Summary
Protocol
- Couper des morceaux de la queue (3mm) et les oreilles marque.
- Ajouter 720 m l STE et 30 m de l protéinase K (10 mg / ml de stock).
- Incuber à 55 ° C sur le bloc de chauffage et de vortex toutes les heures pendant 3 heures à la vitesse supérieure pendant 10 secondes.
- Inactiver la protéinase K à 70 ° C pendant 5 minutes.
- Quench sur la glace pendant 5 minutes.
- Centrifugeuse ADN de queue pendant 10 minutes à pleine vitesse.
- Décanter dans un nouveau tube contenant 720 m l Isopropanol.
- Précipiter l'ADN en inversant le tube ou vortex.
- Isoler l'ADN pendant 5 minutes à pleine vitesse. Retirer le surnageant.
- Laver le culot à l'éthanol 70%.
- Isoler l'ADN génomique 5 minutes à pleine vitesse. Retirer le surnageant.
- Laisser sécher l'ADN pendant 1-2 minutes.
- Remettre en suspension dans l'ADN 100-200 L m selon la taille des granulés.
- Placer le tube à 55 ° C pendant 1 heure pour faciliter la dissolution de l'ADN.
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Materials
Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
STE | Buffer | 100 mm Tris; pH 8.5 /5 mM EDTA /0.2% SDS /200 mM NaCl / in H2O | ||
TE | Buffer | 100 mM Tris; pH 5.0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl |