Мы опишем метод измерения энергии связи, представить в виде ткани поверхностное натяжение, между клетками тканей в 3D-подобных агрегатов. Различия в ткани поверхностного натяжения, как было продемонстрировано коррелируют с инвазивности легких, мышц и опухолей головного мозга, и являются основными детерминантами установления пространственных отношений между различными типами клеток.
Строгие измерения межклеточных энергии могут быть сделаны только с использованием методов основан на термодинамических принципах системы в равновесии. Мы разработали поверхности ткани tensiometry (TST), специально для измерения поверхностной свободной энергии взаимодействия между клетками. Биофизической концепции, лежащие TST были ранее подробно описаны 1,2. Метод основан на наблюдении, что взаимно сплоченной клетки, если поддерживается в встряхивания культуры, будет спонтанно собираться в кластеры. С течением времени эти кластеры будут округлить до форме сферы. Это округление поведение имитирует поведение, характерных для жидких систем. Межклеточные энергия измеряется путем сжатия сферических агрегатов между параллельными пластинами в специально разработанных тензиометра поверхности ткани. Те же математические уравнения, используемые для измерения поверхностного натяжения капли жидкости используется для измерения поверхностного натяжения тканей 3D-подобные сферические агрегаты. Сотовые эквивалент жидкого поверхностного натяжения является межклеточное энергии, да и вообще, ткани cohesivity. Предыдущие исследования, проведенные в нашей лаборатории показали, что поверхностное натяжение ткани (1) предсказывает, как две группы эмбриональных клеток будут взаимодействовать друг с другом, 1-5, (2) может сильно повлиять на способность тканей взаимодействуют с биоматериалов 6, (3) можно быть изменен не только путем прямого манипулирования кадгерина основе межклеточных сплоченности 7, но и манипуляции ключевых молекул, таких как ЕСМ FN 8-11 и 4) коррелирует с инвазивный потенциал рака легких 12, фибросаркома 13, опухоли мозга 14 и опухоли простаты Клеточные линии 15. В этой статье мы опишем аппарат, подробно шаги, необходимые для получения сфероидов, для загрузки сфероидов в тензиометра камеру, чтобы начать совокупности сжатия, и для анализа и проверки ткани поверхностного натяжения измерений генерируется.
Измерение совокупной сплоченность путем TST относительно проста. Есть, однако, основные шаги, которые должны быть освоены в целях получения полезной данных TST: 1) агрегаты должны быть "здоровым". Это можно контролировать путем обеспечения образования агрегатов начинается с клетки, к…
The authors have nothing to disclose.