Ограничивающим фактором в использовании взрослых<em> Drosophila</em> Глаза на исследование нейродегенерации и клеточной биологии трудно визуализации внутриклеточных процессов. Мы описываем вскрытия одного омматидии генерировать добросовестных первичной культуры клеток нейронов, которые могут быть предметом лечения наркозависимости и Advanced Imaging.
Плодовой мушки дрозофилы сделал неоценимый вклад в неврологии исследования и широко используется в качестве образца для нейродегенеративных заболеваний из-за своей мощной генетике 1. Летать глаз, в частности, была органом выбор для нейродегенерации исследования, являясь самым доступным и жизни необязательной частью дрозофилы нервной системы. Однако основные предостережение интактных глаз трудности, из-за интенсивной флуоресценции от пигмента, в визуализации внутриклеточных событий, таких как аутофагии динамики 2, которые имеют огромное значение для понимания нейродегенерации.
Недавно мы использовали вскрытие и культура одного омматидии 3, что имеет огромное значение для нашего понимания autophagic нарушений в летают модель Dentatorubro-Pallidoluysian Атрофия (DRPLA) 3, 4.
Теперь отчет с подробным описанием этого метода (рис. 1), адаптированных с электрофизиологических исследований 5, который, скорее всего, значительного расширения возможности летать модели нейродегенерации. Этот метод может быть адаптирован к изображению живой субклеточных событий и следить за эффективным приемом препаратов на клетки фоторецепторов (рис. 2). При использовании в сочетании с мозаикой методов 6-8, ответы генетически различных клеток может быть проанализированы параллельно (рис. 2).
Одно рассечение омматидия представленные здесь коллекции позволяет более глубокой биологической ячейки информацию о процессах, как нейродегенеративные, когда моделируется в глазу дрозофилы. Фоторецепторных нейронов более доступной, чем в других нейронов и их цитоплазме особен…
The authors have nothing to disclose.
Мы благодарим Бернар Charroux для дискуссий. Эта работа финансировалась KCL биомедицинских школы.
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
---|---|---|---|
Portable CO2 Dispenser | Flystuff | 59-150 | Refills also available |
DUMONT Tweezer No 5 | AGAR Scientific | T5034 | |
3-Well Glass Slide | EMS | 71561-01 | |
Micro scissors | VWR | HAMMHSB516-09 | |
Schneider’s Medium | VWR | 733-1663 | |
LysoTracker Red DND-99 | Invitrogen | L7528 | |
Superfrost Slides | VWR | 631-0108 | |
Vectashield with Dapi | Vector Labs | H-1200 | |
Coverslips | VWR | 631-1336 |