra hånden til de buede tang.
- Placer dyret forsigtigt på bunden af glasbeholderen.
- Udfør trin 4.4-4.7 med hvert dyr i glasmodtageren.
- Når alle dyrene i glasbeholderen er malket, sættes de tilbage i anlægget.
- Opbevar det opsamlede gift ved -20 °C indtil frysetørringsprocessen.
Figur 4: Skorpioner i glasbeholderen. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 5: Fastholdelsesprocedure for giftekstraktion. (A) Metassoma fastholdt med lige tang (sort pil). (B) Telson immobiliseret med buet tang (sort pil). (C) Overførsel af det fastholdte telson fra tangen til hånden. (D) Telson fastholdt af hånden. Det anbefales, at dyrene håndteres med bare hænder, da skorpionerne, når de bruger handsker, kan gribe materialet med deres kløer, hvilket gør det vanskeligt at frigøre dem ved afslutningen af proceduren og øger risikoen for ulykker betydeligt. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 6: Giftekstraktion. Et plastmikrorør (hvid pil) placeret tæt på elektrostimulatoren (gul pil). Giftdråberne opsamles direkte i røret, der opretholdes ved stuetemperatur under proceduren. Klik her for at se en større version af denne figur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Tredive standard operationelle procedurer (SOP'er) blev udviklet for hver procedure, hvilket sikrer repeterbarheden af procedurerne blandt teknikere og overholdelse af kvalitetsparametre. Den gennemsnitlige dødelighed efter ekstraktionsproceduren er omkring 12%, hvilket kan betragtes som lavt i betragtning af elektrostimuleringsrutinen og fangenskabsmiljøet, hvor stressfaktorer med succes reduceres ved at anvende procedurerne.
For at holde dyrene sunde placeres en bakke dækket med bomuld og vand i den ene ende af kassen, mens papplader og æggebakker er placeret i lag på den modsatte side, hvilket simulerer T . serrulatus naturlige mørke og fugtige habitat (figur 3D, E). Det beskrevne substrat har vist sig at være effektivt til at opretholde et stort antal dyr i et begrænset rum, hvilket giver nok husly og plads og dermed sikrer deres velfærd.
Årligt overstiger produktionen af T. serrulatus-gift mængden af 80 gram flydende gift, svarende til mere end 13 gram frysetørret gift. Vi har indsamlet produktionsindikatorer, såsom den gennemsnitlige gift, der malkes pr. dyr, antallet af dyr og den giftmængde, der opnås pr. måned, som vist sammenligneligt i tabel 1, figur 7, figur 8 og figur 9. De tre grafikker viser en positiv trendlinje, der indikerer en positiv Pearsons korrelationskoefficient (henholdsvis R = 0,68; R= 0,84; og R = 0,74). Omkring 3.000 til 5.000 skorpioner malkes månedligt i henhold til efterspørgslen efter modgiftsproduktion, med et gennemsnit på 90% af positive ekstraktioner. De fleste af dyrene udsættes for mere end fem giftekstraktionsprocedurer i løbet af deres produktive liv i anlægget, hvilket afspejler dyrenes levetid, den lave sygelighed eller giftkirtelskader og den lave dødelighed. Det er vigtigt at sige, at der er et fald i mængden af gift opnået fra skorpioner, der er blevet ekstraheret flere gange, men de er stadig produktive.
Figur 7: Sammenligning af frysetørret gift udvundet pr. dyr månedligt (2012-2022). Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 8: Sammenligning af frysetørret gift udvundet pr. måned (2012-2022) Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 9: Sammenligning af antallet af udtrukne skorpioner pr. måned (2012-2022). Klik her for at se en større version af dette tal.
| ÅR | Frysetørret gift Udvundet pr. dyr/måned (mg) | Antal udvundne dyr/måned (x1.000) | Månedlig mængde frysetørret gift (g) |
| 2012 | 0,025 ± 0,04 | 1,0 ± 0,3 | 0.26 ± 0.08 |
| 2013 | 0,026 ± 0,04 | 0.9 ± 0.2 | 0,24 ± 0,08 |
| 2014 | 0,029 ± 0,04 | 1.3 ± 0.2 | 0.39 ± 0.1 |
| 2015 | 0,026 ± 0,1 | 1.1 ± 0.4 | 0,38 ± 0,12 |
| 2016 | 0,027 ± 0,02 | 1.5 ± 0.6 | 0.4 ± 0.14 |
| 2017 | 0,027 ± 0,04 | 2.1 ± 0.4 | 0.6 ± 0.16 |
| 2018 | 0,026 ± 0,04 | 3.3 ± 0.8 | 0,9 ± 0,24 |
| 2019 | 0,026 ± 0,01 | 5.8 ± 1.4 | 1.5 ± 0.4 |
| 2020 | 0,03 ± 0,04 | 2.3 ± 1.5 | 0,76 ± 0,3 |
| 2021 | 0,03 ± 0,04 | 3.3 ± 1.1 | 1,07 ± 0,4 |
| 2022 | 0,03 ± 0,04 | 3.6 ± 1.4 | 1.1 ± 0.5 |
Tabel 1: Sammenligning af produktionsindikatorer (2012-2022).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Anvendelsen af de beskrevne metoder giver os mulighed for at holde et stort antal T. serrulatus-individer og giver os konsekvent forudsigelighed for antallet af skorpioner, der er nødvendige til årlig giftproduktion. På denne måde er vi i stand til at levere nok partier gift på forhånd til at levere modgiftfremstillingsprocessen. Samtidig er udviklingen af forudbestemte tidsplaner for vedligeholdelse, fodring og giftekstraktion en væsentlig del af aktiviteterne og hjælper med at overholde de beskrevne protokoller. Derfor er etablering af en rutine obligatorisk for at opretholde kontinuerlig produktion.
Så vidt forfatterne ved, er der ingen videnskabeligt beskrevne protokoller vedrørende skorpioner i fangenskab med henblik på giftproduktion. Udviklingen og anvendelsen af de beskrevne metoder sigter således mod at præsentere en effektiv og vellykket protokol til opnåelse af forhøjede produktionstal som præsenteret i denne artikel. Protokollen for giftekstraktion, der præsenteres her, adskiller sig fra andre tidligere beskrevne metoder, da den blev udviklet med det formål at forenkle proceduren i videst muligt omfang på grund af behovet for at opnå store mængder gift. Den præsenterede metode gør det således muligt at ekstrahere et stort antal dyr på kort tid, hvilket resulterer i at opnå en betydelig mængde gift, der er nødvendig til modgiftproduktion. Det er vigtigt at fremhæve, at de teknikere, der er involveret i håndteringen af dyrene under giftekstraktionsproceduren, er strengt uddannet.
Grafikken illustrerer dataene i tabel 1, der viser, at der fra 2012 til 2022 var en lineær vækst i de præsenterede markører på grund af den stærke sammenhæng mellem året og den frysetørrede gift ekstraheret pr. dyr, henholdsvis frysetørret gift ekstraheret pr. måned og skorpioner ekstraheret pr. måned. Den frysetørrede gift udvundet pr. dyr viste en lille stigning gennem årene, men mængden af gift pr. måned og antallet af udvundne skorpioner steg markant fra 2016 og frem, hvilket afspejler de fysiske forbedringer i anlægget og udviklingen og anvendelsen af SOP'erne. Begge produktionsmarkører faldt i 2020 på grund af COVID-pandemien, men vendte tilbage til at stige i det følgende år.
Et andet væsentligt mål, der blev opnået med anvendelsen af den beskrevne metode, var dyrevelfærd. Protokollerne blev udviklet under hensyntagen til T. serrulatus biologi, artens fornødenheder under fangenskabsforhold og i en giftproduktionsrutine, der adskiller sig fra dens behov ved fritlevende 5,12. De positive resultater af metoden, ud over succesen med at opretholde en standardiseret måde for et stort antal dyr, samtidig med at skorpionernes velfærd respekteres og imødekommer efterspørgslen efter giftproduktion, vises i dyrenes lange levetid, hvoraf mange gennemgår mere end fem giftekstraktionsprocedurer i løbet af deres produktive liv under de beskrevne fangenskabsforhold.
Uanset hvilke protokoller der skal anvendes, er den løbende uddannelse af de teknikere, der er involveret i skorpionens opdræt eller giftekstraktion, ekstremt vigtig for at reducere den stress, der forårsages af dyrene på grund af fangenskabsrutinen og følgelig forbedre produktionsparametrene. Konstant træning er også afgørende for at reducere den potentielle risiko for ulykker, der involverer personalet under manipulation af skorpionerne.
De her beskrevne husdyrbrugsprotokoller blev udviklet i overensstemmelse med nødvendigheden af at holde et stort antal T. serrulatus-individer i et begrænset rum, og derfor var artens biologi og fysiologi af stor betydning. Ud over specificiteten af de arter, der holdes, kan de samme protokoller replikeres for flere andre skorpionslægter og arter med mindre justeringer. De anvendte materialer er let tilgængelige og billige, hvilket gør vedligeholdelsen levedygtig i tilfælde af storskala husdyrhold som præsenteret. Med hensyn til giftekstraktionsprotokollerne blev den anvendte elektrostimulator specielt designet og kan replikeres af andre antivenomfremstillingslaboratorier.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingen interessekonflikter at oplyse.
Acknowledgments
Ingen
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Carboard sheet | NA | NA | |
| Egg tray | NA | NA | cardboard 36 places egg trays |
| Electro stimulator device | Instituto Butantan | ART-FV-01 | Internally designed for the venom extraction |
| Kraft paper | NA | NA | regular kraft paper |
| Making tape | NA | NA | White masking tape (24 mm x 50 m) |
| Polyproplene container | NA | NA | 70 L Polypropylene box (H – 35 cm, W – 35.5 cm, L - 72 cm) |
| Polyproplene tray | NA | NA | Polypropylene tray (H – 3.0 cm, W – 18.5 cm, L - 30 cm) |
| Self-adhesive plastic | NA | NA |
References
- Polis, G. A. The biology of scorpions. , Stanford University Press. (1990).
- Lacerda, A. B., et al. Scorpion envenomation in the state of São Paulo, Brazil: Spatiotemporal analysis of a growing public health concern. PLoS One. 17 (4), 0266138 (2022).
- Reckziegel, G. C., Pinto, V. L. Scorpionism in Brazil in the years 2000 to 2012. Journal of Venomous Animals and Toxins Including Tropical Diseases. 20, 46 (2014).
- Guerra-Duarte, C., et al. Scorpion envenomation in Brazil: Current scenario and perspectives for containing an increasing health problem. PLoS Neglected Tropical Diseases. 17 (2), 0011069 (2023).
- Pimenta, R. J. G., et al. Selected to survive and kill: Tityus serrulatus, the Brazilian yellow scorpion. PLoS One. 14 (4), e0214075 (2019).
- Lacerda, A. B., et al. Detection of areas vulnerable to scorpionism and its association with environmental factors in São Paulo, Brazil. Acta Tropica. 230, 106390 (2022).
- Torrez, P. P. Q., Dourado, F. S., Bertani, R., Cupo, P., França, F. O. deS. Scorpionism in Brazil: exponential growth of accidents and deaths from scorpion stings. Journal of the Brazilian Society of Tropical Medicine. 52, 20180350 (2019).
- Amado, T. F., et al. Vulnerable areas to accidents with scorpions in Brazil. Tropical Medicine & International Health. 26 (5), 13561 (2021).
- Brasil, Ministérioda da Saúde, Fundação Nacional de Saúde. Manual de diagnóstico e tratamento de acidentes por animais peçonhentos. , Ministérioda da Saúde, Fundação Nacional de Saúde. Brasília. (2001).
- Candido, D. M., Lucas, S. Maintenance of scorpions of the genus Tityus Koch (Scorpiones, Buthidae) for venom obtention at Instituto Butantan, São Paulo, Brazil. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases. 10 (1), 000100007 (2004).
- Lucas, S. O. Laboratório de Artrópodes do Instituto Butantan e os aracnídeos peçonhentos. História Ciências Saúde Manguinhos. 10 (3), 000300011 (2003).
- Braga-Pereira, G. F., Santos, A. J. Asexual reproduction in a sexual population of the Brazilian yellow scorpion (Tityus serrulatus, Buthidae) as evidence of facultative parthenogenesis. The Journal of Arachnology. 49 (2), (2021).
