छिड़काव decellularization पूरे जिगर scaffolds है कि अंग बाह्य मैट्रिक्स संरचना और microarchitecture बरकरार रखती का उत्पादन करने के लिए एक उपन्यास तकनीक है. इस के साथ साथ, पूरे अंग hepatocytes के साथ छिड़काव decellularization और बाद repopulation का उपयोग scaffolds तैयार करने की विधि वर्णित है. कार्यात्मक और transplantable जिगर grafts इस तकनीक का उपयोग करके उत्पन्न किया जा सकता है.
Abstract
जिगर एक जटिल अंग है जो पोषक तत्वों और ऑक्सीजन और अपशिष्ट को हटाने के के प्रसव के लिए लगातार छिड़काव की आवश्यकता है क्रम में एक जीवित रहने के है . विश्राम या ऊतक इंजीनियरिंग और तकनीक microfabrication का उपयोग दृष्टिकोण के आधार के साथ जिगर microstructure नकल के प्रयास अभी तक सफल नहीं किया गया है इस डिजाइन की चुनौती वजह से. इसके अलावा, सिंथेटिक जिगर ऊतक इंजीनियरिंग अनुप्रयोगों के लिए scaffolds बनाने के लिए इस्तेमाल किया biomaterials विशेष सेल बाध्यकारी रूपांकनों है कि उचित सेल 2 कार्यों को प्रेरित होगा की कमी के कारण ऊतकों और बड़े हिस्से में उत्थान मरम्मत उत्प्रेरण में सीमित किया गया है. Decellularized देशी ऊतकों जैसे रक्त दूसरे हाथ पर 3 और 4 त्वचा जहाजों ऊतक इंजीनियरिंग में कई आवेदन मिल गया है, और चुनौतियों में से कुछ के लिए एक व्यावहारिक समाधान प्रदान की. decellularized देशी मैट्रिक्स के लाभ यह है कि यह एक हद तक, मूल संरचना, और microstructure बरकरार रखती है, इसलिए सेल लगाव और 5 पुनर्गठन बढ़ाने.
इस काम में हम तरीकों जिगर के छिड़काव decellularization, ऐसी है कि एक अक्षुण्ण जिगर bioscaffold कि प्रमुख रक्त वाहिकाओं की संरचना को बरकरार रखे हुए प्राप्त की है प्रदर्शन करने के लिए का वर्णन. इसके अलावा, हम वयस्क प्राथमिक hepatocytes साथ इन bioscaffolds recellularize, एक जिगर भ्रष्टाचार है कि इन विट्रो में कार्यात्मक है बनाने के तरीकों का वर्णन है, और पोत का उपयोग vivo में प्रत्यारोपण के लिए आवश्यक है.
Protocol
1. लिवर Decellularization पोर्टल शिरा का उपयोग cannulation और 18 गेज कैथेटर के साथ एक चूहा जिगर हार्वेस्ट. अवर और बेहतर रग Cava खुला छोड़ दें. फॉस्फेट में अंग हाइड्रेटेड रखें खारा (पीबीएस) के एक 10 सेमी पेट्री डिश में buffered. ए?…
Discussion
छिड़काव decellularization यहाँ वर्णित विधि पूरे जिगर पाड़ है कि वही सकल संरचना और देशी जिगर के संवहनी microarchitecture है पैदा करता है. पाड़ एक बाह्य मैट्रिक्स देशी जिगर के लिए इसी तरह की संरचना है. recellularization विधि के साथ इन व?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
लेखकों के डिजाइन के लिए इन विट्रो छिड़काव कक्ष में जैक Milwid शुक्रिया अदा करना होगा . यह काम अमेरिकी एनआईएच, R01DK59766 और R01DK084053 से R00DK080942 मेरे, अनुदान कू, अमेरिकी NSF कू और BEU के लिए बच्चे के लिए श्राइनर्स हॉस्पिटल CBET – 0,853,569 (अनुदान नहीं 8503.) द्वारा समर्थित किया गया. हम भी बच्चों के लिए समर्थन और श्राइनर्स हॉस्पिटल स्वीकार करते हैं.
Uygun, B. E., Price, G., Saeidi, N., Izamis, M., Berendsen, T., Yarmush, M., Uygun, K. Decellularization and Recellularization of Whole Livers. J. Vis. Exp. (48), e2394, doi:10.3791/2394 (2011).