इस संचार सटीकता और BioSpec नैनो dsDNA और प्रोटीन quantitation के लिए यूवी तुलना स्पेक्ट्रोफोटोमीटर के reproducibility पर डेटा प्रस्तुत करता है. यहां तक कि अति लघु संस्करणों के साथ (1 से 2 एल), reproducibility उत्कृष्ट है, जबकि स्वचालित पोंछते समारोह throughput और अधिक सटीक परिणाम के लिए कम से कम carryover में परिणाम में सुधार.
न्यूक्लिक एसिड quantitation प्रक्रियाओं पिछले तीन दशकों में काफी उन्नत है. अधिक से अधिक, आणविक जीव उनके प्रयोगों के लिए न्यूक्लिक एसिड के नमूने विश्लेषण के अनुरूप छोटे मात्रा की आवश्यकता होती है. BioSpec नैनो गलत, गैर प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणाम, विशेष प्रकाशिकी और एक संवेदनशील पीडीए डिटेक्टर के माध्यम से वर्तमान डीएनए quantitation तरीकों में निहित है, की समस्याओं के लिए एक संभावित समाधान प्रदान करता है. BioSpec नैनो भी स्वचालित कार्यक्षमता ऐसी है कि बढ़ते हैं, माप, और सफाई के साधन के द्वारा किया जाता है, जिससे फाइबर ऑप्टिक तत्व और मैनुअल सफाई के थकाऊ, दोहराव, और असंगत स्थान को नष्ट करने.
इस अध्ययन में, डेटा डीएनए और प्रोटीन है, माप reproducibility और सटीकता पर के रूप में के रूप में अच्छी तरह से की मात्रा का ठहराव पर प्रस्तुत किया है. स्वचालित नमूना संपर्क करें और तेजी से स्कैनिंग तीन सेकंड में माप की अनुमति देता है, उत्कृष्ट throughput में जिसके परिणामस्वरूप. डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर के अंतर्निहित सुविधाओं का उपयोग किया जाता है. डीएनए एकाग्रता की गणना के लिए इस्तेमाल किया फार्मूला है:
नमूना एकाग्रता = लोमो · (OD260 – OD320) · NACF (1)
= नमूना कमजोर पड़ने कारक और NACF = न्यूक्लिक एसिड एकाग्रता कारक कहाँ लोमो.
न्यूक्लिक एसिड एकाग्रता कारक 1 चयनित analyte के अनुसार सेट कर दिया जाता है.
प्रोटीन एकाग्रता परिणामों μg / एमएल के रूप में या moles e280 और आणविक भार मान क्रमशः दर्ज करके / एल के रूप में व्यक्त किया जा सकता है. जब Tyr, टीआरपी और Cysteine (एसएस बंधन) के लिए मूल्यों अवशेषों e280Calc टैब में प्रवेश कर रहे हैं, विलुप्त होने के गुणांक मूल्यों e280 के रूप में की गणना कर रहे हैं = x 5500 (टीआरपी अवशेषों) + x 1490 (Tyr अवशेषों) + x 125 (सिस्टीन एसएस बंधन) . e280 मूल्य एकाग्रता की गणना के लिए सॉफ्टवेयर के द्वारा प्रयोग किया जाता है.
Nucleic एसिड और प्रोटीन की एकाग्रता दृढ़ संकल्प के अलावा, BioSpec नैनो कई अन्य analytes के लिए एक अति सूक्ष्म मात्रा स्पेक्ट्रोफोटोमीटर के रूप में या एक मानक 5 मिमी pathlength कोशिकाओं का उपयोग स्पेक्ट्रोफोटोमीटर के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है.
BioSpec नैनो के लिए वर्तमान डीएनए quantitation तरीकों में निहित असंगत परिणाम और थकाऊ शारीरिक श्रम जैसे मुद्दों को हल किया गया इंजीनियर है. प्रत्येक माप सिर्फ 3 सेकंड लेता है, एक अनुभवी आण्विक जीवविज्ञानी एक मिनट में 3-6 के बारे में कई नमूने का विश्लेषण करने के लिए अनुमति देता है. अद्वितीय वाइपर सुविधा न केवल माप के throughput में सुधार, यह भी pedestals के मैनुअल सफाई के लिए जरूरत eliminates, माप के बीच नगण्य carryover में जिसके परिणामस्वरूप. इसके अलावा, 1000 एनजी / μL युक्त डीएनए नमूने के लिए सिर्फ 2 पोंछे का उपयोग कर परीक्षण carryover संकेत कम से कम 2 एनजी / μL.
5 मिमी pathlength सेल की उपलब्धता पतला nucleic एसिड और प्रोटीन के नमूने का विश्लेषण करने के लिए एक विकल्प प्रदान करता है और अन्य अनुप्रयोगों के लिए इस उपकरण का उपयोग फैली.
The authors have nothing to disclose.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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BioSpec-nano | Shimadzu | |||
Calf Thymus DNA | Sigma Aldrich | |||
Bovine Serum Albumin | Sigma Aldrich |