Summary
Protocol
- पूंछ टुकड़े (3mm) और निशान कान कट.
- 720 मीटर एल Ste और 30 मीटर एल proteinase कश्मीर (10 शेयर मिलीग्राम / एमएल) जोड़ें.
- 55 में सेते ° सी हीटिंग ब्लॉक और 10 सेकंड के लिए शीर्ष गति पर 3 घंटे के लिए हर घंटे भंवर पर .
- 70 डिग्री सेल्सियस 5 मिनट के लिए proteinase कश्मीर निष्क्रिय.
- 5 मिनट के लिए बर्फ पर बुझाने.
- पूरी गति से 10 मिनट के लिए पूंछ डीएनए अपकेंद्रित्र.
- 720 मीटर एल Isopropanol युक्त नया ट्यूब में छानना.
- Inverting ट्यूब या vortexing द्वारा वेग डीएनए.
- पूरी रफ्तार से 5 मिनट के लिए नीचे स्पिन डीएनए. सतह पर तैरनेवाला निकालें.
- 70% इथेनॉल के साथ गोली धो लें.
- पूरी रफ्तार से नीचे जीनोमिक डीएनए 5 मिनट स्पिन. सतह पर तैरनेवाला निकालें.
- डीएनए 1-2 मिनट के लिए शुष्क करने की अनुमति दें.
- 100-200 मीटर एल में Resuspend डीएनए गोली के आकार पर निर्भर करता है.
- प्लेस ट्यूब पर 55 डिग्री सेल्सियस 1 घंटे के लिए डीएनए के विघटन की सुविधा के लिए.
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Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| STE | Buffer | 100 mm Tris; pH 8.5 /5 mM EDTA /0.2% SDS /200 mM NaCl / in H2O | ||
| TE | Buffer | 100 mM Tris; pH 5.0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl |
