Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Моделирование колит, связанного с раком Azoxymethane (ОСО) и декстран сульфат натрия (DSS)

doi: 10.3791/4100 Published: September 11, 2012

Summary

Мы демонстрируем протокол, в котором администрация генотоксического azoxymethane агента (ОСО), а затем трех циклов провоспалительных агентов декстран сульфат натрия (DSS) быстро и последовательно создает опухолей толстой кишки у мышей с морфологической и молекулярно сходство тем, которые наблюдаются в человеческом колит -связанных рака.

Abstract

Лица с воспалительными заболеваниями кишечника (IBD), такие как болезнь Крона (БК) или неспецифический язвенный колит (UC), подвергаются повышенному риску развития колоректального рака (КРР) над здоровых людей. Этот риск пропорционально длительности и степени заболевания, с кумулятивная частота достигает 30% у лиц с давних UC с широко распространенным толстой участие 1. Кишечное дисплазии в IBD и колит, связанный рака (CAC), как полагают, развиваются в результате повторяющихся циклов повреждения эпителия и восстановление клеток в то время как эти клетки купались в хронический воспалительный цитокин среды. 2 Во время спонтанной и колит связанных рака поделиться качество бытия аденокарциномы, последовательности, лежащие в основе молекулярных событий, как полагают быть разными. 3 Это Различие утверждает, потребность в конкретных моделях животных CAC.

Несколько моделей мышей существуют в настоящее время для изучения CAC. Декстрансульфат Содимкм (DSS), агент с прямым токсическим действием на эпителий толстой, можно вводить в питьевой воде мышей в несколько циклов, чтобы создать хронические воспалительные состояния. При достаточной продолжительности, некоторые из этих мышей будет развиваться опухоль. 4 Опухоль развития поспешили в этой модели, если вводить в про-канцерогенные настройки. Они включают в себя мышей с генетическими мутациями в онкогенезе путей (APC, p53, Msh2), а также мышей, предварительно обработанных генотоксического агентов (azoxymethane [AOM], 1,2-диметилгидразин [DMH]) 5.

Сочетание DSS с острым средним отитом в качестве модели для рака колит, связанный завоевала популярность своей воспроизводимости, потенции, низкой ценой и простотой использования. Хотя они имеют общий механизм, ОСО было установлено, что более мощные и стабильные в растворе, чем DMH. В то время как развитие опухоли в других моделях обычно требуется несколько месяцев, мышей, которым вводили с острым средним отитом и затем обрабатывали DSS разработки адекватных опухолей6 сек всего 7-10 недель., 7 Наконец, ОСО и DSS могут быть введены мышам любого генетического фона (выбить, трансгенные и т.д.) без скрещивания на конкретный штамм онкогенного. Здесь мы покажем, протокол воспаление управляемых толстой опухолей у мышей с использованием одной инъекции острого среднего отита следуют три семидневного цикла DSS в течение 10 недель. Эта модель вызывает опухоли с гистологическим и молекулярные изменения, напоминающий те, которые происходят в человеческом CAC и обеспечивает очень ценной моделью для изучения онкогенеза и химиопрофилактики при этом заболевании 8.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

1. Колит, связанный индукции рака

  1. Отложите в сторону клетки от пола и возраста из 6-8 недельных мышах, которые будут использоваться для экспериментальной и контрольной групп. Мыши могут быть снабжены индивидуальными этикетками с маркировкой хвост или ухо клипов.
  2. В день 0, вес записи базовой и придать каждой мыши внутрибрюшинно (IP) с 10 мг / кг ОСО рабочего раствора (1 мг / мл в изотонический солевой раствор, разбавляют от 10 мг / мл маточного раствора в dH2O храниться при температуре -20 ° С) . Опираясь на опыт, эта доза может регулироваться в пределах 7-14 мг / кг и / или повторяющиеся в начале эксперимента.

Внимание: ОСО является летучим генотоксического агента и следует обращаться осторожно в соответствии с прилагаемой MSDS. Растворы должны быть подготовлены в химическом капот, поддерживается на льду, и отбрасываются после учреждения специальных протоколов.

  1. Сделайте 2,5% (2,5 г/100 мл) DSS раствор в дистиллированной воде и пропускают через 0,22 мкм F ацетата целлюлозыILTER вакуумом. Эта доза может регулироваться в пределах 1-3,5% в зависимости от штамма мыши и окружающей среды. После приготовления DSS решение может быть в холодильнике до 1 недели.
  2. На 7-й день, поставка DSS решение мышей в качестве питьевой воды. Около 250 мл / клетка будет необходимо каждый раз новые DSS обеспечивает не более 5 мышей / клетку, однако, это лишь оценки и будет варьироваться в зависимости от типа бутылки с водой используется в вашем животного центр.
  3. Для обеспечения непрерывной подачи DSS в течение семи дней, DSS решение должно быть заменено в чистой бутылки в три раза (каждые 2-3 дня) в течение этого периода. Некоторые исследователи измеряют количество потребляемого DSS перед заменой с новым решением в качестве меры воздействия.
  4. На 14 день, переключиться обратно в клетки стандарт качества питьевой воды в течение двух недель.
  5. Повторите шаги (1,4) - (1,6) в дни 28 и 49 для обеспечения второго и третьего цикла DSS. DSS "цикл" состоит из одной неделе DSS в питьевой воде, затем 2 недели регулярных (автоклавного) воды.

2. Клиническая оценка колит и опухолевой прогрессии

  1. Мыши должны быть взвешены / наблюдается 2-3 раза в неделю. Процент потери веса по сравнению с исходным используется в качестве косвенного показателя колита тяжести. Регулярная оценка кровотечения из прямой кишки, поносы, или пролапс может быть сделан в зависимости от экспериментальных целей и сообщил по различным системам скоринга. 9, 10
  2. Потеря веса до 10%, наряду с 2-3 дня понос и кровотечение из прямой кишки можно ожидать в течение недели после полного цикла DSS (ежедневное наблюдение может быть полезно при этом сразу после DSS период).

Вполне возможно, что некоторые мыши может восстановиться; мышей потери более чем на 20% своего веса имеют меньше шансов выжить, и может потребовать досрочного эвтаназии. Одна инъекция IP 0,5 - 1,0 мл физиологического раствора в таких мышей может быть полезно поддерживать меры к исправлению flui г объем потерянных в результате диареи.

3. Мышиные эндоскопии (необязательно)

  1. Эндоскопия после второго или третьего цикла DSS могут быть выполнены, чтобы подтвердить рост опухолей в естественных условиях до жертвовать. Как ОСО / DSS модель вполне надежны в производстве опухолей, этот шаг, как правило, не требуется. Лишь несколько мышей должна оцениваться с помощью этого метода, так как он имеет потенциал, чтобы нарушить мыши опухолей 11.
  2. Anesthetize мыши с ингаляционным или инъекционные седативный эффект.
  3. После мышь находится под наркозом, обеспечить мыши на плоской доске с лентой на хвосте и груди.
  4. Переход мышиный эндоскопа в мышь прямую кишку осторожно использованием физиологического раствора, чтобы раздуть и орошения для улучшения внутрипросветного просмотра и удаления фекальных содержание. (Заметим, что эндоскопия также может быть выполнена с использованием воздуха вдувания в качестве альтернативы солевой раствор и этот метод может предложить улучшенную визуализацию опухоли. 12)
е "> 4. Мыши жертвы и толстой кишки уборки

  1. В день 70, каждая ОСО / DSS рассматриваться мышь должна питать множественных опухолей толстой кишки и быть готовым к оценке. Эта дата может быть отложена недель до нескольких месяцев, если большие опухоли лучшего. (Следует отметить, что мышей с тяжелым ректальной выпадение возможно, должны быть подвергнуты эвтаназии рано, чтобы избежать чрезмерных неудобств для животных в соответствии с институциональными комитетов ухода за животными).
  2. До вскрытия, индивидуально усыпить мышей с изофлурана и смещения шейных позвонков (или другие институционально одобренных метода). Окончательный вес и другие измерения могут быть сделаны в это время.
  3. Положите мышь с брюшной стороны выставлен на разделочной доске. Накройте живота с 70% этанола, чтобы предотвратить волосы от загрязнения содержимого брюшной полости при добыче толстой кишки.
  4. Используйте пинцет, чтобы понять средней линии живота и сделать небольшой надрез, чтобы разоблачить брюшины.
  5. Расширение этот разрез на каждой стороне живота вдоль реберного Margiн.
  6. Используйте ножницы, чтобы вырезать через таз так, чтобы толстая кишка может быть собрано до аноректальной перехода. Это важно, потому DSS колит травмы наибольший в дистальной кишки и, соответственно, это является областью наибольшего развития опухоли.
  7. Дополнительная тканей, таких как мезентериальных лимфатических узлов также может быть собран в это время.

5. Подготовка толстой кишки для макроскопического анализа

  1. Использование 18G иглу через желудочный зонд присоединен к 5 мл шприц, промойте толстой ледяной фосфатный солевой буфер (PBS), что жидкость выходит в физиологическую сторону. Если толстой ткани будет использоваться для РНК или белка на основе анализа, он может быть холодным, используя предварительно охлажденные лотки работы.
  2. Откройте раскрасневшееся толстой кишки в продольном направлении вдоль ее брыжейки и краски на холодном лоток. Опухоли более легко визуализировать, когда толстая кишка находится на темной поверхности. Кроме того, 1% Alcian синего красителя может быть применен для выделения тumors. Оценка опухоли количество и размер с помощью линейки или цифровой суппорта.
  3. Малые участки опухоли и прилегающих нормальных тканей может быть вырезана на данный момент для будущего анализа РНК, белков, или иммуногистохимического (IHC) методы, оставляя некоторую часть оставшейся толстой кишки для гистологического оценки.

Цифровая фотография валового образцов толстой кишки сразу же после шага 5.2 может быть полезным для точного анализа опухоли, особенно если значительная часть двоеточия вырезали для других форм анализа, как описано выше. Опухоли (%) может быть рассчитана как опухолевые площадь / общая площадь толстой кишки с помощью бесплатного программного обеспечения, таких как ImageJ.

6. Подготовка толстой кишки для гистологического оценки

  1. Применяют 10% формалина на оставшиеся толстой кишки на холодную лоток с помощью шприца или пальцем. Разрешение ткани, чтобы исправить по крайней мере, 30 секунд таким образом облегчает передачу фиксации бассейна. Убедитесь, остаточная формалина WIPред с перед покраской новых открыт толстой кишки на том же лотке.
  2. Передача двоеточия в бассейне, заполненной 10% формалина и придавить по краям.
  3. Через 3 часа фиксации, передачи двоеточия до 70% этанола. Колоны могут быть сохранены в 70% этанола на неопределенный срок.
  4. Три продольные срезы толстой кишки (проксимальная, средняя, ​​дистальная / прямой кишки) может быть стабилизировано в 2% агара и представлен на парафин вложения. Убедитесь, что проксимальных толстой кишки и дистального отдела толстой кишки / прямой кишки ориентированы единым образом для каждой мыши.
  5. Дисплазия, склеп повреждения и воспаления могут быть описаны и оценены опытными отдельных согласно ранее опубликованным протоколам. 10, 13-15 Мыши могут быть принесены в жертву до дня 70, если экспериментатор заинтересован в выявлении ранних диспластических событий.

7. Представитель Результаты

ОСО / DSS модели, описанные здесь позволяет исследователю надежно генерировать опухолей толстой кишки у мышей.Рост опухоли в этой модели напрямую зависит от соответствующей воспалительного процесса. Колит тяжести должны быть проверены клинически после потери веса и диареи наличии / кровянистый стул (рис. 2). Эти признаки активности болезни, как правило, начинается на 5-й день цикла DSS и в течение четырех или более дней после DSS удаляется. Редко, мышей со значительным бременем ректальные опухоли могут развиваться выпадения прямой кишки. После второго или третьего поноса DSS цикла могут стать постоянными. Обычно опухоли присутствуют и идентифицированы мышиный колоноскопии до третьего цикла DSS (рис. 3). Дополнительное время и третьего курса DSS результаты в больших опухолях в момент сбора урожая (рис. 4). Использование местного применения Alcian синевы может быть использован для выделения опухоли (рис. 5). Фотографии опухолей толстой окажет содействие в создании опухоли измерений, которые могут быть использованы для количественного сравнения опухоли производства и размерамежду экспериментальными группами (рис. 6). Фиксированные и парафином образцов толстой кишки может быть оценена для гистологии или с использованием иммуногистохимического окрашивания (рис. 7 и 8).

Рисунок 1
Рисунок 1. Схематическое ОСО и DSS администрации. ОСО (10 мг / кг) вводят в день 0. В начале второй недели (день 7), 2,5% DSS раствор вводят мышам в их питьевой водой. Семь дней DSS следуют две недели из автоклавного воды. Дополнительных двух циклов DSS вводят до жертвовать.

Рисунок 2
Рисунок 2. Вес мыши относительно исходных условий в течение острого среднего отита и DSS администрации. Обратите внимание, что в течение недели после каждого цикла DSS, мышей-лос- электронной 5-10% от их веса тела. Потеря веса в этом эксперименте является суррогатным маркером тяжести колита.

Рисунок 3
Рисунок 3. Вид опухоли в дистальной толстой кишки с помощью эндоскопии мышиной в день 50 ОСО / DSS лечения. Обратите внимание на несколько полиповидными препятствует просвета дистального отдела толстой кишки (B, C) по сравнению с нормальным толстой кишки (а).

Рисунок 4
Рисунок 4. Продольно открыл мыши толстой кишки иллюстрирующие валового появление опухолей. Обратите внимание, что выше опухоли в дистальной толстой кишке / прямой кишки (левый верхний рисунок), а характерные rugated текстуры проксимальной толстой кишки (правый верхний рисунок) с небольшой рост опухоли. Закрыть вверх вид дистального отдела толстой кишки показывает многочисленные опухоли различных размеров (см. ниже).

ove_content "FO: Keep-together.within-страница =" Всегда "> Рисунок 5
Рисунок 5. Опухоли подчеркивается применение Alcian синие пятна. Обратите внимание, как краситель подчеркивает текстуру нормального толстой кишки, а также границах каждой отдельной опухоли. Такое окрашивание может быть полезным в точных измерений опухоли районах правителя или цифровых измерений.

Рисунок 6
Рисунок 6. Представитель распределения среднее число опухолей на мышь обрабатывают ОСО / DSS. Обратите внимание, что большинство опухолей, расположенных в дистальной толстой кишке и <2 мм.

Рисунок 8
Рисунок 7. Парафиновые продольных срезах толстой кишки в кассете (см. выше)D на слайде после H & E пятно (см. ниже). Обратите внимание, что остаточная Alcian синевы не мешает H & E окрашивание. Большая опухоль, кружили на слайде изображения (в кружке). Обозначения "дистальный", "средний" и "проксимальный" в результате секционирования всей толстой кишки в третей между слепой кишки и ануса.

Рисунок 8
Рисунок 8. Представитель гистологии опухоли в результате ОСО / DSS администрации в дистальных отделах толстой кишки. H & E, BrdU, и β-катенина окрашенные слайды на 50X (верхняя панель) и 400X (нижняя панель), соответственно, демонстрируют диспластических изменений похожи на человеческие аденокарциномы толстой кишки.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Лечение мышей с острым средним отитом и DSS быстро и эффективно моделей человеческого колит связанных рака. Гипотезы о наследственных факторов, способствующих колит связанных рака может быть легко изучена с генетически модифицированным мышам. 13, 16 Кроме того, влияние фармакологических целей в колиты связанных рака можно изучать, используя мышей дикого типа.

Хотя эта модель высоко ценится, кто заинтересован в изучении развития опухоли толстой кишки в условиях воспаления, ограничений не существует. Степени заболевания наблюдается у мышей в этой модели может значительно меняться в зависимости от штамма мыши и жилищных условий (останов, кормления, микрофлоры и т.д.). Suzuki и др.. Сообщается, что аль BALB / C мышей были наиболее чувствительны к ОСО / DSS, а затем (в порядке убывания частоты опухолевых заболеваний и кратность) C57BL/6N, C3H/HeN, и DBA/2N мышей 17. Опыты с DSS и ОСО в одиночестве 129 / Sv мышах было бы предсказать режимеСкорость ответа на комбинированное лечение, похожие на мышей C57/BL6J 18, 19. Таким образом, пилотные эксперименты могут быть необходимы, чтобы определить наиболее эффективные протоколы дозирования в зависимости от имеющихся средств и ресурсов. В то время как ОСО / DSS опухолей в толстой кишке напоминают человеческие колоректального рака гистологически, они редко имеют метастазы. На молекулярном уровне, изменения в β-катенина, COX-2, и Inos, но не p53 было зарегистрировано 20. Kanneganti и др.. ал. предоставляет подробный обзор альтернативных моделей для индукции CAC для тех, кто заинтересован 5.

Для повышения воспроизводимости результатов, мы рекомендуем мышей разных генетических фонов (например, WT и ген конкретных выбить мышей) будут совместно в клетке специфических патогенов (SPF) объекта за 3-4 недели до начала эксперимента, это особенно важно, если мышей вновь выступил с коммерческим объектом разведения. Хотя любого пола и возраста из мышей могут быть использованы, шэлектронной наблюдали наиболее последовательные результаты со всеми самок мышей. AOM растворы не должны использоваться, если прошло более одного года, и очень важно, чтобы избежать нескольких циклов замораживания-оттаивания этих решений. Колит тяжести может зависеть от типа корма для мыши, а также DSS источника, эти факторы должны быть согласованы между экспериментами. Мы наблюдали помутнение DSS бутылки оставили в клетках мышей в течение длительного времени (> 4 дня) указывают на загрязнение и, следовательно, холодильное и подготовка свежих DSS в начале каждой администрации позволит избежать этого осложнения. Если несколько опухоли развиваются или мышей умирают преждевременно, Neufert и др.. ал. в ОСО / DSS протокол резюме предоставит прекрасную таблицу рекомендации по устранению неполадок 6.

После ОСО / DSS техники для развития колита, связанного рака освоен, различные дополнительные исследования этих мышей могут быть выполнены 21. Выражение кандидатаГены могут быть изучены в опухоли по сравнению с опухолью без участках толстой кишки с помощью количественного ПЦР-амплификации добываемой РНК. Потому что DSS само по себе может вмешиваться в этот процесс, мы рекомендуем поли-очистка до усиления 22. Части толстой кишки может быть флэш заморожены должны быть изучены для экспрессии белка по вестерн-блот. Следователи колита связанных рака могут быть заинтересованы в визуальные маркеры клеточной пролиферации. Для этого ОСО / DSS мышей может быть введен с бромдезоксиуридин (BrdU) 90 мин до жертвы, иммуногистохимии для этих меченых ядер документы и областей, в толстой кишке с наибольшей пролиферации эпителия, как в опухоли и без разделов. 23

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Нет конфликта интересов объявлены.

Acknowledgments

Эта работа была частично финансируется за счет DK089016 и L30 RR030244 (MAC), CA153036 (AS) и P30-DK52574 (в пищеварительной Вашингтонского университета Основные исследования болезней). AIT был Медицинского института Говарда Хьюза медицинской подготовки научных кадров Fellow.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
C57BL/6J Mice Jackson Laboratory 000664
Azoxymethane (AOM) Sigma Aldrich A5486-100MG Stock solution: dilute to 10 mg/ml in distilled water to be kept at -20 °C as 0.5 - 1 ml aliquots.
Working solution: dilute stock to 1 mg/ml in isotonic (0.9%) saline
Dextran Sulfate Sodium (DSS) TdB Consultancy DB001 MW 40 kDa (36-50 kDa preparations from other sources are acceptable; The same lot should be used for a single experiment)6
Coloview miniendoscopic system Karl Storz Multiple See Becker et al. for detailed explanation of equipment and setup.11
TPP Rapid FILTERMAX 500 ml Bottle-Filter, 0.22 μm PES Midwest Scientific TP99500 Any standard tissue culture filter is acceptable
Ethyl Alcohol 200 Proof ASC/USP Pharmaco-AAPER (or other) 11ACS200 Dilute to 70% in distilled water
Isoflurane, USP Butler Animal Health Supply 4029405 Place mouse in glass jar with gauze or a small cloth soaked in anesthetic
18G Straight Gavage Needle Braintree Scientific N-008
Phosphate Buffered Saline (PBS) Sigma Aldrich P5493 Dilute to 1X (0.01 M) in distilled water
Cold Tray (Tissue Tek II Cold Plate) Fisher Scientific NC9491941 Store at -20 °C
ImageJ Software NIH (free download) http://rsbweb.nih.gov/ij/
Formaldehyde (37%) Fisher Scientific F79-500 Dilute to 10% in PBS
BD Bacto Agar Fisher Scientific DF0140-01-0 Use hotplate to create 2% solution in distilled water
Miltex Eye Dressing Forceps MedPlus Inc. 18-780
Miltex Eye Scissors MedPlus Inc. 18-1430 Curved points prevent damage to colon during opening.
Alcian Blue 8GX (powder) Sigma Aldrich A5268 Add 1 g powder to 100 ml 3% acetic acid (3 ml glacial acetic acid + 97 ml distilled water)
1 mL Tuberculin syringe with attached 26 G x 3/8 in intradermal bevel needle BD 305946 For injection of AOM

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ekbom, A. Ulcerative colitis and colorectal cancer. A population-based study. N. Engl. J. Med. 323, 1228-1233 (1990).
  2. Terzic, J. Inflammation and colon cancer. Gastroenterology. 138, 2101-2114 (2010).
  3. Ullman, T. A., Itzkowitz, S. H. Intestinal inflammation and cancer. Gastroenterology. 140, 1807-1816 (2011).
  4. Okayasu, I. Dysplasia and carcinoma development in a repeated dextran sulfate sodium-induced colitis model. J. Gastroenterol. Hepatol. 17, 1078-1083 (2002).
  5. Kanneganti, M., Mino-Kenudson, M., Mizoguchi, E. Animal models of colitis-associated carcinogenesis. J. Biomed. Biotechnol. 342637, (2011).
  6. Neufert, C., Becker, C., Neurath, M. F. An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression. Nat. Protoc. 2, 1998-2004 (2007).
  7. Tanaka, T. A novel inflammation-related mouse colon carcinogenesis model induced by azoxymethane and dextran sodium sulfate. Cancer Sci. 94, 965-973 (2003).
  8. De Robertis, M. The AOM/DSS murine model for the study of colon carcinogenesis: From pathways to diagnosis and therapy studies. J. Carcinog. 10, 9 (2011).
  9. Wirtz, S. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nat. Protoc. 2, 541-546 (2007).
  10. Cooper, H. S. Clinicopathologic study of dextran sulfate sodium experimental murine colitis. Lab Invest. 69, 238-249 (1993).
  11. Becker, C., Fantini, M. C., Neurath, M. F. High resolution colonoscopy in live mice. Nat. Protoc. 1, 2900-2904 (2006).
  12. Becker, C., Fantini, M. C., Wirtz, S., Nikolaev, A., Kiesslich, R., Lehr, H. A., Galle, P. R., Neurath, M. F. In vivo imaging of colitis and colon cancer development in mice using high resolution chromoendoscopy. Gut. 54, 950-954 (2005).
  13. Shaker, A. Epimorphin deletion protects mice from inflammation-induced colon carcinogenesis and alters stem cell niche myofibroblast secretion. J. Clin. Invest. 120, 2081-2093 (2010).
  14. Boivin, G. P. Pathology of mouse models of intestinal cancer: consensus report and recommendations. Gastroenterology. 124, 762-777 (2003).
  15. Cooper, H. S. Dysplasia and cancer in the dextran sulfate sodium mouse colitis model. Relevance to colitis-associated neoplasia in the human: a study of histopathology, B-catenin and p53 expression and the role of inflammation. Carcinogenesis. 21, 757-768 (2000).
  16. Yoshida, Y. The forkhead box M1 transcription factor contributes to the development and growth of mouse colorectal cancer. Gastroenterology. 132, 1420-1431 (2007).
  17. Suzuki, R. Strain differences in the susceptibility to azoxymethane and dextran sodium sulfate-induced colon carcinogenesis in mice. Carcinogenesis. 27, 162-169 (2006).
  18. Mahler, M. Differential susceptibility of inbred mouse strains to dextran sulfate sodium-induced colitis. Am. J. Physiol. 274, 544-551 (1998).
  19. Nambiar, P. R. Preliminary analysis of azoxymethane induced colon tumors in inbred mice commonly used as transgenic/knockout progenitors. Int. J. Oncol. 22, 145-150 (2003).
  20. Tanaka, T. Colorectal carcinogenesis: Review of human and experimental animal studies. J Carcinog. 8, (2009).
  21. Ciorba, M. A. Induction of IDO-1 by immunostimulatory DNA limits severity of experimental colitis. J. Immunol. 184, 3907-3916 (2010).
  22. Kerr, T. A. Dextran sodium sulfate inhibition of real-time polymerase chain reaction amplification: A poly-A purification solution. Inflamm. Bowel Dis. 18, 344-348 (2012).
  23. Tang, Y. is required for resection-induced changes in apoptosis, proliferation, and members of the extrinsic cell death pathways. Gastroenterology. 126, 220-230 (2004).
Моделирование колит, связанного с раком Azoxymethane (ОСО) и декстран сульфат натрия (DSS)
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Thaker, A. I., Shaker, A., Rao, M. S., Ciorba, M. A. Modeling Colitis-Associated Cancer with Azoxymethane (AOM) and Dextran Sulfate Sodium (DSS). J. Vis. Exp. (67), e4100, doi:10.3791/4100 (2012).More

Thaker, A. I., Shaker, A., Rao, M. S., Ciorba, M. A. Modeling Colitis-Associated Cancer with Azoxymethane (AOM) and Dextran Sulfate Sodium (DSS). J. Vis. Exp. (67), e4100, doi:10.3791/4100 (2012).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter