Isolering av genomisk DNA från mus Tails

Summary

Protocol

1. Klipp svansen bitar (3 mm) och öron märke.
2. Lägg till 720 M L STE och 30 m l proteinas K (10 mg / ml lager).
3. Inkubera vid 55 ° C på värmeblock och vortexa varje timme i 3 timmar i full fart i 10 sekunder.
4. Inaktivera proteinas K vid 70 ° C i 5 minuter.
5. Släcka på is i 5 minuter.
6. Centrifugera svans DNA i 10 minuter vid full hastighet.
7. Häll i nya rör som innehåller 720 m l isopropanol.  
8. Fällning DNA genom att vända röret eller vortexa.
9. Spinn ner DNA i 5 minuter vid full hastighet. Avlägsna supernatanten.
10. Tvätta pellets med 70% etanol.
11. Spinn ner genomisk DNA 5 minuter vid full hastighet. Avlägsna supernatanten.
12. Låt DNA torka i 1-2 minuter.
13. Resuspendera DNA i 100-200 m l beroende på storlek på pellets.
14. Placera röret vid 55 ° C i 1 timme för att underlätta upplösningen av DNA.  

Materials

Name	Type	Company	Catalog Number	Comments
STE	Buffer			100 mm Tris; pH 8.5 /5 mM EDTA /0.2% SDS /200 mM NaCl / in H2O
TE	Buffer			100 mM Tris; pH 5.0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl